李春明，覃美容，黃燕好

（佛山市三水區(qū)人民醫(yī)院，廣東 佛山 528100）

艾滋病是一種危害性極大的疾病。該病具有傳染性，常見(jiàn)的傳播途徑包括性傳播、血液及血制品傳播、母嬰傳播，其中以性傳播最為多見(jiàn)。該病是由人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）感染所致，隨著疾病的不斷發(fā)展，HIV 會(huì)攻擊人體免疫系統(tǒng)，讓人逐漸喪失抵御疾病的能力。有研究指出，艾滋病晚期患者可因出現(xiàn)嚴(yán)重感染、惡性腫瘤而致死[1-3]。涂陰性肺結(jié)核是一種常見(jiàn)的肺結(jié)核[4-5]。目前在我國(guó)針對(duì)涂陰性肺結(jié)核的診斷，X 線檢查應(yīng)用最為廣泛，且X 線對(duì)肺部異常陰影的發(fā)現(xiàn)率高，但其特異性較差，對(duì)非結(jié)核難以定性，對(duì)于非結(jié)核性肺部疾病的診斷難度也較大[6]。臨床上常用到的涂陰性肺結(jié)核實(shí)驗(yàn)室檢查包括T-SPOT.TB 檢測(cè)以及支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)，以上兩種檢驗(yàn)方法針對(duì)涂陰性肺結(jié)核的陽(yáng)性檢出率高，能及時(shí)發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核[7-8]。本文對(duì)2020 年1 月至2020 年11月期間在我院接受治療的初診為涂陰疑似肺結(jié)核的50例艾滋病患者進(jìn)行研究，旨在探討Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB 聯(lián)合檢測(cè)在艾滋病并涂陰性肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2020 年1 月至2020 年11 月期間在我院接受治療的初診為涂陰疑似肺結(jié)核的艾滋病患者50例，將其分為涂陰肺結(jié)核組（25 例）和非結(jié)核組（25例）。涂陰肺結(jié)核組中有男性患者15 例，女性患者10例；年齡區(qū)間41 ～57 歲，平均年齡為（51.12±1.17）歲。非結(jié)核組中有男性患者14 例，女性患者11 例；年齡區(qū)間39 ～57 歲，平均年齡為（50.98±1.20）歲。兩組患者的一般資料相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。研究對(duì)象的納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床確診為艾滋病的患者；初診為涂陰疑似肺結(jié)核的患者；年齡大于18 歲，小于65 歲。研究對(duì)象的排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有其他部位結(jié)核病灶的患者。

1.2 方法

進(jìn)行T-SPOT.TB 檢測(cè)的具體方法如下：采用T-SPOT.TB 試 劑 盒( 英 國(guó) Oxford Immunote Ltd.) 進(jìn)行檢測(cè)。抽取患者的靜脈血, 分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs), 用AIM-V 培養(yǎng)液重懸細(xì)胞, 制備成濃度為2.5×105/mL的細(xì)胞懸液。將微量板放入37℃孵箱培養(yǎng)16 ～20 h后, 洗板并加入堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗, 將培養(yǎng)板置于2 ～8℃的環(huán)境中孵育1 h 后進(jìn)行PBS 洗板。最后加入BCIP/NBT 底物工作液顯色, 于顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)判讀。進(jìn)行支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)的具體方法如下：在支氣管鏡下使用一次性灌洗裝置分3 次將150 mL 的生理鹽水灌入患者的支氣管肺泡內(nèi)，每次灌入50 mL 左右，生理鹽水的溫度控制在37℃左右。灌洗完畢后使用負(fù)壓緩慢吸引，調(diào)整回收負(fù)壓為50 ～80 mmHg，確保液體回收率大于40%。將患者的支氣管肺泡灌洗液送檢，進(jìn)行Xpert MTB/RIF 檢測(cè)。將采集到的標(biāo)本與氫氧化鈉異丙醇處理液按1:2 的比例混合，充分震蕩后于室溫下靜置15 min，在MTB 生物危險(xiǎn)降低至1/106 后將混合液轉(zhuǎn)移至一次性塑料反應(yīng)盒中。將反應(yīng)盒放置于GENE Xpert 儀器（生產(chǎn)廠家：美國(guó)Gepheid 公司）中進(jìn)行全自動(dòng)檢驗(yàn)，2 h 后讀取結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察對(duì)比兩組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)的結(jié)果，陽(yáng)性為肺結(jié)核；觀察對(duì)比兩組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)的結(jié)果，陽(yáng)性為肺結(jié)核。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次試驗(yàn)使用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比

涂陰肺結(jié)核組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率為80.00%，非結(jié)核組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率為16.00%。涂陰肺結(jié)核組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率顯著高于非結(jié)核組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳情見(jiàn)表1。

表1 兩組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比[例（%）]

2.2 兩組患者支氣管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比

涂陰肺結(jié)核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率（84.00%）顯著高于非結(jié)核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率（4.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳情見(jiàn)表2。

表2 兩組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比[例（%）]

3 討論

艾滋病是由感染HIV 引起的一種強(qiáng)傳染性疾病，患者的免疫系統(tǒng)遭到破壞，易發(fā)生各種感染性疾病，其中肺結(jié)核是艾滋病最為常見(jiàn)的機(jī)會(huì)性感染之一。結(jié)核病與艾滋病是一組可相互促進(jìn)病變進(jìn)展、惡化，迅速導(dǎo)致患者死亡的伴發(fā)病[9-10]。相關(guān)的研究指出，HIV 陽(yáng)性患者感染結(jié)核桿菌后，結(jié)核病的發(fā)病率較HIV 陰性者高30 倍，且雙重感染患者的病死率高達(dá)1/3，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單純肺結(jié)核群體[11-13]。針對(duì)艾滋病并發(fā)涂陰性肺結(jié)核的診斷，目前主要依靠X 線檢查和相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查[14-15]，其中X 線檢查的應(yīng)用最為廣泛，但其特異性較差，對(duì)非結(jié)核難以定性，對(duì)于非結(jié)核性肺部疾病的診斷難度也較大[16-17]。T-SPOT.TB是一種操作簡(jiǎn)單的酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)方法，該方法的靈敏度高，能夠準(zhǔn)確捕獲細(xì)胞周?chē)募?xì)胞因子。肺泡灌洗液檢驗(yàn)是指通過(guò)微生物學(xué)及化學(xué)方法對(duì)肺泡灌洗液進(jìn)行分析并獲得檢驗(yàn)結(jié)果。為提高艾滋病并發(fā)涂陰性肺結(jié)核的檢出率，我院采取T-SPOT.TB 檢測(cè)聯(lián)合支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)對(duì)患者進(jìn)行檢查。研究結(jié)果顯示，涂陰肺結(jié)核組患者T-SPOT.TB檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率（80.00%）顯著高于非結(jié)核組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率（16.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；涂陰肺結(jié)核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率（84.00%）顯著高于非結(jié)核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率（4.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，T-SPOT.TB 檢測(cè)聯(lián)合支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測(cè)在艾滋病并涂陰性肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值較高，值得在臨床上推廣。