王玲玲

（遼寧省農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心 110032）

1 乳尿素氮的產(chǎn)生機(jī)制

奶牛日糧主要營養(yǎng)成分是蛋白和能量兩個(gè)方面。在瘤胃中微生物在細(xì)菌、原蟲和真菌的作用下將蛋白質(zhì)水解為肽與氨基酸，部分氨基酸會在脫氨基作用下降解為有機(jī)酸、氨、二氧化碳，氨可被瘤胃微生物利用合成蛋白質(zhì)。當(dāng)日糧蛋白質(zhì)含量過高，降解速度過快而能量供應(yīng)不足時(shí)，多余的氨會被瘤胃壁吸收進(jìn)入血液并循環(huán)到肝臟形成尿素；瘤胃中過量的氨基酸也轉(zhuǎn)化為尿素。所生成的尿素一小部分通過血液和唾液進(jìn)入瘤胃繼續(xù)參與瘤胃內(nèi)氮代謝，大部分經(jīng)過尿液排出?？梢?，尿素是肝臟把體內(nèi)有毒的氨轉(zhuǎn)變?yōu)闊o毒形式的一種小分子物質(zhì)，是體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝最終產(chǎn)物。進(jìn)入血液的血液尿素氮在泌乳過程中會通過乳腺上皮細(xì)胞擴(kuò)散進(jìn)入乳中成為MUN。其具有取樣方便、代表性好、奶牛無應(yīng)激反應(yīng)、測定結(jié)果穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)被作為必檢指標(biāo)之一[2]。

2 影響乳尿素值的主要因素

2.1 營養(yǎng)水平

日糧中蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)降解率對MUN 濃度的影響是極顯著的，翟少偉對不同日糧處理組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析表明，蛋白水平1%的變化對MUN 測定值和氮的利用率都有顯著的影響；奶牛蛋白質(zhì)攝入量也是引起測定值變化的主要因素，當(dāng)日糧蛋白水平的差異不到1.0%時(shí)即可對測定值產(chǎn)生顯著影響，與黃文明等的研究日糧中粗蛋白與MUN 之間的相關(guān)指數(shù)最高的結(jié)果一致，當(dāng)日糧粗蛋白每增加1%，MUN 測定值升高1.32mg/dL，同時(shí)降低了氮的利用率。

日糧蛋白質(zhì)降解率對MUN 濃度的影響報(bào)道有所偏差，主要是由于日糧蛋白降解率的差異程度和日糧蛋白總攝入量對不同蛋白組分的掩蓋作用。目前大多數(shù)學(xué)者研究結(jié)果表明日糧中蛋白質(zhì)降解率的變化對MUN 值影響不顯著。但是黃文明等研究表明，過瘤胃蛋白含量對MUN 值有極顯著影響，翟少偉研究表明奶牛日糧的RDP 水平比RUP 水平更容易提高尿素氮的濃度[3]。

日糧能量不足也會導(dǎo)致MUN 濃度升高，能量不足時(shí)，鳥氨酸循環(huán)會加劇能量的需要，奶牛便動(dòng)用機(jī)體組織供能分解蛋白質(zhì)再進(jìn)入肝臟代謝轉(zhuǎn)化為尿素，MUN 濃度也會隨著增高。如果日糧中的能量滿足微生物生長需要，即使提高能量水平也不會降低MUN 濃度。當(dāng)日糧中缺少非結(jié)構(gòu)性碳水化合物時(shí)，瘤胃中的氨濃度會升高而無法被微生物利用會導(dǎo)致MUN 濃度升高。因此，MUN 濃度高并不一定代表蛋白質(zhì)過量。 一些學(xué)者研究認(rèn)為能量對MUN 沒有顯著影響。目前研究中日糧營養(yǎng)素對奶牛MUN 的濃度影響存在差異可能與試驗(yàn)研究中研究方法、日糧結(jié)構(gòu)，群體管理及品種有一定關(guān)系，還待進(jìn)一步研究。

2.2 采樣時(shí)間和取樣方法

MUN 值的準(zhǔn)確性還受取樣方法和采樣時(shí)間的影響，目前我國取樣方法主要有手工和流量計(jì)取樣兩種方法，對MUN 濃度存在極顯著差異。手工取樣僅收集某時(shí)間點(diǎn)的奶樣，而流量計(jì)是整個(gè)擠奶過程中的奶樣，因此流量計(jì)取樣更具代表性。在一天早中晚三次取樣中濃度差異極其顯著，早晨的濃度極顯著高于中午和晚上，晚上略高于中午；擠奶前期的濃度顯著高于后期，隨著擠奶時(shí)間的延長濃度也在下降。喂料和擠奶的間隔時(shí)間也是影響其濃度的主要因素，當(dāng)奶牛在進(jìn)食4～6h 內(nèi)濃度最高，飼喂前2h 比后2h 略高[4]。在特定條件下，MUN 濃度的變化還會與產(chǎn)奶量呈正比關(guān)系。

2.3 防腐劑和保存條件

在奶樣測定中會加入防腐劑保持成分穩(wěn)定性，研究顯示，在奶樣中加入0.003g 的重鉻酸鉀時(shí)MUN 值會略高于不加重鉻酸鉀的奶樣，略低于加入雙倍量重鉻酸鉀的奶樣，但是差異不顯著。如果奶樣中加入0.005g 的苯鉀酸鈉測定值略高于不加苯鉀酸鈉的奶樣，顯著高于加入雙倍量的奶樣，這與添加山梨酸鉀的研究結(jié)果一致。因此，在MUN 測定時(shí)應(yīng)選0.003g 的重鉻酸鉀做為防腐劑，在添入重鉻酸鉀后保存溫度對測定值也會產(chǎn)生影響，常溫保存時(shí)，濃度會逐漸下降，第6d 后會降到時(shí)最低水平，到第8d 時(shí)濃度會降了58%；4℃保存時(shí)，濃度在4～10d 變化輻度較大；劉琴等究發(fā)現(xiàn)，常溫時(shí)濃度會忽高忽低，差異不顯著；冷藏條件下，測定值有顯著差異[5]。郭同軍等研究表明，加防腐劑保存的奶樣中測定值與不加入防腐劑奶樣中測定值差異極顯著[6]，與冷凍保存的奶樣中測定值差異不顯著，冷凍保存的測定值與鮮奶樣差異極顯著。重鉻酸鉀或冷凍保存時(shí)可能會抑制了產(chǎn)生脲酶的一些微生物的生長，才可保持乳尿素濃度不變。一般鮮奶樣中尿素氮值會在2d 后急劇下降，可能是因?yàn)楫a(chǎn)生脲酶的細(xì)菌和真菌大量繁殖所致，因此，無論是常溫還是冷藏條件下保存指標(biāo)均不穩(wěn)定，都應(yīng)在采樣后的2d內(nèi)完成測定，避免出現(xiàn)檢測偏差。

2.4 檢測儀器

不同檢測方法和實(shí)驗(yàn)室之間的MUN 檢測值都存在差異。目前，國內(nèi)外用于快速檢測尿素氮的儀器主要有CL-10、Skalar、本特利、 福斯4000 和6000。在同一實(shí)驗(yàn)室，對五種儀器測定結(jié)果進(jìn)行分析，本特利和福斯6000 的檢測結(jié)果無明顯差異，福斯4000 不適用于MUN 的檢測；有研究表明福斯4000的準(zhǔn)確性和重復(fù)性優(yōu)于CL-10 法。但是在不同實(shí)驗(yàn)室之間福斯6000 檢測值有高有低，本特利檢測值的重現(xiàn)性最好。不同實(shí)驗(yàn)室之間檢測值研究顯，CL-10 的檢測值有顯著差異，福斯6000檢測值有差異。實(shí)驗(yàn)室與牧場之間的交互作用對檢測值也有影響，其中實(shí)驗(yàn)室占33.8%，不同牧場之間占59.5%；實(shí)驗(yàn)室之間的差異主要來源于操作人員不同；不同牧場之間的差異主要來于飼養(yǎng)管理、日糧水平、采樣方式及保存方式等的差異。因此目前在檢測分析中亟待解決的是完善制定不同實(shí)驗(yàn)室和不同儀器的校正方法，使檢測值在各實(shí)驗(yàn)室的測定值具有可比性和穩(wěn)定性。

綜上所述，在測定中影響尿素氮值的有內(nèi)在和外在因素，內(nèi)在因素主要是營養(yǎng)因素，奶牛品種不同和飼養(yǎng)管理不同等導(dǎo)致奶牛對MUN 的耐受程度不同；外在因素中主要是奶樣的取樣方法、保存方法和測定方法不同及牧場和實(shí)驗(yàn)室的交互作用對檢測值的影響。在探索MUN 值的準(zhǔn)確性時(shí)應(yīng)著重考慮內(nèi)在因素和外在因素的影響，也是今后繼續(xù)研究的方向。