邵麗瑋， 郭建軍， 馮 曼， 王亞男， 符 樂，張洪偉， 范京惠， 安永福， 王曉芳*

（1.河北省畜牧獸醫(yī)研究所，河北 保定 071000；2.承德市農(nóng)林科學(xué)院，河北 承德 067000；3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 071001）

奶牛酮病是泌乳奶牛常見的群發(fā)性疾病之一，也是圍產(chǎn)期奶牛多發(fā)的一種營養(yǎng)代謝性疾病，以奶牛血清、尿液以及牛奶中酮體（β-羥丁酸、乙酰乙酸、丙酮）升高為主要特征，沒有明顯的季節(jié)性限制，產(chǎn)前21 d~產(chǎn)后21 d極易發(fā)生（湯兆學(xué)，2018），多發(fā)于高產(chǎn)奶牛，且近年來有逐漸上升的趨勢（葉青華，2016）。另外，酮病的發(fā)生還會引起產(chǎn)后真胃變位、子宮炎、產(chǎn)奶量下降和繁殖效率下降等潛在問題，Markusfeld等（1987）研究表明，圍產(chǎn)期奶牛所有疾病中，酮病是影響圍產(chǎn)期奶牛的經(jīng)濟(jì)效益最主要的疾病。

隨著國家減抗限抗行動的啟動，藥物飼料添加劑尤其是抗菌藥物飼料添加劑退出飼料行業(yè)，減少抗生素使用已成為行業(yè)的共識，尋找可替代抗生素飼料添加劑產(chǎn)品及應(yīng)用方案，構(gòu)建差異化競爭成為企業(yè)和科研人員的不二選擇；中草藥、微生態(tài)等相關(guān)的生物發(fā)酵制品無殘留，尤其在替代藥物飼料添加劑方面的天然性，成為減抗、替抗飼料添加劑的主力產(chǎn)品之一。因此，在上述背景下，開發(fā)出一種發(fā)酵中草藥飼料添加劑并應(yīng)用在奶牛產(chǎn)后酮病防控上顯得格外有意義。本試驗(yàn)在基礎(chǔ)日糧中添加中草藥飼料添加劑，研究其對奶牛產(chǎn)后酮病、生產(chǎn)性能和繁殖性能的影響，初步確定飼喂效果和適宜添加量，以期為后續(xù)試驗(yàn)研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 發(fā)酵中草藥飼料添加劑：課題組自制而成，主要成分為黃芪、黨參、炒白術(shù)、茯苓、當(dāng)歸、焦山楂、大黃等17味中草藥，所有組分研磨后充分混合，得到中草藥組合物備用；用5%質(zhì)量比的玉米粉做基料，然后用乳酸菌、釀酒酵母等特選微生物厭氧發(fā)酵7 d。試驗(yàn)牛：新產(chǎn)牛，寧晉中百牧業(yè)有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，依據(jù)胎次（2～3胎）、體況評分（2.8～3.2）、上一泌乳周期總產(chǎn)奶量相近（12 t）的原則，選20頭新產(chǎn)牛隨機(jī)分為4組，每組5頭牛。I組為對照組，II組、Ⅲ組、IV組為試驗(yàn)組。對照組飼喂常規(guī)日糧，試驗(yàn)組于產(chǎn)后4~30天在飼喂常規(guī)日糧基礎(chǔ)上每天每頭牛按低、中、高三個添加水平（80、100、120 g）添加發(fā)酵中草藥飼料添加劑，每頭牛早上飼喂的時(shí)候人工飼喂添加劑，保證每頭牛每天按規(guī)定添加量完全飼喂。每頭牛試驗(yàn)期27 d，每9 d為一個采樣周期。飼養(yǎng)管理按牛場原有程序常規(guī)進(jìn)行。

1.3 檢測指標(biāo)及方法

1.3.1 產(chǎn)奶量 每天記錄每頭牛的產(chǎn)奶量，然后計(jì)算第4~12、13~21、22~30天及第4~30天的日均產(chǎn)奶量。

1.3.2 乳品質(zhì) 于產(chǎn)后第4、17、30天采集早、晚兩次的乳樣，按1：1混合后，放入含有防腐劑的奶樣收集瓶中，快遞送到石家莊DHI檢測中心檢測。其中包括乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、干物質(zhì)、乳尿素氮含量和乳體細(xì)胞數(shù)等。

1.3.3 血液生化指標(biāo) 于產(chǎn)后第4、17、30天的晨飼前分別對20頭試驗(yàn)牛尾跟靜脈采集血液10 mL，立即3500 r/min離心5 min后分離血清，隨后將其帶回實(shí)驗(yàn)室置于-20℃冰箱中，貯存待檢血清葡萄糖（Glu）、β-羥丁酸（BHBA）、游離脂肪酸（NEFA）含量（酶免法，華衛(wèi)德朗DR-200BS酶標(biāo)分析儀，無錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司）。

1.3.4 產(chǎn)后疾病發(fā)生和繁殖性能 統(tǒng)計(jì)產(chǎn)后各組酮病臨床發(fā)病率和死淘率、產(chǎn)后初次配種天數(shù)、妊娠配種次數(shù)、首次發(fā)情配種率。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析 先用Excel 2007初步整理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，再用SPSS 17.0軟件比較均值（單因素分析）進(jìn)行方差分析，并進(jìn)行Duncan氏SSR法多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵中草藥飼料添加劑對產(chǎn)奶量的影響從表1數(shù)據(jù)得知，整個試驗(yàn)期四個組產(chǎn)奶量差異均不顯著（P>0.05）。隨著時(shí)間推移產(chǎn)奶量除對照組呈先升高后降低趨勢外，其他各組均呈逐漸增高趨勢。II組平均產(chǎn)奶量最高，比I組平均高0.63 kg/（頭·d），Ⅲ組和IV組產(chǎn)奶量卻比I組分別低1.95 kg/（頭·d）和1.81 kg/（頭·d）。但Ⅲ組提高的趨勢最大，Ⅲ組第22~30天日均產(chǎn)奶量比第4~12天高9.02 kg，I組提高5.96 kg，Ⅲ組比I組提高51.34%。

表1 不同水平發(fā)酵中草藥飼料添加劑對產(chǎn)奶量的影響 kg/（頭·d）

2.2 發(fā)酵中草藥飼料添加劑對乳品質(zhì)的影響從表2數(shù)據(jù)得知，不同階段各組乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、干物質(zhì)含量均沒有顯著差異（P>0.05），隨著產(chǎn)后天數(shù)的增加，乳脂率、乳蛋白率、干物質(zhì)含量各組均呈降低的趨勢。但Ⅲ組與對照組相比均減緩了乳脂率、乳蛋白率的降低趨勢，Ⅳ組干物質(zhì)降低的幅度最小。I組和II組乳糖先增加后降低，Ⅲ、Ⅳ組呈逐漸增加趨勢。I、II組體細(xì)胞數(shù)呈先降低后增加趨勢，Ⅲ組逐漸降低，IV組先增加后降低；在第4天，Ⅲ組和Ⅳ組顯著低于I組和II組（P<0.05）；Ⅲ組在第17天顯著低于IV組（P<0.05），但與I、II組差異不顯著（P>0.05），在第30天顯著低于其他組（P<0.05），比I組降低56.60%。尿素氮各組不同時(shí)間點(diǎn)波動幅度不大，II、IV組呈降低趨勢，Ⅲ組整個階段最低。

表2 不同水平發(fā)酵中草藥飼料添加劑對乳品質(zhì)的影響

2.3 發(fā)酵中草藥飼料添加劑對血清酮病主要相關(guān)指標(biāo)的影響 由表3得知，各組血清葡萄糖、β-羥丁酸、游離脂肪酸水平隨著時(shí)間的推移基本上均呈逐漸增加的趨勢，葡萄糖各時(shí)間點(diǎn)各組差異均不顯著（P>0.05），但Ⅲ組升高趨勢高于其他組。β-羥丁酸到第30天Ⅱ組和Ⅲ組顯著低于Ⅰ組（P<0.05），均降低20.65%，與Ⅳ組差異不顯著（P>0.05）；游離脂肪酸不同時(shí)間點(diǎn)各組水平差異均不顯著，各組增加水平差異也不顯著（P>0.05）。

表3 不同水平發(fā)酵中草藥飼料添加劑對血清酮病主要相關(guān)指標(biāo)的影響 mmol/L

2.4 發(fā)酵中草藥飼料添加劑對產(chǎn)后疾病及繁殖性能的影響 從本試驗(yàn)開始到這20頭牛全部配種或者淘汰（產(chǎn)后122 d），在產(chǎn)后第3天用試紙條快速檢測各奶牛血酮含量時(shí)發(fā)現(xiàn)，Ⅰ組有一頭奶牛血清酮體含量為1.9 mmol/L，Ⅱ組有一頭奶牛血清酮體含量為5.1 mmol/L，發(fā)病率各為20%，給這2頭酮病奶牛灌服3 d丙二醇后復(fù)檢血清酮體含量均小于1.0 mmol/L，處于健康水平；其他所有試驗(yàn)?zāi)膛：烤∮?.0 mmol/L，Ⅲ組、Ⅳ組酮病發(fā)病率均為0。另從表4可以看出，Ⅰ～Ⅳ組的平均產(chǎn)后首次配種時(shí)間分別為74.25、72、71.4 d和80.25 d，妊娠配種次數(shù)分別為1.75、1.8、1.6次和2.25次，首次情期受胎率為25%、40%、40%、0%。Ⅰ組因乳房炎和Ⅳ組因肢蹄病各淘汰1只牛，其他組沒有淘汰牛只。

表4 不同水平發(fā)酵中草藥飼料添加劑對產(chǎn)后疾病發(fā)生和繁殖性能的影響

3 討論

3.1 發(fā)酵中草藥飼料添加劑對產(chǎn)奶量和乳成分的影響 產(chǎn)奶量和乳成分是評價(jià)奶牛生產(chǎn)性能高低的重要指標(biāo)。但是高產(chǎn)奶牛在圍產(chǎn)期因能量負(fù)平衡誘發(fā)酮病等一系列常見疾病，從而影響了奶牛的產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)，嚴(yán)重影響了經(jīng)濟(jì)利益。本試驗(yàn)結(jié)果表明，奶牛產(chǎn)后一個月內(nèi)產(chǎn)奶量成逐漸增加趨勢，雖然添加不同水平中草藥飼料添加劑對產(chǎn)奶量影響不顯著，但Ⅲ組產(chǎn)奶量提高水平最大。張善芝（2011）在中草藥添加劑對奶牛生產(chǎn)性能、乳房健康狀況的研究中發(fā)現(xiàn)，添加中草藥能顯著提高產(chǎn)奶量。中草藥中的各種有效成分共同作用達(dá)到健脾益氣和調(diào)節(jié)奶牛各內(nèi)臟系統(tǒng)的陰陽平衡，還含有多種營養(yǎng)成分，有利于緩解奶牛產(chǎn)后的能量負(fù)平衡，從而改善奶牛的生產(chǎn)性能。圍產(chǎn)期奶牛產(chǎn)后奶中各個成分的分析結(jié)果表明，奶牛在產(chǎn)后隨著時(shí)間的推移，乳脂率、乳蛋白、乳糖、總?cè)楣腆w都有一個緩慢的下降趨勢，大約在一個月左右達(dá)到一個相對穩(wěn)定的水平，同時(shí)中草藥中含有許多有效的營養(yǎng)成分，能夠使奶牛初乳中的乳脂、乳蛋白、乳糖、總?cè)楣腆w含量都有不同程度的提高（張銀，2013）。本試驗(yàn)中除乳糖率變化與其不一致外，奶牛在產(chǎn)后一個月乳脂率、乳蛋白、干物質(zhì)各組均呈降低的趨勢與其一致。雖然本試驗(yàn)中添加不同水平中草藥后沒有顯著改善乳成分，但與對照組相比也不同程度減緩了降低趨勢，Ⅲ組表現(xiàn)較優(yōu)。

3.2 發(fā)酵中草藥飼料添加劑對血清指標(biāo)的影響奶牛酮病是高產(chǎn)奶牛產(chǎn)后多見的脂肪和碳水化合物代謝紊亂所引起的一種全身功能失調(diào)的代謝性疾?。ê谓。?016），主要的臨床特征為低血糖、高酮血、酮尿、酮乳，產(chǎn)奶量下降，消化功能紊亂等（Bava，2001）。正常情況下，奶牛產(chǎn)后血漿NEFA濃度會因分娩應(yīng)激出現(xiàn)短暫的升髙降低變化。宿孝奇（2015）從產(chǎn)后1~4周酮病高發(fā)時(shí)期動態(tài)監(jiān)測的結(jié)果來看，酮病組自產(chǎn)后1周起NEFA濃度迅速上升到最高，且此后雖有下降但持續(xù)高于健康奶牛組，與Loor等（2007）的研究結(jié)果相一致，說明酮病組奶牛因產(chǎn)后發(fā)生能量代謝負(fù)平衡啟動了體脂動員。研究表明，奶牛產(chǎn)后隨著產(chǎn)奶量的逐漸上升，采食量在28 d才會逐漸改善，這一時(shí)期最容易出現(xiàn)血糖不足能量負(fù)平衡狀態(tài)，因此，及時(shí)的給分娩后泌乳奶牛補(bǔ)充足量的糖和生糖先質(zhì)尤為重要，對奶牛維持正常的生理活動，減緩體內(nèi)脂肪的分解以及保持良好的體況有輔助作用（高陽，2015），同樣對防治奶牛酮病，緩解能量代謝負(fù)平衡更為重要。中草藥中有許多藥物可以促進(jìn)消化、提高食欲，如建曲、麥芽等，而且建曲中含有大量的酵母菌和乳酸桿菌，對提高瘤胃微生物的消化能力非常有益。本試驗(yàn)中，添加不同水平發(fā)酵中草藥飼料添加劑后均有不同程度提高葡萄糖水平的趨勢，特別是到產(chǎn)后第30天，II組、Ⅲ組顯著高于I組，與上述研究結(jié)果一致，可能與本發(fā)酵中草藥飼料添加劑中的中草藥成分焦山楂等及發(fā)酵微生物和基料有關(guān)。另外，本試驗(yàn)產(chǎn)后4~30 d β-羥丁酸、游離脂肪酸濃度逐漸增加。但I(xiàn)I組增加趨勢最小，特別是β-羥丁酸在第30天II組、Ⅲ組顯著低于對照組。說明該中草藥飼料添加劑在改善血糖，降血酮及降低脂肪動員方面有顯著效果，但由于試驗(yàn)場條件限制，無法進(jìn)行單槽飼喂統(tǒng)計(jì)每頭牛每天的采食量，但是根據(jù)現(xiàn)場觀察各組試驗(yàn)牛的采食情況發(fā)現(xiàn)，飼喂該發(fā)酵飼料添加劑可以增加奶牛食欲，這與該中草藥飼料添加劑的成分及功能有關(guān)，此中草藥飼料添加劑就是主要針對奶牛產(chǎn)后氣血兩虧、肝氣不舒（脂肪肝等營養(yǎng)代謝問題）、食欲不振（采食量低，瘤胃功能紊亂）等問題而篩選的配方，其主要功能為補(bǔ)氣養(yǎng)血、斂陰清熱、活血祛瘀、保肝利膽、健脾利濕，對奶牛新產(chǎn)期酮病、營養(yǎng)負(fù)平衡以及生殖系統(tǒng)修復(fù)等問題有很好作用。

3.3 發(fā)酵中草藥飼料添加劑對產(chǎn)后疾病發(fā)生和繁殖性能的影響 研究表明，奶牛酮病和奶牛產(chǎn)后能量負(fù)平衡（NEB）會引起奶牛繁殖性能的下降（Rossi，2008）。據(jù)Goff等（1997）報(bào)道，奶牛繁殖性能下降的重要原因就是NEB的發(fā)生。Beam等（1999）研究發(fā)現(xiàn)，奶牛發(fā)生NEB后，首次黃體活動，首次配種時(shí)間，配種指數(shù)以及產(chǎn)犢間隔都會出現(xiàn)相應(yīng)的增高或延長。奶牛NEB的發(fā)生會導(dǎo)致體脂動員加速，體重下降，懷孕所需能量和營養(yǎng)便會缺乏，子宮復(fù)舊時(shí)間增加，從而影響其生殖功能的恢復(fù)。另有研究表明 （葉承榮，2006；Herdth，2000），奶牛NEB會影響下丘腦維持促黃體素脈沖釋放的功能，而促性腺激素可以直接影響排卵和黃體的發(fā)育，NEB會抑制促性腺激素的分泌，同時(shí)也會影響卵巢對促性腺激素的應(yīng)激敏感性，孕酮水平降低，導(dǎo)致奶牛分挽后發(fā)情期延長。酮病的產(chǎn)生是奶牛發(fā)生NEB的重要標(biāo)志，據(jù)Cook等（2001）報(bào)道，奶牛發(fā)生酮病會導(dǎo)致其從產(chǎn)后至受孕的時(shí)間間隔延長，嚴(yán)重者可能引起奶牛不孕，致使奶牛的淘汰率升高。本試驗(yàn)中從酮病發(fā)生率、繁殖性能及其他疾病或淘汰率上看Ⅲ組較好。Ⅲ組酮病發(fā)病率、產(chǎn)后首次配種時(shí)間、妊娠配種次數(shù)比I組分別降低100%、3.84%、8.57%，首次情期受胎率提比I組高60%。Ⅲ組沒有疾病及淘汰，I組因乳房炎淘汰1頭奶牛。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，在奶牛產(chǎn)后第4～30天添加不同水平發(fā)酵中草藥飼料添加劑后對產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)有影響，但各試驗(yàn)組均有減緩乳品質(zhì)降低趨勢，且Ⅲ組體細(xì)胞數(shù)顯著降低。對酮病主要檢測指標(biāo)β-羥丁酸改善效果顯著，并且可降低酮病發(fā)病率、產(chǎn)后首次配種時(shí)間、妊娠配種次數(shù)，提高首次情期受胎率。綜合考慮，Ⅲ組整體表現(xiàn)較優(yōu)，建議該發(fā)酵中草藥飼料添加劑在新產(chǎn)牛中的用量為100 g/（頭·d）。