彭田川 喻 梅

重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，重慶 401320

反復(fù)上呼吸道感染為一種臨床上常見的疾病，該病病程較長、發(fā)病較高，嚴(yán)重影響患兒的身心健康[1]。小兒反復(fù)上呼吸道感染的發(fā)生不僅與病原微生物感染、免疫功能有關(guān)，還與血清缺乏部分微量元素密切相關(guān)[2]。相比于正常兒童，反復(fù)上呼吸道感染患兒機體微量元素明顯缺乏，且其缺乏程度與患兒病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)[3]。維生素A 和維生素D 為機體常見的脂溶性微量元素，在兒童生長發(fā)育過程中具有重要的臨床意義，且血清維生素A 和維生素D 水平與患兒的免疫功能顯著相關(guān)[4-5]。然而國內(nèi)有關(guān)反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 缺乏現(xiàn)狀及與免疫功能關(guān)系的研究較少。鑒于此，本研究特取重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）收治的79 例反復(fù)上呼吸道感染患兒進行研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019 年5 月至2022 年1 月我院收治的79 例反復(fù)上呼吸道感染患兒為研究組，另選擇同期體檢健康兒童75 名為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①參照《實用兒科學(xué)（第8 版）》[6]，患兒符合反復(fù)上呼吸道感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近1 個月內(nèi)使用丙種球蛋白、維生素D、免疫抑制劑、維生素A、糖皮質(zhì)激素等藥物治療；②伴有營養(yǎng)不良、過敏體質(zhì)等；③伴有先天性系統(tǒng)疾病；④合并原發(fā)性器官功能不全；⑤合并自身免疫疾?。虎藓喜⒙晕秆?、慢性腹瀉。對照組中男41 名，女34 名；年齡2～13 歲，平均（7.31±1.65）歲。研究組中男43 例，女36 例；年齡3～13 歲，平均（7.19±1.48）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批（C23-225-004）。

1.2 研究方法

1.2.1 維生素A 和維生素D 的檢測 對照組于體檢當(dāng)天抽取2 ml 靜脈血，研究組于入院次日抽取2 ml 空腹靜脈血，通過H1650R 臺式高速冷凍離心機（中國，上海盧湘儀離心機儀器有限公司，半徑：6 cm，轉(zhuǎn)速：3 000 r/min，分離時間：15 min）分離血清，取上清液，使用Waters Acquity UPLC-TQD 型液質(zhì)聯(lián)用儀（美國，Waters 公司），通過高效液相色譜法檢測兩組維生素A 和D 水平，Waters Nova-pak C18液相色譜柱（3.9 mm×150 mm，4 μm），流動相為甲醇∶乙腈∶四氫呋喃∶水=40∶33∶22∶5，流速：1.2 ml/min，檢測波長：290 nm，溫度：37℃。維生素A 的判定標(biāo)準(zhǔn)[7]為正常：0.3～＜0.5 mg/L；可疑亞臨床型缺乏：0.2～＜0.3 mg/L；亞臨床型缺乏：0.1～＜0.2 mg/L；臨床型缺乏：＜0.1 mg/L。維生素D 的判定標(biāo)準(zhǔn)[8]為充足：＞75 nmol/L；不足：50～75 nmol/L；缺乏：＜50 nmol/L。

1.2.2 免疫功能的檢測 血液采集方法同上，通過CytoFLEX 流式細胞儀（美國貝克曼）檢測兩組CD3+、CD4+、CD8+水平，并計算CD4+/CD8+。通過免疫比濁法檢測兩組免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG 及IgM，試劑盒購于上海羽哚生物科技有限公司（貨號：YDJQ3916）。

1.3 觀察指標(biāo)

①統(tǒng)計反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 的缺乏現(xiàn)狀；②比較兩組維生素A 和維生素D 水平；③比較兩組免疫功能；④分析反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 與免疫功能的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 23.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t 檢驗；計數(shù)資料用例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗；反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)分析。以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 的缺乏現(xiàn)狀

79 例反復(fù)上呼吸道感染患兒中維生素A 正常55 例（69.62%）、可疑亞臨床型缺乏12 例（15.19%）、亞臨床型缺乏7 例（8.86%）、臨床型缺乏5 例（6.33%）；維生素D 充足59 例（74.68%）、不足13 例（16.46%）、缺乏7 例（8.86%）。

2.2 兩組維生素A 和維生素D 水平比較

研究組維生素A 和維生素D 水平均低于對照組（P ＜0.05）。見表1。

表1 兩組維生素A 和維生素D 水平比較（）

表1 兩組維生素A 和維生素D 水平比較（）

2.3 兩組免疫功能指標(biāo)比較

研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG、IgM 水平低于對照組（P ＜0.05），CD8+高于對照組（P ＜0.05）。見表2。

表2 兩組免疫功能指標(biāo)比較（）

表2 兩組免疫功能指標(biāo)比較（）

注 Ig：免疫球蛋白

2.4 反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性

反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 水平與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG、IgM 水平均呈正相關(guān)（P ＜0.05），與CD8+均呈負相關(guān)（P ＜0.05）。見表3。

表3 反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和D 與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性

3 討論

兒童體液免疫與細胞免疫功能尚未完全發(fā)育，維生素等微量元素的缺乏均有可能引起反復(fù)上呼吸道感染的發(fā)生[9-11]。目前國內(nèi)尚缺乏有關(guān)反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 缺乏現(xiàn)狀及與免疫功能關(guān)系的報道。為此，本研究特采用前瞻性研究分析反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 的缺乏現(xiàn)狀。

維生素A 與視覺、生長發(fā)育、細胞分化、免疫功能、細胞增殖、基因轉(zhuǎn)錄等密切相關(guān)，此外其還參與上皮細胞的完整性、視覺細胞中感光物質(zhì)構(gòu)成及機體生長發(fā)育等多種生理功能[12-14]。維生素A 與反復(fù)呼吸道感染的發(fā)生密切相關(guān)[15-17]。此外，維生素A 可促進B細胞、巨噬細胞、T 細胞等免疫反應(yīng)，其可通過促進免疫蛋白的合成，影響細胞免疫與體液免疫，進而影響機體的免疫功能，維生素A 缺乏會造成CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG、IgM 水平下降[18-19]。維生素D 歸屬類固醇激素，具有調(diào)節(jié)鈣磷物質(zhì)代謝、細胞免疫等作用，其可通過調(diào)節(jié)鈣磷物質(zhì)代謝，從而增強呼吸道管壁纖毛運動，同時能夠增強巨噬細胞的吞噬功能，有助于增強機體的抗炎能力及呼吸道清除能力[20-21]。本研究結(jié)果顯示，相比于正常兒童，反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 水平及細胞免疫、體液免疫異常。CD8+細胞活化有助于控制感染，CD3+、CD4+細胞活化有助于將細胞內(nèi)的真菌與病原體清除，此外，反復(fù)上呼吸道感染也會伴隨IgA、IgG、IgM 等免疫球蛋白水平的下降[22]。IgA 能夠阻斷病原體在細胞表面的黏附效應(yīng)；IgG 可抵抗病原體感染；IgM 能夠活化補體，從而激活機體免疫功能，其具有一定的免疫防御作用[23-24]。體液免疫功能下降、維生素A 和維生素D 水平降低為兒童呼吸道感染的重要危險因素[25]。此外，本研究結(jié)果顯示，反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 水平與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG、IgM 水平呈正相關(guān)，而與CD8+呈負相關(guān)，提示反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 水平免疫功能顯著相關(guān)。

綜上所述，反復(fù)上呼吸道感染患兒維生素A 和維生素D 缺乏現(xiàn)狀仍有待改善，且其水平與免疫功能密切相關(guān)，可輔助判定維生素A 和維生素D 缺乏現(xiàn)狀。