吉色曲伍,李英林,李 維,惹及拉呷,沙馬子哈,周可磊,徐文福,杜 寧
(1.四川省涼山州動物疫病預(yù)防控制中心,四川 西昌 615000;2.四川省美姑縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,四川 美姑616450)
縣級獸醫(yī)實驗室承擔(dān)著轄區(qū)內(nèi)動物疫病診斷、監(jiān)測和動物流行病學(xué)調(diào)查工作,為動物疫情風(fēng)險預(yù)警評估提供有力的科學(xué)依據(jù)和決策依據(jù),所以實驗室檢測數(shù)據(jù)的準確性至關(guān)重要[1]。為準確評估涼山州縣級獸醫(yī)實驗室的檢測能力和水平,科學(xué)指導(dǎo)各縣(市)提升實驗室能力建設(shè),涼山州動物疫病預(yù)防控制中心組織開展了縣級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對工作。全州17 縣(市)參加了此次比對,采用RT-PCR、ELISA、虎紅平板凝集試驗等3 種方法對255 份盲樣進行非洲豬瘟、豬瘟和布魯氏菌病檢測。
1.1 比對項目 比對項目設(shè)置為3 個,1 個病原學(xué)檢測項目和2個血清學(xué)檢測項目。非洲豬瘟病毒核酸檢測采用熒光RT-PCR 方法,豬瘟病毒抗體檢測采用ELISA 方法,布魯氏菌病抗體檢測采用虎紅平板凝集試驗方法。
1.2 比對方法、標準等 2021 年涼山州縣級獸醫(yī)實驗室比對方法、標準及結(jié)果判定見表1。
表1 比對項目、方法、標準及結(jié)果判定
1.3 比對樣品 每個比對項目設(shè)5 份盲樣,由3份陰性、2 份陽性組成。樣品由相應(yīng)的試劑公司提供,經(jīng)涼山州動物疫病預(yù)防控制中心驗證、編號和封裝后,由參與比對的17個縣(市)獸醫(yī)實驗室派專人在指定時間統(tǒng)一領(lǐng)取,并要求在24 h內(nèi)送達參與比對的實驗室。
1.4 比對試劑 參與比對的17 個縣(市)獸醫(yī)實驗室采用的試劑均來自同一廠家、同一批次,由涼山州動物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一發(fā)放(見表2)。
表2 比對試劑名稱、廠家及批號
2.1 整體情況 全州17縣(市)均在規(guī)定時間內(nèi)上報了檢測結(jié)果。對本次比對試驗結(jié)果進行統(tǒng)計,結(jié)果顯示:共檢測盲樣255 份,結(jié)果準確的有246份,平均準確率為96.47%。其中,非洲豬瘟病毒核酸檢測試驗共檢測85 份,結(jié)果準確的有80份,準確率為94.12%,13 個縣(市)檢測結(jié)果完全準確,占比76.47%;豬瘟抗體檢測試驗共檢測85份,結(jié)果準確的有81 份,準確率為95.29%,13 個縣(市)檢測結(jié)果完全準確,占比76.47%;布病抗體檢測試驗共計檢測85份,結(jié)果準確的有85份,準確率為100.00%,17 個縣(市)檢測結(jié)果完全準確(見表3)。
表3 2021年涼山州縣級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對結(jié)果
2.2 不同縣(市)檢測能力比對結(jié)果 3 種比對試驗完全準確的縣(市)有12個,占70.59%,出現(xiàn)1種比對試驗不準確的縣(市)有2個,出現(xiàn)2種比對試驗不準確的縣(市)有3個(見表4)。
表4 2021年涼山州不同縣(市)獸醫(yī)實驗室檢測能力比對結(jié)果
3.1 結(jié)果分析 2021 年涼山州比對結(jié)果整體準確率達到95%以上,說明獸醫(yī)實驗室檢測能力整體處于較高的水平,能滿足非洲豬瘟、豬瘟等重大動物疫病及布魯氏菌病等人畜共患病檢測的需要。本次比對試驗采用的3種方法都是獸醫(yī)實驗室常見的病原學(xué)和血清學(xué)檢測方法?;⒓t平板凝集試驗方法的準確率(布魯氏菌病抗體檢測100%)明顯高于熒光RT-PCR 方法和ELISA方法的準確率(非洲豬瘟病毒核酸檢測94.12%、豬瘟病毒抗體檢測95.29%),這是因為虎紅平板凝集試驗的操作方法簡單,且2021 年涼山州動物疫病預(yù)防控制中心組織了數(shù)次布魯氏菌病專項檢測技術(shù)培訓(xùn)。
3.2 存在的問題
3.2.1 實驗室閑置 個別縣(市)對獸醫(yī)實驗室重視不夠,動物疫病監(jiān)測經(jīng)費無法落實,造成實驗室閑置,沒有發(fā)揮應(yīng)有的作用。
3.2.2 實驗室無專職技術(shù)人員 大部分縣(市)實驗室由于編制問題,無專職技術(shù)人員,且存在一人多崗、調(diào)動和借用頻繁等情況,造成檢測技術(shù)參差不齊,檢測結(jié)果不準確等。
3.2.3 實驗室人員的操作不熟練 熒光RT-PCR方法和ELISA 方法是獸醫(yī)實驗室常用的病原學(xué)和血清學(xué)檢測方法,但由于個別縣(市)部分實驗室檢測技術(shù)人員對實驗儀器設(shè)備及操作步驟不熟練,尤其是對移液器使用不規(guī)范等,會導(dǎo)致檢測結(jié)果不準確[2]。
3.2.4 實驗室儀器設(shè)備準確性差 熒光定量RT-PCR 儀和酶標儀是獸醫(yī)實驗室常用設(shè)備,個別縣(市)實驗室由于長時間沒有啟用儀器設(shè)備,也沒有按期進行校正,也會造成檢測結(jié)果不準確。
3.2.5 實驗室管理不規(guī)范 個別縣(市)由于事業(yè)單位機構(gòu)改革、人員變動、實驗室整體裝修升級改造等因素,造成實驗室管理不規(guī)范,從而影響檢測結(jié)果的準確性。