宋嚴豪，肖新榮，周牧艷，羅芝伊，李思進，丁瑤

(1.南華大學 化學化工學院，湖南 衡陽 421001；2.浙江華才檢測技術(shù)有限公司，浙江 諸暨 311800)

有機氯農(nóng)藥是一類被廣泛應用的殺蟲劑。生活中常見的有機氯農(nóng)藥有六六六、滴滴涕、艾氏劑和狄氏劑等[1-5]，性質(zhì)較穩(wěn)定，不易被生物酶分解，農(nóng)藥脂溶性比較強，易溶于有機溶劑中，不溶于水，可殘留在農(nóng)作物、土壤、河流中很長時間，對人體造成很大的危害[6-12]。

植物提取類化妝品是以植物為原料，經(jīng)提取、分離制備植物提取物或單體，再與其他原料復配而成的化妝品[13-15]。植物提取類化妝品相對于化學合成類化妝品而言，安全性較高、皮膚吸收較好、功能性更突出，但在種植過程和提取過程中的農(nóng)藥殘留問題也不可忽視[16-19]。本研究建立檢測植物提取類化妝品中有機氯農(nóng)藥殘留的方法。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

乙腈,色譜純;丙酮、正己烷、氯化鈉、無水硫酸鎂(250 ℃烘4 h)、N-丙基乙二胺(PSA)、十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18)、檸檬酸鈉、三水合二檸檬酸二鈉 均為分析純。六六六(α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC)、滴滴涕(o,p′-DDD、p,p′-DDD、o,p′-DDE、p,p′-DDE、o,p′-DDT、p,p′-DDT)、 艾氏劑、百菌清、環(huán)氧七氯、氟硅唑、狄氏劑、七氯,標準品均為檢測公司購買，質(zhì)量濃度為1 000 mg/L。

MS-GP2010型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀;RD-50AT2 型多管架自動平衡離心機;TG16-WS型臺式高速離心機;SPX222ZH型電子天平;UMV-2型多管漩渦混合器;XW-80A型漩渦混合器;KQ-600DE型數(shù)控超聲波清洗器;HP-5016S型水浴式氮氣吹干儀。

1.2 植物提取類化妝品

X公司所生產(chǎn)化妝品。

2 結(jié)果與討論

2.1 氣相色譜質(zhì)譜條件

色譜柱：HP-5 ms(30 m×0.25 μm×0.25 m)檢測器：EI源，載氣：高純氮，進樣量：1 μL；柱流速：1.2 mL/min；進樣方式：不分流。內(nèi)標物質(zhì)：環(huán)氧七氯；進樣口溫度：280 ℃；檢測器溫度：300 ℃，程序升溫；初始溫度40 ℃(保持1 min)，再以20 ℃/min升到130 ℃，然后以5 ℃/min升高到250 ℃(保持5 min)， 再以10 ℃/min升高到300 ℃(保持10 min)。 電子轟擊源：75 eV；離子源溫度：230 ℃；GC-MS接口溫度：280 ℃；碰撞氣：氬氣；掃描方式：多反應監(jiān)測方式(MRM)。

2.2 所需溶液的制備

2.2.1 標準溶液 標準儲備溶液的配制：分別準確稱取10 mg(精確至0.1 mg)農(nóng)藥標準品置于10 mL容量瓶中，用丙酮溶解定容至刻度線，振蕩使其充分混勻轉(zhuǎn)移至棕色標品瓶中，在4 ℃下避光保存。混合標準溶液的配制：從每個標準儲備溶液中分別移取一定量的標準溶液在10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度線，配成混合標準溶液，振蕩使其充分混勻轉(zhuǎn)移至棕色標品瓶中，在4 ℃下避光保存。根據(jù)實驗需要進行稀釋，配制為0.05,0.1,0.2,0.3,0.5 mg/L 的梯度混合標液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

2.2.2 待測樣品溶液的制備 提?。悍Q取5.00 g樣品(精確至0.01 g)，在50 mL離心管中。加入10 mL 乙腈溶液，在多管渦旋混合器中渦旋5 min，靜置等乙腈層與水層分離后，再稱取3 g無水硫酸鎂和2 g氯化鈉，1.00 g檸檬酸鈉，0.50 g檸檬酸氫二鈉搖勻，在渦旋混合器中渦旋5 min，超聲30 min， 放入離心機中4 000 r/min離心5 min。

濃縮：取上清液2 mL于15 mL離心管中，40 ℃水浴氮吹至近干，用2 mL丙酮復溶，再置于裝有(150 mg MgSO4,50 mg PSA,80 mg C18)的凈化離心管中，渦旋振蕩1 min，在9 000 r/min下離心2 min，準確吸取1 mL到進樣瓶中，渦旋混合后用于GCMS的測定。

3 方法驗證

3.1 方法的線性關(guān)系和檢出限

在優(yōu)化后的前處理條件下，用面膜空白的樣品基質(zhì)提取液分別配制質(zhì)量濃度為0.05,0.1,0.2,0.3,0.5 mg/L的5組混合基質(zhì)標準溶液。各目標化合物的定量離子峰面積和內(nèi)標物定量離子峰面積的比值為縱坐標，各目標化合物標準溶液的質(zhì)量濃度和內(nèi)標物質(zhì)量濃度的比值為橫坐標，繪制標準曲線。取信噪比S/N=3的空白樣品添加濃度確定檢出限，取信噪比S/N=10的空白樣品添加濃度確定定量限。18種有機氯農(nóng)藥在化妝品基質(zhì)中的響應值和含量均呈良好的線性關(guān)系，結(jié)果見表。線性相關(guān)系數(shù)R均≥0.995，線性范圍為0.05～0.5 mg/kg，檢出限為0.006～0.059 mg/kg。定量限為0.018～0.190 mg/kg。該方法滿足多農(nóng)殘檢測要求。

表1 面膜基質(zhì)中18種有機氯農(nóng)藥的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限Table 1 Linear equations,correlation coefficients and detection limits of 18 organochlorine pesticides in the mask matrix

3.2 方法加標回收率和精密度

實驗在面膜空白基質(zhì)中加入18種有機氯農(nóng)藥混標進行回收率實驗。添加水平分別為0.1，0.2，0.5 mg/L的濃度。每個樣品加標后靜置20 min，保證樣品與農(nóng)藥混標充分混合。采用優(yōu)化后的方法進行前處理，每個添加水平重復測定6次,經(jīng)過儀器分析后，得到以下數(shù)據(jù)。面膜基質(zhì)回收率在75.23%～107.49%之間，相對標準偏差2.37%～6.31%，從實驗結(jié)果看，加標回收率在70%～120%之間，相對標準偏差均低于7%，可以滿足農(nóng)藥多殘留檢測的需求。

表2 18種有機氯農(nóng)藥在面膜中3個添加水平下的平均回收率及精密度Table 2 Average recovery rate and precision of 18 kinds of organochlorine pesticides at three levels of addition in the mask

4 討論

(1)本實驗采用QuEChERS法，優(yōu)化有機氯農(nóng)藥殘留檢測的前處理方法，并將其用于植物提取類化妝品中的有機氯農(nóng)藥殘留檢測，該方法有快速、簡便、經(jīng)濟、高效、耐用和安全等優(yōu)點。采用乙腈作為溶劑，加入2 g氯化鈉、3 g無水硫酸鎂、1 g檸檬酸鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉進行提取，凈化劑：150 mg MgSO4、50 mg PSA、80 mg C18。結(jié)果18種有機氯農(nóng)藥的線性范圍為0.05～0.5 mg/kg，線性相關(guān)系數(shù)均≥0.995，檢出限為0.006～0.059 mg/kg，定量限為0.018～0.190 mg/kg。在0.1,0.2,0.5 mg/L三個濃度下加標回收率在75.23%～107.49%之間，相對標準偏差RSD在2.37%～6.31%之間。實驗結(jié)果也符合檢測相關(guān)標準的要求，證明此實驗方案有一定的可行性和創(chuàng)新性。

(2)從當前來看，以植物為原料的化妝品符合人們的消費需要，也迎合了市場發(fā)展趨勢，不過植物的成分復雜，本身有一些有害成分存在，同時生長過程中使用農(nóng)藥的植物中也含有部分農(nóng)藥殘留，這就會影響植物提取類化妝品在市場上的使用安全問題。在報道的農(nóng)藥殘留檢測中，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)有靈敏度高、重復性好、定量檢測能力強等特點，是目前最常用的檢測手段。相信隨著科技和分析技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)更加簡便、準確、高效的檢測技術(shù)，市場上也會研發(fā)出更加綠色、安全的植物提取類化妝品，為消費者的安全提供保障。