陳小敏，盧庭啟，鐘鉬芝，黎 倩，侍守佩，張躍非

(四川省綿陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，四川 綿陽 621000)

食用菌生產(chǎn)是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的重要組成部分，在農(nóng)林畜生產(chǎn)廢棄物資源化利用、土壤改良、農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境保護以及大健康等領(lǐng)域中具有不可替代的重要地位，是生態(tài)農(nóng)業(yè)、循環(huán)農(nóng)業(yè)、設(shè)施農(nóng)業(yè)、智慧農(nóng)業(yè)、都市農(nóng)業(yè)重要的載體，是有效解決農(nóng)村面源污染、促進農(nóng)村可持續(xù)發(fā)展、助力鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略的重要支撐產(chǎn)業(yè)。四川綿陽地區(qū)菌種資源豐富、農(nóng)林生產(chǎn)廢棄物多，林下資源面積廣，食用菌栽培面積逐年上升，經(jīng)濟效益日益顯著，但是存在種植技術(shù)不統(tǒng)一、原料使用單一、科技創(chuàng)新研究、集成示范與推廣基礎(chǔ)薄弱，林下經(jīng)濟發(fā)展緩慢，農(nóng)林-菌循環(huán)農(nóng)業(yè)沒有系統(tǒng)的、標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)規(guī)程等問題，嚴(yán)重阻礙了現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展。

大球蓋菇在分類學(xué)上隸屬于擔(dān)子菌門，傘菌綱，傘菌目，球蓋菇科，球蓋菇屬。大球蓋菇營養(yǎng)豐富、色澤艷麗、蓋滑柄脆、清香可口，富含蛋白質(zhì)、多糖、礦質(zhì)元素等生物活性物質(zhì)，是國際菇類交易市場上的十大品種之一，也是聯(lián)合國糧農(nóng)組織向發(fā)展中國家推薦的新菇種。近年來在東北、湖北等地開發(fā)推廣，已成為當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)經(jīng)濟來源的支柱產(chǎn)業(yè)，依靠種植大球蓋菇走上生財路的屢見不鮮，出現(xiàn)了大球蓋菇的種植熱潮，取得了良好的經(jīng)濟效益和社會效益。大球蓋菇抗性強，栽培技術(shù)簡便，可操作性強，栽培模式多種多樣。栽培原料來源豐富，可以充分利用各種作物秸稈、林業(yè)生產(chǎn)的廢木屑等，如玉米秸稈、玉米芯、稻草、稻殼、油菜秸稈、木屑枝條等，這些資源都是農(nóng)林牧生產(chǎn)的副產(chǎn)品，成本低，為可再生資源。種植大球蓋菇不僅可以有效解決秸稈露天焚燒及直接還田所帶來的病蟲害加重 的問題，還可提升秸稈綜合利用水平和效益，變廢為寶，是生態(tài)農(nóng)業(yè)的主力軍。大球蓋菇菌絲分解后的菌渣可直接還田，也可以作為育苗基質(zhì)，改良土壤，增加土壤肥力，產(chǎn)業(yè)發(fā)展形成了良好的生態(tài)循環(huán)農(nóng)業(yè)。種植大球蓋菇是一項短平快的脫貧致富項目，可帶動村民致富，產(chǎn)業(yè)化符合國家發(fā)展綠色農(nóng)業(yè)、高質(zhì)量農(nóng)業(yè)、鄉(xiāng)村振興的發(fā)展需要，產(chǎn)業(yè)大有可為，市場前景廣泛。

目前，大球蓋菇種植正往規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化方向，伴隨著種植面積的逐年增大、產(chǎn)業(yè)化快速發(fā)展，影響該產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要問題也凸顯出來，栽培品種選擇是主要問題之一。部分地方出現(xiàn)盲目引種，引進菌種與當(dāng)?shù)丨h(huán)境氣候不適應(yīng)，導(dǎo)致減產(chǎn)，造成一定的經(jīng)濟損失。因此篩選適宜當(dāng)?shù)胤N植的大球蓋菇種質(zhì)資源顯得尤為重要，本研究將廣泛收集大球蓋菇優(yōu)勢菌株，通過適應(yīng)性出菇試驗，篩選適宜綿陽地區(qū)種植的大球蓋菇種質(zhì)資源。選育適宜本地種植的大球蓋菇種質(zhì)資源，是開拓大球蓋菇種植的推廣空間、提升其經(jīng)濟效益和生態(tài)效益、形成種植模式規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化的重要抓手。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試大球蓋菇菌株10株，采自各地生產(chǎn)用種，具體信息見表1。

表1 供試菌株

1.2 菌株分離

PDA培養(yǎng)基配方： 200g土豆，20g瓊脂，20g葡萄糖，加水定容至1L。

PDA斜面培養(yǎng)基的制作：將土豆洗凈去皮，切成小塊，加水煮20～30min，用四層紗布過濾得到澄清液體。瓊脂經(jīng)冷水溶解，倒入過濾土豆水中繼續(xù)加熱，煮沸后加入葡萄糖使其充分溶解，加水定容。分裝至試管中，加塞包扎，121℃滅菌20min，取出后放置冷卻。剔除大球蓋菇子實體表面泥土，用75%消毒酒精對采集到的大球蓋菇進行表面消毒，在超凈工作臺上掰開子實體，在無菌環(huán)境下，用鑷子取中間部分置于PDA斜面培養(yǎng)基中，25℃避光恒溫培養(yǎng)7d左右。挑取表面未感染的菌絲轉(zhuǎn)接于新的PDA斜面培養(yǎng)基中，繼續(xù)恒溫培養(yǎng)，純化得到大球蓋菇菌絲。

1.3 菌絲生長速度比較

用打孔器取一塊4cm×4cm的大球蓋菇菌絲固體培養(yǎng)物，分別接種于PDA平板培養(yǎng)基中央，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。每天測量菌絲圈半徑直至長滿整個培養(yǎng)皿，每個菌株設(shè)置3個重復(fù)。

1.4 大球蓋菇原種、栽培種的制作

大球蓋菇原種、栽培種配方：木屑33%、谷殼33%、玉米芯33%、石膏1%。原料選用新鮮無霉變的，用之前進行預(yù)濕發(fā)酵，將上訴配方按比例進行混合，含水量控制在60%～70%，裝瓶(袋)進行滅菌，高溫高壓滅菌6h。待菌料冷卻后，于接種室進行接種，全程注意無菌操作，避免雜菌感染。接種后的原種、栽培種，放置于25℃恒溫暗光培養(yǎng)，保持室內(nèi)空氣清新、干燥。隨時觀察菌絲生長情況，發(fā)現(xiàn)有感染的菌袋，即使剔除，防止感染。

1.5 播種及田間管理

田間試驗于綿陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院大棚進行，每個處理長10m，寬1m，即栽培面積10m2。播種前將新鮮無霉變的木屑、玉米芯、谷殼進行等比例混合，提前噴水使得菌料保持濕潤，堆料進行發(fā)酵，菌料溫度過高時及時翻堆。播種前去除田間的雜草和上茬作物，讓表面土壤充分暴曬，減少后續(xù)病蟲害。播種采用地面直接鋪料方式(20kg/m2)，第一層鋪料厚8～10cm，然后播50%菌種。第二層鋪料厚6～8cm，再播種50%菌種。最后鋪料蓋3～5cm。播種時將菌種掰成鴿子蛋大小，采用梅花形穴播法，菌種之間間隔5～8cm。播完種后在菌料表面覆蓋3～5cm泥土，表面噴灑霧狀水，保持菌料及表層土壤濕潤。一般播種后3d菌絲開始萌發(fā)，整個發(fā)菌期間要保持表面濕潤，做到少噴、勤噴，噴水量過大容易造成菌絲衰退。菌絲長滿箱面后，噴大水，增加表面濕度，保持通風(fēng)換氣，促進原基形成。子實體成熟標(biāo)志為菌蓋邊緣卷曲，但尚未開傘，此時抓住菌腳輕輕向上拔起，及時填補空隙，以便于菌絲恢復(fù)出二潮菇。

1.6 數(shù)據(jù)處理

觀察記載每個菌株的菌絲生長情況，量取菌絲生長速度。稱取重量，統(tǒng)計累計產(chǎn)量，觀察子實體形態(tài)特征，評價子實體的農(nóng)藝性狀，計算不同菌株的生物轉(zhuǎn)化率等?？偨Y(jié)不同大球蓋菇菌株菌絲生長的情況產(chǎn)量的多少。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同菌株菌絲生長速度的影響

將不同的大球蓋菇菌絲接種至PDA平板培養(yǎng)基中，置于25℃恒溫培養(yǎng)，直至菌絲圈長滿整個培養(yǎng)基，不同菌絲的生長速度有著明顯的差異(表2所示)。接種3d后，QG-10號菌株率先萌發(fā)，生長初期菌絲生長緩慢，隨著培養(yǎng)時間的增加，菌絲生長速度變快。菌絲圈生長速度結(jié)果顯示：QG-10號菌株生長速度最快，其次是QG-6，而QG-9菌株生長速度最慢。

表2 不同菌株生長速度的比較

2.2 不同菌株菌絲發(fā)菌的影響

對不同菌株進行出菇試驗，9月下旬在大棚里進行了田間出菇試驗。不同大球蓋菇菌株的菌絲均為白色毛絨狀，菌絲附著在培養(yǎng)料上，長滿整個培養(yǎng)料后，菌絲開始紐結(jié)，生長出許多白色的小原基。

從表3可以看出，大球蓋菇播種后，不同菌株在田間生長時期表現(xiàn)出明顯的差異。菌株QG-10的發(fā)菌速度最快，菌絲生長勢旺盛，發(fā)菌40d后出現(xiàn)原基,原基粗壯且數(shù)量多。其次是菌株QG-9。菌株QG-8的發(fā)菌速度最慢，菌絲纖細(xì)，生長緩慢，播種52d后菌絲才長滿箱面，55d后才出現(xiàn)原基，原基弱小且數(shù)量較少。

表3 不同菌株現(xiàn)原基時間的比較

2.3 不同菌株產(chǎn)量的比較

從表4可以看出，不同菌株在田間出菇試驗中，產(chǎn)量存在明顯的差異。其中QG-10號菌株的產(chǎn)量最高，為12.45 Kg/m2，其次是QG-9，為11.46Kg/m2。QG-8號菌株的產(chǎn)量最低，僅有4.97Kg/m2。從子實體的品相來看，QG-10號菌株長出的大球蓋菇菇型圓整，肉質(zhì)較為厚實，菌蓋不易開傘，子實體的整齊度較為一致，優(yōu)質(zhì)菇較高，達60.07%，整體表現(xiàn)最佳。其次是QG-9，子實體品相、產(chǎn)量、優(yōu)質(zhì)菇比例等整體表現(xiàn)也較好，稍次于QG-10號菌株。而QG-8號菌株生長出的大球蓋菇效果最差，子實體品相差，腿長易開傘，產(chǎn)量低，出菇期間整齊度低，且優(yōu)質(zhì)菇的比例較少。

表4 不同菌株產(chǎn)量的比較

3 討論

種植大球蓋菇具有良好的發(fā)展前景，栽培模式簡單粗放，具有較強的抗逆性，可利用原料非常廣泛。近些年由于農(nóng)戶盲目引種，導(dǎo)致引進菌株不適宜本地環(huán)境和氣候，導(dǎo)致減產(chǎn)。針對這一問題，開展適合綿陽地區(qū)栽培的大球蓋菇菌株篩選試驗。廣泛收集大眾栽培的大球蓋菇菌株，通過測定菌絲生長速度判斷菌株活性。結(jié)果表明，不同大球蓋菇菌株在生長速度上存在明顯的差異，從河南引進的QG-10菌株率先萌發(fā)，生長速度較快，說明該菌株活性較強。通過田間出菇試驗，來篩選適宜綿陽地區(qū)種植的大球蓋菇菌株。結(jié)果表明，雖然不同菌株均能出菇，但在出菇期間的表現(xiàn)存在明顯的差異。QG-10、QG-9這2個菌株形成原基速度較快，且原基數(shù)量較多。從出菇情況來看，QG-10菌株在田間出菇試驗中表現(xiàn)最佳，產(chǎn)量最高，子實體的品質(zhì)較好，菇形矮胖，肉質(zhì)緊實，菌蓋開傘率較低，優(yōu)質(zhì)菇比例及整齊度高。QG-9菌株在田間出菇試驗中表現(xiàn)良好，產(chǎn)量明顯高于其它8個菌株，子實體品質(zhì)優(yōu)，優(yōu)質(zhì)菇比例及整齊度較高。而QG-8菌株在田間出菇試驗中表現(xiàn)極差，產(chǎn)量明顯低于其它菌株，子實體品質(zhì)差，菇形菌柄細(xì)長，菌蓋小易開傘，優(yōu)質(zhì)菇比例及整齊度較低。從不同地區(qū)引進的10個大球蓋菇種質(zhì)資源，在綿陽地區(qū)進行出菇試驗，在田間的表現(xiàn)存在明顯的差異性。從陜西、河南引進的QG-10、QG-9這2個種質(zhì)資源能很好地適應(yīng)綿陽地區(qū)的環(huán)境和氣候，可以進行田間栽培。而從遂寧引進的QG-8菌株田間栽培效果不佳，這可能是QG-8原始種植區(qū)的氣候與綿陽地區(qū)存在明顯的差異，導(dǎo)致該菌株不適應(yīng)綿陽地區(qū)種植。從外省引進的QG-10、QG-9菌株明顯優(yōu)于四川本地菌株，這可能是四川本地種植的大球蓋菇種質(zhì)資源存在明顯退化現(xiàn)象，亟需對本地大球蓋菇種質(zhì)資源進行優(yōu)化選育。

從上述結(jié)果可以看出，QG-10、QG-9菌株在田間出菇試驗中表現(xiàn)良好。從引進的10個大球蓋菇菌株中，篩選得到適宜綿陽地區(qū)種植的大球蓋菇菌株2個，分別為QG-10、QG-9，其特點是生長速度快，菌絲潔白濃密，抗逆性強，產(chǎn)量高且子實體品相好，菇型圓整，肉質(zhì)厚實，優(yōu)質(zhì)菇的比例高。