樊 葉，張喜梅，張 巖

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是指除酒精和其他明確的肝損因素所致，肝組織內(nèi)出現(xiàn)脂質(zhì)沉積超過(guò)肝臟質(zhì)量5%或以上，顯微鏡下顯示彌漫性肝細(xì)胞脂肪變的一種臨床病理綜合征[1，2]。肝活檢屬侵入性有創(chuàng)操作，推廣應(yīng)用存在一定的困難，因此尋找一種簡(jiǎn)單且無(wú)創(chuàng)的疾病識(shí)別方法并對(duì)病情進(jìn)展實(shí)施監(jiān)控是十分必要的[3]。胱抑素C(cystatin C，CysC)是一種半胱氨酸蛋白酶細(xì)胞外抑制劑，與高血壓、胰島素抵抗、肥胖等疾病有關(guān)，可反映機(jī)體的炎癥反應(yīng)狀態(tài)[4]。NAFLD患者肝臟合成和代謝功能均出現(xiàn)異常。脂蛋白α(lipoprotein α，Lp-α)在脂蛋白代謝過(guò)程中參與脂類運(yùn)輸過(guò)程，發(fā)揮脂蛋白及其受體的結(jié)合引導(dǎo)和酶活性調(diào)節(jié)等作用[5]。人新飽食分子蛋白1( nesfatin-1) 是新發(fā)現(xiàn)的可抑制食欲的生物大分子，在維持能量穩(wěn)態(tài)和正常糖代謝過(guò)程中具有重要的生理作用，參與胰島素抵抗、肥胖、糖尿病等代謝性疾病的發(fā)病過(guò)程[6]。本研究檢測(cè)了NAFLD患者血清CysC、Lp-α和nesfatin-1水平變化，分析了運(yùn)用它們?cè)u(píng)估疾病嚴(yán)重程度的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2019年7月～2021年11月我院診治的NAFLD患者119例，男性68例，女性51例；年齡為30～64歲，平均年齡為(37.5±9.8)歲。符合《非酒精性脂肪性肝病防治指南》[7]的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：酒精性或病毒性肝炎、藥物性肝損傷、自身免疫性肝?。淮嬖谌砀腥拘约膊』驉盒阅[瘤；存在嚴(yán)重的臟器功能損害；近期有創(chuàng)傷或手術(shù)等；近1個(gè)月內(nèi)服用過(guò)非甾體類抗炎藥或質(zhì)子泵抑制劑等；孕期或哺乳期婦女。另選擇同期經(jīng)性別和年齡匹配的健康體檢者65例作為對(duì)照組，其中男性37例，女性28例；年齡為30～65歲，平均年齡為(38.2±8.4)歲。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核、通過(guò)。

1.2 NAFLD嚴(yán)重程度評(píng)估 參照《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[8]中超聲診斷分度標(biāo)準(zhǔn)，將NAFLD分為輕、中、重度。①肝區(qū)近場(chǎng)彌漫性增強(qiáng)回聲，且較腎和脾強(qiáng)，遠(yuǎn)場(chǎng)回聲則呈現(xiàn)衰減形式；②肝內(nèi)管道呈現(xiàn)不清晰；③肝臟呈現(xiàn)輕或中度腫大且邊緣較為圓鈍；④肝內(nèi)血管走向正常，但血流信號(hào)減少；⑤肝右葉包膜、橫膈回聲均不完整或是不清晰。輕度：具①和②～④中任意一項(xiàng)者；中度：具①和②～④中任意兩項(xiàng)；重度：具①和②～④中任意兩項(xiàng)再加上第⑤項(xiàng)。

1.3 血清指標(biāo)檢測(cè) 采用ELISA法檢測(cè)血清CysC、Lp-α和nesfatin-1(武漢優(yōu)爾生生物工程有限公司)；使用羅氏Modular全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血生化指標(biāo)和空腹血糖(Fasting plasma glucose，F(xiàn)PG)水平(寧波美康生物科技公司)。

2 結(jié)果

2.1 兩組血糖和血脂水平比較 NAFLD患者FPG、TG和LDL-C水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05，表1)。

表1 兩組血糖和血脂水平比較

2.2 兩組血清CysC、Lp-α和nesfatin-1水平比較 NAFLD患者血清CysC水平顯著高于對(duì)照組，而血清Lp-α和nesfatin-1水平顯著低于對(duì)照組(P<0.05，表2)。

表2 兩組血清CysC、Lp-α和nesfatin-1水平比較

2.3 輕、中、重度NAFLD患者血清CysC、Lp-α和nesfatin-1水平比較 重度NAFLD患者血清CysC水平顯著高于中度或輕度患者，而血清Lp-α和nesfatin-1水平顯著低于中度或輕度患者(P<0.05，表3)。

表3 不同脂肪變程度的NAFLD患者血清CysC、Lp-α和nesfatin-1水平比較

2.4 影響NAFLD嚴(yán)重程度的多因素Logistic回歸分析 經(jīng)Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清CysC、FPG、TG和LDL-C高水平或血清Lp-α和nesfatin-1低水平是影響NAFLD嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05，表4)。

表4 影響NAFLD嚴(yán)重程度的Logistic回歸分析

2.5 應(yīng)用血清CysC、Lp-α和nesfatin-1評(píng)估重度NAFLD的效能 聯(lián)合應(yīng)用血清CysC、Lp-α和nesfatin-1水平評(píng)估重度NAFLD發(fā)生的曲線下面積(AUC)顯著高于三項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)評(píng)估(P<0.05)，其效能較高(表5、圖1)。

表5 應(yīng)用血清CysC、Lp-α和nesfatin-1評(píng)估重度NAFLD的效能

圖1 血清CysC、Lp-α和nesfatin-1評(píng)估重度NAFLD的效能

3 討論

NAFLD主要發(fā)生機(jī)制在于胰島素抵抗和系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)。隨著現(xiàn)階段肥胖和糖尿病等疾病發(fā)生率呈現(xiàn)逐年升高的趨勢(shì)，NAFLD發(fā)生率也隨之升高[9]。近年來(lái)，相關(guān)研究數(shù)據(jù)顯示[10]，普通成人NAFLD患病率達(dá) 20%～33%，在發(fā)達(dá)國(guó)家，NAFLD業(yè)已成為肝功能異常和慢性肝病發(fā)生的首要原因之一。

CysC經(jīng)有核細(xì)胞恒定速率生成，在正常情況下分泌和排泄速率基本保持恒定，而受年齡、性別、飲食等因素的影響較小，與慢性肝臟炎癥性疾病等關(guān)系密切，且隨著病程進(jìn)展，血清CysC水平呈現(xiàn)升高趨勢(shì)。因此，CysC作為一種標(biāo)志物可在一定程度上用于臨床對(duì)肝臟功能的監(jiān)測(cè)[11，12]。既往研究[13]比較了脂肪性肝炎、單純性脂肪肝和健康人群血清CysC水平差異，結(jié)果顯示，脂肪性肝炎和單純性脂肪肝患者血清CysC水平顯著升高，且隨著病情加重，血清CysC水平進(jìn)一步升高。本研究也顯示NAFLD患者血清CysC水平升高。一方面，隨著血清Cys C水平變化，影響機(jī)體胰島功能，促進(jìn)糖尿病發(fā)生發(fā)展進(jìn)程；另一方面，Cys C可能通過(guò)氧化應(yīng)激方式直接影響肝臟代謝，多種細(xì)胞成分均發(fā)生變化，包括DNA、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)等，這些均與 NAFLD病理學(xué)改變相關(guān)。按超聲診斷分度標(biāo)準(zhǔn)，將NAFLD患者分為輕、中、重度，結(jié)果隨疾病嚴(yán)重程度增加，血清Cys C水平也隨之升高。Cys C可在人體網(wǎng)膜組織、皮下脂肪組織表達(dá)，誘發(fā)脂肪相關(guān)性疾病的發(fā)生，進(jìn)而對(duì)肝臟代謝產(chǎn)生影響，參與肝臟病理學(xué)改變過(guò)程，影響慢性肝病的發(fā)展[14]。

Lp-α是一種球形脂蛋白顆粒，中性脂質(zhì)部分富含膽固醇，具疏水性，外周包繞Apo B100和Apo (a)，構(gòu)成復(fù)合物[15]。Lp-α特征性成分apo(a)由肝細(xì)胞合成，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中加工成熟后，分泌到細(xì)胞外。在血循環(huán)中，與LDL顆粒組成完整的Lp-α分子[16]。本研究NAFLD患者血清Lp-α水平顯著低于對(duì)照組。Lp-α主要合成場(chǎng)所在肝臟，因此肝臟疾病發(fā)生時(shí)，肝細(xì)胞受到損害，Lp-α合成減少，血清Lp-α水平相應(yīng)降低。相關(guān)研究顯示[17]，中重度慢性肝炎患者血清Lp-α水平顯著低于輕度慢性肝炎患者。隨著肝損傷程度加重，Lp-α合成受損，血清Lp-α水平持續(xù)降低。本研究比較了輕度、中度、重度NAFLD患者血清Lp-α水平差異，結(jié)果顯示隨著NAFLD患者病情加重，血清Lp-α水平也隨之降低，與上述研究結(jié)果一致，表明Lp-α參與脂質(zhì)代謝和蛋白質(zhì)代謝，是NAFLD患者肝功能損傷的敏感指標(biāo)和早期生物標(biāo)志物，臨床上可通過(guò)檢測(cè)血清Lp-α水平變化評(píng)估NAFLD的嚴(yán)重程度。

nesfatin-1于外周脂肪組織、胰腺、心肌、胃、小腸、睪丸等部位廣泛分布，在糖脂代謝、能量穩(wěn)態(tài)等能量代謝過(guò)程中發(fā)揮重要的作用[18]。既往研究[19]通過(guò)對(duì)糖尿病肥胖患者應(yīng)用艾塞那肽8周，發(fā)現(xiàn)患者血清nesfatin-1水平明顯升高。同時(shí)，患者肝臟脂肪含量顯著下降。本研究NAFLD患者血清nesfatin-1水平顯著低于對(duì)照組，nesfatin-1水平下降是嚴(yán)重NAFLD發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。隨著疾病進(jìn)展，血清nesfatin-1水平進(jìn)一步降低。糖代謝紊亂帶來(lái)的初次打擊和肝細(xì)胞脂肪變性后氧化應(yīng)激帶來(lái)的二次打擊是NAFLD發(fā)病的分子機(jī)制。NAFLD患者血清nesfatin-1水平下降致使體內(nèi)能量平衡出現(xiàn)紊亂，進(jìn)一步促進(jìn)NAFLD的發(fā)生和發(fā)展[20]。本研究經(jīng)ROC曲線分析血清CysC、Lp-α和nesfatin-1三者聯(lián)合檢測(cè)評(píng)估重度NAFLD方面的價(jià)值，結(jié)果顯示其AUC為0.887，具有較高的評(píng)估效能。血清CysC、Lp-α和nesfatin-1水平與NAFLD有密切的關(guān)系，或?yàn)镹AFLD的發(fā)病機(jī)制和治療研究提供了一個(gè)新的思路和靶點(diǎn)。

綜上所述，NAFLD患者血清CysC水平升高，而血清Lp-α和nesfatin-1水平降低。隨著疾病嚴(yán)重程度的加重，血清CysC水平呈升高趨勢(shì)，而Lp-α和nesfatin-1水平下降更明顯，檢測(cè)這些指標(biāo)的變化可能有助于評(píng)估患者病情。