袁 健，陳夢元，鄭 義，樊紅鳥

(1貴州省分析測試研究院，貴州 貴陽 550014；2貴州省酒類產(chǎn)品質(zhì)量檢驗檢測院，貴州 貴陽 550014；3.貴州省檢測技術(shù)研究應(yīng)用中心，貴州 貴陽 550002)

鄰苯二甲酸酯(PAEs)是一種被廣泛使用的塑化劑，能夠顯著提升塑料制品的柔韌性和延展性[1]，并且占有80%以上的塑化劑市場[2]，常見于塑料玩具，醫(yī)用血袋以及護理產(chǎn)品等，而在現(xiàn)代餐飲業(yè)中廣受歡迎的酒水飲品里也能檢測到PAEs。釀酒過程中，酒水能通過接觸到塑料輸送管、塑料酒桶、塑料包裝等制品，從而受到PAEs污染，也有違法企業(yè)直接向酒水中加入PAEs，以增加酒水粘度，提高口感。研究表明，PAEs能夠通過呼吸道、消化道、皮膚以及其他途徑進入人體，其原型、代謝產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物均可對腎臟、肺臟、內(nèi)分泌系統(tǒng)以及生殖系統(tǒng)等造成損傷[3]，因此酒水中的PAEs污染一直是國內(nèi)公共衛(wèi)生健康的一個關(guān)注重點，加強對酒水中PAEs含量的檢測力度對改善公共衛(wèi)生條件具有重大意義。常見的PAEs檢測方法包括高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC/MS)、氣相色譜法(GC)以及氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)。大量文獻表明了這些方法在檢測PAEs時對定性和定量分析展現(xiàn)出的高精準性，如Fan等人通過HPLC在11個紅酒樣品以及30個烈酒樣品中檢測出4種PAEs[4]；Dul等人通過GC/MS確定多個茶水樣品中的PAEs成分[5]；Xu等人則通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)從包括乳制品、蒸餾酒、罐頭食品在內(nèi)的多種食物樣品中檢測出23種PAEs[6]。除了傳統(tǒng)檢測方法，近年來也有研究者針對PAEs的檢測提出了更快捷簡便且精確的新技術(shù)，如表面增強拉曼光譜(SERS)[7]和頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用(HS-SPME-GC-MS)[8]等，然而傳統(tǒng)檢測手段發(fā)展成熟，應(yīng)用廣泛，依然是多數(shù)檢測研究的首要選擇[9]。

許多國家政府部門都針對食品中的殘留PAEs作出了有關(guān)規(guī)定，以鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)為例，包括歐洲環(huán)境局、美國環(huán)保署和中國衛(wèi)生部的政府機構(gòu)都設(shè)定了300 ng/mL的殘留限量標準[10]。此外，我國于2016年發(fā)布了最新版本的GB 5009.271—2016《食品安全國家標準 食品中鄰苯二甲酸酯的測定》，對PAEs的分析檢測方法標準做出了明確規(guī)范與指導(dǎo)[11]。盡管我國對于酒水食品中的DBP和DEHP含量并未出臺明確規(guī)定作為限制，但國家食品安全風(fēng)險評估中心在綜合分析了不同國際組織提出的安全限值后，于2014年發(fā)布了文件《國家衛(wèi)生計生委辦公廳關(guān)于通報成人飲酒者DEHP和DBP初步風(fēng)險評估結(jié)果的函》(國衛(wèi)辦食品函〔2013〕283號)。文件中提出，白酒中塑化劑DEHP和DBP的含量分別在5 mg/kg和1 mg/kg以下時，對飲酒者的健康風(fēng)險處于可接受水平。本研究依據(jù)該項規(guī)定，采用GC-MS對貴州省仁懷市某釀酒生產(chǎn)廠近3年生產(chǎn)以及貯存5年至10年的大曲醬香基酒樣品進行鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)與鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)含量檢測與分析，為仁懷市白酒品質(zhì)監(jiān)控與評估提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

大曲醬香酒輪次基酒樣品(采集自仁懷市某釀酒生產(chǎn)工廠)，3年內(nèi)生產(chǎn)輪次基酒樣品140個；貯藏5年基酒樣品13個；貯藏8年基酒樣品5個；貯藏10年基酒樣品5個。

1.2 儀器設(shè)備

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)(安捷倫 7890A GC/5975 MSD)；分析天平(0.0001 g，梅特勒托利多)；渦旋振蕩器(美國賽默飛公司)等；超聲波發(fā)生器(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.3 藥品和試劑

鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)標準品(Dr.Ehrenstorfer)；鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)標準品(Dr.Ehrenstorfer)；正己烷(色譜純，Aladdin)；丙酮(色譜純，Aladdin)；實驗室自制超純水。

1.4 標準溶液配置

鄰苯二甲酸酯標準中間溶液(10 μg/mL)配置：準確量取2種標準品(1000 μg/mL)各1 mL，移至100 mL容量瓶中，并使用正己烷準確定容至容量瓶刻度線。

鄰苯二甲酸酯標準系列工作液配置：準確量取不同體積的2種鄰苯二甲酸酯標準中間溶液(10 μg/mL)，使用正己烷逐級稀釋，配置成濃度為0.00 μg/mL、0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL的標準系列溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.5 樣品前處理

準確稱取輪次基酒樣品2.0 g(精確至0.0001 g)置于25 mL具塞磨口離心管中，加入2～5 mL蒸餾水，渦旋混勻；再準確加入10 mL正己烷，渦旋振蕩1 min，劇烈振搖1 min；超聲提取30 min后，1000 r/min，5 min離心；取上清液，供GC-MS分析。

1.6 色譜條件

Agient HP-5ms色譜柱，30 m×0.25 mm×0.25 μm；進樣口溫度：260 ℃；程序升溫：初始柱溫60 ℃，保持1 min，以20 ℃/min的速度升溫至220 ℃，保持1 min，以5 ℃/min的速度升溫至250 ℃，保持1 min，再以20 ℃/min的速度升溫至290 ℃，保持7.5 min。

載氣：高純氦(純度>99.999%)，流速：1.00 mL/min；進樣方式：不分流進樣；進樣量：1 μL。

1.7 樣品溶液的測定

測定樣品前，將DBP和DEHP兩種鄰苯二甲酸酯的標準系列工作液分別注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，測定相應(yīng)的物質(zhì)的色譜峰面積，以標準工作液的質(zhì)量濃度為橫坐標，以相應(yīng)的峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。繪制完成后，將前處理過的樣品溶液注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，得到兩種待測鄰苯二甲酸酯的峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測液中鄰苯二甲酸酯的濃度。

2 結(jié)果與分析

2.1 3年內(nèi)產(chǎn)輪次基酒DBP、DEHP含量測定

在對抽取的近3年生產(chǎn)的140個醬香輪次基酒樣品(七個輪次，每輪次20個樣品)進行GC-MS檢驗后得到樣品中DBP與DEHP含量，結(jié)果如表1、表2所示。140個受檢樣品中，檢出DBP最大平均濃度為第七輪次的0.128 mg/kg，最小平均濃度為第一輪次的0.084 mg/kg；檢出DEHP最大平均濃度為第七輪次的0.152 mg/kg，最小平均濃度為第五輪次的0.116 mg/kg。由此可見，DBP和DEHP的含量與輪次數(shù)間不存在線性關(guān)系，且各自低于5.0 mg/kg和1.0 mg/kg的風(fēng)險值，兩種鄰苯二甲酸酯的含量不隨輪次的增加而上升。

表1 3年內(nèi)產(chǎn)大曲醬香輪次基酒DBP含量

表2 3年內(nèi)產(chǎn)大曲醬香輪次基酒DEHP含量

2.2 貯藏5年至10年醬香基酒DBP、DEHP含量測定

隨機抽取酒廠中貯藏5年、8年以及10年的大曲醬香基酒樣品共23個，按年份分為3組，并對其進行DBP和DEHP的含量檢測，結(jié)果如表3至表5所示。各組樣品中，檢出DBP最大平均濃度為10年基酒組的1.918 mg/kg，最小平均濃度為5年基酒組的1.128 mg/kg；檢出DEHP最大平均濃度為5年基酒組的0.234 mg/kg，最小平均濃度為3年基酒組的0.196 mg/kg。由此可見兩種鄰苯二甲酸酯的濃度并未隨貯存年限的增加而上升，各組中DBP平均濃度均顯著高于DEHP濃度。

表3 大曲醬香基酒(5年基酒)中DBP、DEHP含量

表4 大曲醬香基酒(8年基酒)中DBP、DEHP含量測定結(jié)果

表5 大曲醬香基酒(10年基酒)中DBP、DEHP含量測定結(jié)果

3 討論

本文采用了氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析方法，對大曲醬香基酒中的DBP和DEHP兩種塑化劑進行了檢測，目前對醬香輪次基酒以及醬香成品酒中的塑化劑含量尚未出臺國家標準，因此本研究采用國家食品安全風(fēng)險評估專家委員會的評估結(jié)論，將5 mg/kg和1 mg/kg分別設(shè)為DBP與DEHP的風(fēng)險評估值。從表1和表2的數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，近三年生產(chǎn)的大曲醬香基酒中DBP和DEHP的最高含量分別為0.438 mg/kg和0.238 mg/kg，均遠低于風(fēng)險評估值。而從表3～表5的數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)，盡管貯存5年至10年的醬香基酒中DEHP含量均低于風(fēng)險評估值，卻存在超過風(fēng)險評估值濃度的5年基酒樣品A1(5.83 mg/kg)以及接近風(fēng)險評估值濃度的10年基酒樣品C1和C2(3.82 mg/kg和3.46 mg/kg)，表明該地所產(chǎn)基酒具有DBP含量超標的潛在風(fēng)險。

有報道指出白酒中塑化劑來源主要分為兩類，一是原料引入，釀酒原料在通過發(fā)酵與蒸餾環(huán)節(jié)后，會自然產(chǎn)生塑化劑成分，有微量的塑化劑進入到白酒中；二是中途接觸，即在釀造過程中接觸塑料制品，塑化劑從塑料制品表面遷移進入到白酒中，這使白酒中塑化劑含量急劇增加[12]。2012年在仁懷市政府大力推動下，雖然完成了仁懷區(qū)域內(nèi)白酒生產(chǎn)企業(yè)涉及釀造過程中接觸塑料制品的接酒管、運輸管和轉(zhuǎn)運桶等的升級改造，對使用塑料制品全部換成了食品級的不銹鋼管制品，但在從原料到成品的過程中依舊存在許多可能接觸鄰苯二甲酸酯的環(huán)節(jié)，具體隱患還需進一步調(diào)查研究。