褚洪永，張 嵐，趙 強(qiáng)，陳相堂，王曉飛，張建柏

( 煙臺(tái)市海洋經(jīng)濟(jì)研究院，山東 煙臺(tái) 264000 )

長(zhǎng)牡蠣(Crassostreagigas)屬軟體動(dòng)物門(mén)雙殼綱牡蠣目牡蠣科巨牡蠣屬，起源于東亞海域，廣泛分布于日本、韓國(guó)和中國(guó)北方沿海，是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)貝類之一。山東省和遼寧省是我國(guó)長(zhǎng)牡蠣主產(chǎn)區(qū)，據(jù)統(tǒng)計(jì)，2020年產(chǎn)量約1.28×107t，牡蠣養(yǎng)殖是我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖重要的組成部分[1]。

作為全球分布較為廣泛的雙殼貝類之一，長(zhǎng)牡蠣的傳播和分布與人類的活動(dòng)和有意識(shí)的引種密不可分。自1964年起，長(zhǎng)牡蠣被多次引種至加拿大和美國(guó)太平洋沿海進(jìn)行人工養(yǎng)殖，并受到當(dāng)?shù)叵M(fèi)者的追捧，形成了體量龐大的市場(chǎng)[2]。1964年，長(zhǎng)牡蠣被引入荷蘭西南部沿海進(jìn)行養(yǎng)殖[3]。此后，法國(guó)在1971—1975年先后多次大規(guī)模引種長(zhǎng)牡蠣，其很快適應(yīng)了當(dāng)?shù)氐淖匀画h(huán)境，并迅速取代受病毒性疾病影響的葡萄牙牡蠣(C.angulata)，引種取得巨大成功[4]。在我國(guó)，長(zhǎng)牡蠣是北方沿海重要的土著種和經(jīng)濟(jì)貝類，在以長(zhǎng)江口為界的中國(guó)南方沿?；緵](méi)有分布[5]。20世紀(jì)80年代以來(lái)，貝類育種工作者曾多次嘗試從日本和澳大利亞向我國(guó)南方沿海引種長(zhǎng)牡蠣，均未獲成功，究其原因主要?dú)w結(jié)于中國(guó)南方海域夏季海水溫度過(guò)高[6-8]。同時(shí)，關(guān)于長(zhǎng)牡蠣在我國(guó)南方海域室內(nèi)人工育苗的研究也鮮有報(bào)道。

作為我國(guó)北方傳統(tǒng)的海水養(yǎng)殖貝類，長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)殖苗種以人工育苗為主，相較于半人工采苗，可以極大地降低采苗風(fēng)險(xiǎn)，確保長(zhǎng)牡蠣苗種生產(chǎn)的穩(wěn)定性。長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗技術(shù)在我國(guó)北方沿海開(kāi)發(fā)較早，經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展和經(jīng)驗(yàn)累積，長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗技術(shù)逐漸完善。在自然海區(qū)中，長(zhǎng)牡蠣繁殖季節(jié)為6—8月，為保證長(zhǎng)牡蠣的提早上市，我國(guó)北方長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗需要提前3～4個(gè)月，其間利用升溫海水進(jìn)行親貝促熟和幼蟲(chóng)培育，需要消耗較多的人力和物力[9-10]。而同時(shí)期，我國(guó)南方部分海域自然水溫條件優(yōu)越，更能滿足長(zhǎng)牡蠣促熟和人工育苗的需求，這為長(zhǎng)牡蠣的室內(nèi)人工育苗和生產(chǎn)提供了充足的條件。在牡蠣的人工養(yǎng)殖中，養(yǎng)殖轉(zhuǎn)移是國(guó)外某些地區(qū)牡蠣養(yǎng)成中重要的環(huán)節(jié)，相關(guān)研究表明，適時(shí)進(jìn)行牡蠣養(yǎng)殖轉(zhuǎn)移，可以預(yù)防牡蠣的大面積死亡[11-13]，獲得快速生長(zhǎng)或者在上市前育肥以提高牡蠣品質(zhì)[14-16]，而養(yǎng)殖轉(zhuǎn)移的重要性正在被逐漸認(rèn)識(shí)。此外，我國(guó)國(guó)家水產(chǎn)種業(yè)南繁基地的打造明確了水產(chǎn)養(yǎng)殖品種南移繁育的發(fā)展方向。

筆者試驗(yàn)性地開(kāi)展長(zhǎng)牡蠣在廣西北部灣和山東萊州灣海區(qū)的室內(nèi)人工育苗與養(yǎng)成研究，探討有效降低長(zhǎng)牡蠣人工育苗成本和提高長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)殖效率的方法，以期促進(jìn)南、北方牡蠣養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)交流，并優(yōu)化我國(guó)長(zhǎng)牡蠣產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)。

1 材料與方法

1.1 親本來(lái)源及環(huán)境信息

苗種繁育使用的長(zhǎng)牡蠣親本全部來(lái)源于山東省乳山市牡蠣養(yǎng)殖基地，經(jīng)過(guò)分子鑒定為純種長(zhǎng)牡蠣。試驗(yàn)分別在廣西壯族自治區(qū)北海市北部灣海域和山東省煙臺(tái)市萊州灣海域開(kāi)展長(zhǎng)牡蠣的促熟和室內(nèi)人工育苗，比較長(zhǎng)牡蠣在兩地進(jìn)行人工育苗的差異，隨后選取部分苗種在北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)和黃海養(yǎng)殖場(chǎng)開(kāi)展北部灣和萊州灣長(zhǎng)牡蠣苗種的養(yǎng)成比較。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 親本選擇與促熟

在北部灣長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗試驗(yàn)中，親本于2018年2—3月被運(yùn)輸至廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院實(shí)驗(yàn)基地，清洗并篩選健康無(wú)損傷個(gè)體150～200枚，親本置于扇貝籠中吊養(yǎng)在室外促熟池，水溫19～30 ℃，鹽度28～32，pH 8.11～8.24。長(zhǎng)牡蠣親貝暫養(yǎng)期間，每日早晚測(cè)量水溫、鹽度、pH，取樣觀察長(zhǎng)牡蠣性腺發(fā)育和室外促熟池藻類豐富度，并留意暫養(yǎng)池塘環(huán)境變化，避免發(fā)生自然排卵。本試驗(yàn)中，長(zhǎng)牡蠣親貝在北部灣地區(qū)室外促熟池中暫養(yǎng)約4周，催產(chǎn)前2周移至室內(nèi)暫養(yǎng)和促熟，其間循環(huán)以自然海水并輔扁藻(Platymonashelgolandica)、小球藻(Chlorellavulgaris)和金藻(Isochrysisgalbana)等人工餌料，室內(nèi)人工育苗于2018年4月下旬進(jìn)行。

健康無(wú)損傷的150～200枚長(zhǎng)牡蠣親本被用于萊州灣長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗試驗(yàn)中，于2018年2—3月運(yùn)輸至煙臺(tái)萊州市貝類苗種繁育基地，親貝置于扇貝籠中吊養(yǎng)在室內(nèi)進(jìn)行促熟，室內(nèi)水溫由自然水溫緩慢升高，穩(wěn)定在22.0～24.5 ℃，鹽度28～30，pH 8.01～8.13。長(zhǎng)牡蠣促熟期間，每日早晚測(cè)量水溫、鹽度、pH，取樣觀察牡蠣性腺發(fā)育，留意暫養(yǎng)水池環(huán)境變化避免配子自然排放。在長(zhǎng)牡蠣萊州灣育苗的試驗(yàn)中，長(zhǎng)牡蠣親貝在室內(nèi)暫養(yǎng)6～8周，其間循環(huán)以砂濾海水，投喂螺旋藻粉、小球藻藻膏、海洋紅酵母、牟氏角毛藻(Chaetocerosmuelleri)、小新月菱形藻(Cylindrothecaclosterium)等人工餌料進(jìn)行促熟，于2018年5月中旬開(kāi)展長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗。

為確保長(zhǎng)牡蠣配子發(fā)育的同步性，利用環(huán)境誘導(dǎo)刺激牡蠣配子自然排放，收集精卵進(jìn)行人工授精和育苗。

1.2.2 人工受精與孵化

雌、雄配子采集時(shí)，收集精子活力強(qiáng)的雄性個(gè)體(n≥15)和卵子成熟度高的雌性個(gè)體(n≥15)，以確保遺傳多樣性。試驗(yàn)親本隨機(jī)分為3組，將陰干后待產(chǎn)的親貝置于曝氣的海水中，用手電照射進(jìn)行觀察，在牡蠣產(chǎn)卵或排精后將其挑出，用淡水清洗后置于單獨(dú)的精卵收集桶中，使其繼續(xù)產(chǎn)卵或排精，取樣鏡檢判斷雌雄，此后分別收集精子和卵子進(jìn)行人工授精。將精子和卵子充分混勻，顯微鏡鏡檢精子與卵子比以(10～20)∶1為宜。精卵混合15～30 min后對(duì)受精卵進(jìn)行清洗，收集于30 μm篩絹內(nèi)，移至1 m3孵化桶內(nèi)微充氣，孵化密度為25～50個(gè)/mL。

1.2.3 幼蟲(chóng)培育

受精卵孵化18～22 h發(fā)育至D形幼蟲(chóng)，使用60 μm篩絹進(jìn)行選優(yōu)。試驗(yàn)使用1000 L水槽培育幼蟲(chóng)和稚貝，幼蟲(chóng)培育密度為5～10個(gè)/mL。以金藻為開(kāi)口餌料，日投喂量1500～2000 個(gè)/mL，投餌量及比例依據(jù)幼蟲(chóng)和稚貝的攝食情況進(jìn)行適當(dāng)增減；幼蟲(chóng)培育期間，日投餌4次，幼蟲(chóng)發(fā)育前期以金藻和小球藻為主，幼蟲(chóng)發(fā)育中后期主要投喂扁藻。每2 d換水1次，日均換水量達(dá)育苗水體的1/2。幼苗培育過(guò)程中各試驗(yàn)組篩絹網(wǎng)單獨(dú)使用，以免造成不同組幼蟲(chóng)混雜。每日投餌時(shí)注意觀察各試驗(yàn)組幼蟲(chóng)活力，若有下沉或異常死亡及時(shí)進(jìn)行處理，并適當(dāng)調(diào)整密度。

萊州灣地區(qū)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)利用升溫海水培育，水溫約23 ℃，幼蟲(chóng)眼點(diǎn)發(fā)生在20日齡前后，而北部灣地區(qū)長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)培育依賴自然環(huán)境水溫，水溫為21～27 ℃，眼點(diǎn)發(fā)生時(shí)間較萊州灣地區(qū)稍晚。眼點(diǎn)幼蟲(chóng)平均殼高均在320 μm以上，幼蟲(chóng)眼點(diǎn)率為30%～50%時(shí)，投入香港巨牡蠣(Crassostreahongkongensis)殼串作為附著基，附著期持續(xù)3～5 d，其間需加大換水量，日全量換水1～2次。幼苗附著變態(tài)后，根據(jù)攝食情況適當(dāng)調(diào)整投餌量。

1.2.4 中間培育

幼蟲(chóng)附著期間隨時(shí)取樣觀察，單個(gè)牡蠣殼附著稚貝數(shù)控制在15～30個(gè)，將完成附苗的附著基轉(zhuǎn)移至室內(nèi)保苗池中過(guò)渡約1周，其間循環(huán)自然海水，保證餌料充足。隨后將幼苗移至室外保苗池塘進(jìn)行為期60 d的中間培育。本試驗(yàn)中，長(zhǎng)牡蠣苗種池塘中間培育時(shí)間為2018年6—9月，其間分別統(tǒng)計(jì)60日齡和90日齡北部灣苗種和萊州灣苗種的殼高和存活情況。

1.2.5 牡蠣養(yǎng)成

2018年9月下旬以60個(gè)×3串為1組，分別從室外中培池塘中取出經(jīng)過(guò)中間培育的90日齡長(zhǎng)牡蠣北部灣苗種和萊州灣苗種各2組，進(jìn)行轉(zhuǎn)移養(yǎng)成。北部灣苗種和萊州灣苗種分別平行投放到廣西壯族自治區(qū)北海市北部灣海域(N 21°43′98″，E 109°38′34″)和山東省乳山市黃海海域(N 36°70′15″，E 121°33′61″)兩個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行養(yǎng)成。

為確保北部灣海域和黃海海域長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)殖效果有可比性，兩個(gè)養(yǎng)殖基地均采用浮筏養(yǎng)殖進(jìn)行牡蠣養(yǎng)成，固定懸掛水層在1～3 m，養(yǎng)殖期間定期采集數(shù)據(jù)。

1.3 數(shù)據(jù)采集

試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)包括卵徑、受精率、孵化率、殼高、變態(tài)率、存活率、新增死亡率和濕質(zhì)量等指標(biāo)。

1.4 指標(biāo)測(cè)定與計(jì)算

變態(tài)率是指單位體積內(nèi)已變態(tài)完成的存活個(gè)體數(shù)與總數(shù)的百分比，以完成附著和出現(xiàn)次生殼為牡蠣幼蟲(chóng)變態(tài)的標(biāo)志；存活率是指單個(gè)牡蠣殼上存活的牡蠣數(shù)與初始稚貝數(shù)的百分比。

軟體部質(zhì)量分?jǐn)?shù)(wS, %)[17]和特定生長(zhǎng)率(RSG, %/d)[18]計(jì)算公式如下：

(1)

(2)

式中，mS為長(zhǎng)牡蠣軟體部濕質(zhì)量(g)，m為長(zhǎng)牡蠣濕質(zhì)量(g)，LH1和LH0分別為終末統(tǒng)計(jì)殼高和初始?xì)じ?mm)，t1和t0分別為終末統(tǒng)計(jì)日齡和初始統(tǒng)計(jì)日齡(d)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

使用Shapiro-Wilk檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)正態(tài)性檢驗(yàn)，經(jīng)檢驗(yàn)試驗(yàn)數(shù)據(jù)符合正態(tài)性分布；使用Bartlett檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)方差齊性檢驗(yàn)，在數(shù)據(jù)不滿足上述方差齊性要求時(shí)，將原始數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為取以10為底的對(duì)數(shù)值或轉(zhuǎn)化反正弦函數(shù)值校正后進(jìn)行分析；使用Photoshop CC 2015 軟件、Microsoft Excel 2016軟件、R-Asreml 4.0.3 (Windows 64位版)(R包：agricolae 1.3.0-2、car 3.0-8等)進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)統(tǒng)檢、方差分析、繪圖等，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗比較

長(zhǎng)牡蠣北部灣和萊州灣室內(nèi)人工育苗的關(guān)鍵指標(biāo)統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1。長(zhǎng)牡蠣在萊州灣地區(qū)室內(nèi)促熟得到的成熟卵細(xì)胞卵徑為(51.79±0.61) μm，其規(guī)格略小于北部灣地區(qū)室外池塘自然促熟的長(zhǎng)牡蠣所形成的卵細(xì)胞(52.41±0.61) μm，但差異不顯著(P>0.05)；長(zhǎng)牡蠣北部灣地區(qū)池塘自然促熟和萊州灣室內(nèi)促熟收集的成熟精子和卵細(xì)胞，受精率均超過(guò)94%，孵化率均約90%，差異不顯著(P>0.05)；在變態(tài)率方面，長(zhǎng)牡蠣萊州灣室內(nèi)人工育苗培育的幼蟲(chóng)變態(tài)率顯著高于北部灣(P<0.05)，二者變態(tài)率分別為(18.95±2.36)%和(11.65±2.45)%；此外，北部灣長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)的眼點(diǎn)發(fā)生時(shí)間要晚于萊州灣。

表1 長(zhǎng)牡蠣人工育苗卵徑、受精率、孵化率和變態(tài)率的比較

長(zhǎng)牡蠣北部灣和萊州灣室內(nèi)人工育苗幼蟲(chóng)和稚貝生長(zhǎng)和存活情況見(jiàn)圖1。5～15日齡，北部灣地區(qū)人工繁育的長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)和稚貝的生長(zhǎng)速度略慢于萊州灣地區(qū)。10日齡時(shí)，兩地浮游期幼蟲(chóng)殼高差異顯著(P<0.05)，存活率均超過(guò)90%；10～15日齡長(zhǎng)牡蠣幼蟲(chóng)存活率下降明顯，15日齡時(shí)，萊州灣地區(qū)長(zhǎng)牡蠣室內(nèi)人工育苗幼蟲(chóng)存活率顯著高于北部灣地區(qū)；中培期30～90日齡，兩地長(zhǎng)牡蠣稚貝殼高生長(zhǎng)趨勢(shì)一致，90日齡時(shí)殼高差異顯著(P<0.05)；60日齡和90日齡時(shí)，長(zhǎng)牡蠣稚貝在北部灣和萊州灣中間培育過(guò)程中的存活率差異顯著(P<0.05)。

圖1 長(zhǎng)牡蠣北部灣和萊州灣室內(nèi)人工育苗的比較Fig.1 Comparison of Pacific oyster C. gigas artificial breeding in the two sitesa.長(zhǎng)牡蠣浮游期幼蟲(chóng)殼高； b.長(zhǎng)牡蠣浮游期幼蟲(chóng)存活率； c.長(zhǎng)牡蠣中培期稚貝殼高； d.長(zhǎng)牡蠣中培期稚貝存活率.a.shell height of C. gigas larvae in pelagic-stage; b.survival rate of C. gigas larvae in pelagic-stage; c.shell height of juvenile C. gigas; d.survival rate of juvenile C. gigas.

2.2 長(zhǎng)牡蠣的人工養(yǎng)成比較

北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)和黃海養(yǎng)殖場(chǎng)長(zhǎng)牡蠣人工養(yǎng)成殼高生長(zhǎng)情況見(jiàn)圖2a。同一苗種在兩個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的人工養(yǎng)成效果差異顯著(P<0.05)；120日齡時(shí)，養(yǎng)殖于北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)的北部灣苗種殼高為(27.7±0.49) mm，顯著大于其他試驗(yàn)組(P<0.05)，而養(yǎng)殖于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的北部灣苗種殼長(zhǎng)最小，僅為(23.23±1.85) mm；300日齡前，養(yǎng)殖于北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)的北部灣苗種和萊州灣苗種，殼高均高于養(yǎng)殖于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的兩個(gè)長(zhǎng)牡蠣苗種；390日齡后，黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的北部灣苗種和萊州灣苗種殼高差異不顯著(P>0.05)，其中長(zhǎng)牡蠣北部灣苗種殼高略大于萊州灣苗種；北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)的長(zhǎng)牡蠣在300日齡后大量死亡，而存活的個(gè)體小型化嚴(yán)重，導(dǎo)致390日齡時(shí)長(zhǎng)牡蠣殼高數(shù)據(jù)發(fā)生異常下降；北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)長(zhǎng)牡蠣大面積死亡，導(dǎo)致養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)未采收到足量樣品進(jìn)行測(cè)量。

北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)和黃海養(yǎng)殖場(chǎng)長(zhǎng)牡蠣人工養(yǎng)成存活率結(jié)果見(jiàn)圖2b。不同養(yǎng)成階段，養(yǎng)殖于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的萊州灣苗種存活率高于另外3組，且顯著高于養(yǎng)殖于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的北部灣苗種(P<0.05)；牡蠣養(yǎng)殖300日齡后，北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的2組長(zhǎng)牡蠣存活率下降明顯；長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)成至570日齡，北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的2組長(zhǎng)牡蠣死亡率高達(dá)100%，而黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的萊州灣苗種和北部灣苗種存活率分別為(17.12±0.60)%和(9.52±0.58)%，二者差異顯著(P<0.05)。

圖2 長(zhǎng)牡蠣北部灣海域和黃海海域的養(yǎng)成比較Fig.2 Pacific oyster C. gigas farming in Beibu Gulf and Yellow Seaa.養(yǎng)成期長(zhǎng)牡蠣殼高的生長(zhǎng)比較； b.養(yǎng)成期長(zhǎng)牡蠣存活的比較.a.comparison of C. gigas shell height in farming; b.comparison of C. gigas survival in farming.

黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)成長(zhǎng)牡蠣的基礎(chǔ)生物學(xué)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)成的北部灣苗種和萊州灣苗種在殼高、殼長(zhǎng)、殼寬、濕質(zhì)量和軟體部質(zhì)量分?jǐn)?shù)方面均差異不顯著(P>0.05)。北部灣苗種養(yǎng)成后的殼高、殼長(zhǎng)和濕質(zhì)量指標(biāo)均大于養(yǎng)成后的萊州灣苗種，而殼寬和軟體部質(zhì)量分?jǐn)?shù)則較小。

表2 2018年10月至2019年12月黃海海域人工養(yǎng)成長(zhǎng)牡蠣的基礎(chǔ)生物學(xué)數(shù)據(jù)(n=90; x±SD)

2.3 長(zhǎng)牡蠣生長(zhǎng)存活與養(yǎng)殖環(huán)境溫度的關(guān)系

不同養(yǎng)殖模式下，長(zhǎng)牡蠣殼高的特定生長(zhǎng)率及存活變化情況見(jiàn)圖3a。在第一個(gè)養(yǎng)殖階段(120～210日齡)，4個(gè)養(yǎng)殖組，長(zhǎng)牡蠣殼高的特定生長(zhǎng)率差異不顯著(P>0.05)，均高于0.20%/d；210～300日齡期間，黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的北部灣苗種殼高的特定生長(zhǎng)率最低，僅為(0.11±0.03)%/d，顯著低于其他3組；300日齡后，北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的長(zhǎng)牡蠣大量死亡導(dǎo)致其特定生長(zhǎng)率為負(fù)(圖3a中未體現(xiàn))；300～390日齡，黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的北部灣苗種和萊州灣苗種均得到各自養(yǎng)殖期的最大特定生長(zhǎng)率[(0.32±0.04)%/d和(0.24±0.02)%/d]，二者差異顯著(P<0.05)；在養(yǎng)殖390～480日齡和480～570日齡2個(gè)統(tǒng)計(jì)周期內(nèi)，黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的北部灣苗種和萊州灣苗種殼高特定生長(zhǎng)率呈連續(xù)下降趨勢(shì)，但二者差異不顯著(P>0.05)。

不同養(yǎng)殖階段長(zhǎng)牡蠣新增死亡率情況變化見(jiàn)圖3b。在養(yǎng)殖120～210日齡階段，萊州灣苗種在黃海養(yǎng)殖場(chǎng)和北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)成的新增死亡率較高，分別為(7.65±1.29)%和(7.88±3.47)%，而北部灣苗種在黃海養(yǎng)殖場(chǎng)和北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)成的新增死亡率均低于5.00%，分別為(3.30±0.77)%和(4.71±1.48)%；就整個(gè)養(yǎng)成期來(lái)看，養(yǎng)殖于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的北部灣苗種和萊州灣苗種在120～210日齡區(qū)間內(nèi)的新增死亡率均為最高水平；210～300日齡，在北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行人工養(yǎng)成的北部灣苗種和萊州灣苗種的新增死亡率均顯著高于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的兩個(gè)牡蠣苗種，隨后二者新增死亡率持續(xù)升高，至480日齡前全部死亡；此外，黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的萊州灣苗種在390～480日齡和480～570日齡兩個(gè)周期內(nèi)的新增死亡率均顯著高于同一養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的北部灣苗種(P<0.05)。

長(zhǎng)牡蠣黃海養(yǎng)殖場(chǎng)和北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)相關(guān)海域海面溫度統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。整個(gè)養(yǎng)殖期內(nèi)，黃海養(yǎng)殖場(chǎng)氣溫最高的3個(gè)月分別為2019年7月、8月和9月，對(duì)應(yīng)長(zhǎng)牡蠣人工養(yǎng)殖的統(tǒng)計(jì)周期390～480日齡，而氣溫最低的月份為2019年1月、2月和3月，對(duì)應(yīng)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)周期210～300日齡。北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)海域，海水表面溫度終年處于較高水平，養(yǎng)成期內(nèi)最低溫度出現(xiàn)在2019年1月，為(18.29±1.24) ℃，相對(duì)高溫期橫跨兩個(gè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)周期300～390日齡和390～480日齡。

圖3 長(zhǎng)牡蠣不同養(yǎng)成階段的養(yǎng)殖效果比較Fig.3 Comparison of different farming strategies of Pacific oyster C. gigasa.養(yǎng)成期殼高特定生長(zhǎng)率的比較； b.養(yǎng)成期新增死亡率的比較.a.comparison of the SGR of C. gigas shell height; b.comparison of the Δmortality of C. gigas.

表3 長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)成研究海域平均海面溫度數(shù)據(jù)

3 討 論

3.1 長(zhǎng)牡蠣南北方人工育苗的比較分析

長(zhǎng)牡蠣的繁殖季節(jié)因海域環(huán)境的差異而不同，通常認(rèn)為水溫和餌料是造成這一現(xiàn)象的主要決定因素。筆者2018年3月從我國(guó)北方采集長(zhǎng)牡蠣作為親本，運(yùn)至北部灣海域進(jìn)行暫養(yǎng)和促熟，隨后開(kāi)展長(zhǎng)牡蠣的人工育苗工作。利用北部灣海域優(yōu)越的溫度條件，開(kāi)展長(zhǎng)牡蠣的室內(nèi)人工育苗并取得了較好的育苗效果，在幼蟲(chóng)培育階段，除幼蟲(chóng)變態(tài)率較北方育苗明顯偏低外，其他各項(xiàng)指標(biāo)均處于較高水平且與北方無(wú)顯著差異。實(shí)際生產(chǎn)中，為了保證苗種在養(yǎng)成海區(qū)養(yǎng)殖初期的存活率，長(zhǎng)牡蠣苗種轉(zhuǎn)運(yùn)至養(yǎng)殖海域前通常需要進(jìn)行中間培養(yǎng)，即在一個(gè)較大的可控水體中進(jìn)行養(yǎng)殖過(guò)渡。本試驗(yàn)中，將中間培育期的長(zhǎng)牡蠣稚貝分別投放至相應(yīng)海區(qū)的室外暫養(yǎng)池塘進(jìn)行過(guò)渡，暫養(yǎng)45～60 d，暫養(yǎng)期間北部灣海域苗種死亡率為61.95%，萊州灣海域苗種死亡率為52.43%。綜合實(shí)際情況來(lái)看，本試驗(yàn)中，長(zhǎng)牡蠣苗種中培期稚貝死亡率均較高，這可能與稚貝附著密度較大以及夏季半封閉池塘內(nèi)敵害生物過(guò)多有關(guān)。此外，中培期7月至9月南北方均處于高溫期可能是造成高死亡率的另一個(gè)誘因，而同時(shí)期南方平均水溫遠(yuǎn)高于北方，從而導(dǎo)致南北方死亡率差別較大。

近年來(lái)，長(zhǎng)牡蠣成為我國(guó)北方比較難育的貝類苗種之一，嚴(yán)重影響育苗單位的生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)效益[19]。我國(guó)北方沿海長(zhǎng)牡蠣育苗工作一般從2月開(kāi)始，持續(xù)到次年5月末，其間由于水溫條件過(guò)低，往往需要利用升溫海水進(jìn)行育苗，這導(dǎo)致北方長(zhǎng)牡蠣育苗的投入成本極高，有研究顯示北方長(zhǎng)牡蠣育苗升溫費(fèi)用在0.3萬(wàn)元/t[20]，實(shí)際上，同一時(shí)間我國(guó)北部灣海域水溫條件十分適宜長(zhǎng)牡蠣的自然促熟和育苗。本試驗(yàn)中，北部灣育苗場(chǎng)和萊州灣育苗場(chǎng)育苗水體均為100 m3，在試驗(yàn)成本方面，兩個(gè)育苗場(chǎng)之間的成本差異主要集中在海水升溫方面，包括育苗水體和餌料培養(yǎng)水體(1∶1)，按照過(guò)往經(jīng)驗(yàn)每噸海水升溫按0.3萬(wàn)元計(jì)算，一個(gè)育苗周期的升溫成本約為0.9萬(wàn)元，因此，開(kāi)展南方海域的長(zhǎng)牡蠣人工育苗可能是有效降低長(zhǎng)牡蠣育苗成本、提高育苗效率的重要方法。

3.2 南北方環(huán)境差異對(duì)不同苗種生長(zhǎng)的影響

長(zhǎng)牡蠣屬于廣溫廣鹽性貝類，其生長(zhǎng)速度與環(huán)境條件適宜性相關(guān)，在我國(guó)北方，養(yǎng)成期通常為12～24個(gè)月，實(shí)際養(yǎng)成時(shí)間取決于苗種大小、養(yǎng)殖周期、養(yǎng)殖海域的溫度條件和餌料豐度等因素[21]。本試驗(yàn)中，將北部灣苗種和萊州灣苗種各分兩組，分別在北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)和黃海養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行養(yǎng)殖，人工養(yǎng)殖周期為2018年10月—2019年12月。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在北部灣和萊州灣兩地繁育的長(zhǎng)牡蠣苗種在黃海養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖效果無(wú)顯著差異，而在北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的長(zhǎng)牡蠣度夏發(fā)生了大面積死亡現(xiàn)象，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)未收獲健康存活的個(gè)體，該結(jié)果與此前相關(guān)學(xué)者對(duì)長(zhǎng)牡蠣南方引種研究的結(jié)果一致[6]。綜上，北部灣苗種在黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的養(yǎng)殖效果良好，但與萊州灣苗種一樣在養(yǎng)成期無(wú)法適應(yīng)南方海域夏季的高溫期。此外值得關(guān)注的是，雖然北部養(yǎng)殖場(chǎng)未收獲商品牡蠣，但相較于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的長(zhǎng)牡蠣，300日齡北部養(yǎng)殖場(chǎng)長(zhǎng)牡蠣的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)明顯，且特定生長(zhǎng)率分析結(jié)果顯示，養(yǎng)殖于北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)的120～210日齡和210～300日齡長(zhǎng)牡蠣殼高的特定生長(zhǎng)率均高于養(yǎng)殖于黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的萊州灣苗種，同樣支持以上結(jié)論。由此可見(jiàn)，可以通過(guò)養(yǎng)殖過(guò)程中適時(shí)地“移養(yǎng)”來(lái)延續(xù)長(zhǎng)牡蠣的優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)期，從而達(dá)到縮短養(yǎng)殖時(shí)間、提高養(yǎng)殖效率的目的。實(shí)際上，在水產(chǎn)養(yǎng)殖活動(dòng)中，相關(guān)從業(yè)者針對(duì)多種養(yǎng)殖對(duì)象開(kāi)展了跨海區(qū)的苗種培育，如仿刺參(Apostichopusjaponicus)[22]、半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)[23]、褐牙鲆(Paralichthysolivaceus)[24]、皺紋盤(pán)鮑(Haliotisdiscushannai)[25]等；而“南苗北養(yǎng)”模式成功應(yīng)用于菲律賓蛤仔(Ruditapesphilippinarum)的育苗和養(yǎng)殖，苗種繁育階段一般在福建完成，隨后運(yùn)輸?shù)竭|寧和山東等地進(jìn)行養(yǎng)殖[26]。對(duì)于長(zhǎng)牡蠣而言“南苗北養(yǎng)”仍需要更多的實(shí)踐和研究進(jìn)行論證。本試驗(yàn)中，黃海養(yǎng)殖場(chǎng)0～1齡間的3個(gè)生長(zhǎng)周期萊州灣苗種殼高的特定生長(zhǎng)率明顯要高于1～2齡，而北部灣苗種殼高在0～1齡間的特定生長(zhǎng)率隨溫度的周期變化呈現(xiàn)明顯的波動(dòng)，但整體看0～1齡的生長(zhǎng)趨勢(shì)顯著優(yōu)于1～2齡，這表明在環(huán)境條件一致時(shí)長(zhǎng)牡蠣0～1齡期間的生長(zhǎng)速度比1～2齡快。而這可能與遺傳或激素水平有關(guān)，此外，相對(duì)更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被用于生長(zhǎng)而非繁殖可能也是導(dǎo)致0～1齡長(zhǎng)牡蠣較1～2齡生長(zhǎng)更快的因素。新增死亡率結(jié)果表明，試驗(yàn)周期內(nèi)北部灣海域2019年4月開(kāi)始持續(xù)高溫，而長(zhǎng)牡蠣大規(guī)模死亡也發(fā)生在該階段，這說(shuō)明溫度可能是造成長(zhǎng)牡蠣大規(guī)模死亡的重要誘因，這一結(jié)論與此前的研究一致[27-29]。為了確保比較研究的準(zhǔn)確性，筆者進(jìn)行固定水層養(yǎng)殖，未涉及具體應(yīng)對(duì)南方高溫環(huán)境的方法，而有研究表明在高溫期下放養(yǎng)殖水層可能提高牡蠣存活率[13, 30]，至于是否適應(yīng)于南方長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)殖，尚待更多試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

綜上所述，筆者建議利用南方海域水溫回升早、平均水溫較高的特點(diǎn)，從每年2月開(kāi)始有計(jì)劃地部署南方海域長(zhǎng)牡蠣的育苗生產(chǎn)，借鑒菲律賓蛤仔的“南苗北養(yǎng)”模式進(jìn)行長(zhǎng)牡蠣苗種產(chǎn)業(yè)規(guī)劃，再將南方苗種轉(zhuǎn)移到北方地區(qū)進(jìn)行養(yǎng)殖，有助于降低長(zhǎng)牡蠣苗種生產(chǎn)成本，提高長(zhǎng)牡蠣養(yǎng)成效益。

4 結(jié) 論

相同規(guī)格的長(zhǎng)牡蠣親貝在萊州灣和北部灣兩地開(kāi)展人工育苗時(shí)雌、雄配子受精率分別為(95.62±2.09)%和(94.07±0.65)%，幼蟲(chóng)孵化率分別為(88.83±1.40)%和(91.69±2.49)%，變態(tài)率分別為(18.95±2.36)%和(11.65±2.45)%；中間培育過(guò)程中，長(zhǎng)牡蠣稚貝在北部灣的生長(zhǎng)速度顯著快于在萊州灣的生長(zhǎng)速度，但長(zhǎng)牡蠣稚貝在萊州灣的死亡率顯著低于在北部灣的死亡率；長(zhǎng)牡蠣的養(yǎng)成比較試驗(yàn)顯示，北部灣苗種和萊州灣苗種在北部灣養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行海上養(yǎng)成均有極高的死亡率，而在黃海養(yǎng)殖場(chǎng)的養(yǎng)成效果差異不顯著。以上結(jié)果表明，長(zhǎng)牡蠣的“南苗北養(yǎng)”模式有一定可行性，為南北方牡蠣產(chǎn)業(yè)鏈的交叉互補(bǔ)提供了可能。