于道德 陳勝林 郭少菁 樊 英,3 王曉璐,3 宋靜靜 劉洪軍,3*

(1.山東省海洋科學(xué)研究院，青島 266104；2.濱州市海洋發(fā)展研究院，濱州 256603；3.山東省海水養(yǎng)殖病害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青島 266104)

凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)是全世界主要的甲殼類養(yǎng)殖物種之一[1]。近年來(lái)，隨著對(duì)蝦的高密度、集約化養(yǎng)殖，種質(zhì)退化、養(yǎng)殖環(huán)境惡化和病害等災(zāi)害造成了不少經(jīng)濟(jì)損失[2-4]。使用激素和抗生素是作為預(yù)防和治療病害的傳統(tǒng)方法，但往往導(dǎo)致了致病微生物的進(jìn)化、藥物殘留以及環(huán)境污染[5-6]。作為抗生素的重要替代物，益生菌具備健康、綠色、安全等特點(diǎn)，普遍應(yīng)用于蝦蟹類等水珍品養(yǎng)殖過(guò)程中[7-9]。

迄今為止，許多常見(jiàn)菌株已被用作對(duì)蝦養(yǎng)殖的益生菌，包括枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)和乳酸菌(Lactobacillus)等。其中，枯草芽孢桿菌能夠耐受高溫、高壓、高鹽度、低氧、低水分等不利條件，其生長(zhǎng)繁殖可以分泌大量消化酶類，幫助宿主降解、吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。Chai等[10]研究發(fā)現(xiàn)，口服芽孢桿菌PC465可以提高凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能和存活率。采用枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌作為飼料添加劑，可顯著提高對(duì)蝦腸道內(nèi)芽孢桿菌的豐度，促進(jìn)對(duì)蝦生長(zhǎng)發(fā)育[11-13]。本試驗(yàn)通過(guò)向飼料中添加不同水平的枯草芽孢桿菌HSP05，以評(píng)估其對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、抗病力和非特異性免疫力的影響，為該菌株在作為飼料添加劑的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株來(lái)源與計(jì)數(shù)

枯草芽孢桿菌HSP05為實(shí)驗(yàn)室保藏菌株，從健康養(yǎng)殖3年以上的對(duì)蝦養(yǎng)殖池中分離得到。將枯草芽孢桿菌HSP05按1%的比例接種到LB營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，30 ℃、165 r/min過(guò)夜培養(yǎng)進(jìn)行活化，隨后逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)。3 000 r/min離心20 min，棄掉上清液收集菌體。用適量無(wú)菌生理鹽水調(diào)整菌株濃度，逐級(jí)稀釋添加到飼料制作過(guò)程中。

采用平板菌落計(jì)數(shù)法進(jìn)行菌株數(shù)量統(tǒng)計(jì)。用磷酸鹽緩沖液(PBS)將菌液稀釋，于LB固體平板上進(jìn)行涂布，每個(gè)梯度涂布3個(gè)平板做為平行，挑選合適的稀釋梯度進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)結(jié)果取3個(gè)平行的平均值。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和飼料制作

挑選大小一致的1 200尾凡納濱對(duì)蝦蝦苗，體長(zhǎng)(3.0±0.2) cm，隨機(jī)分為4個(gè)組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100尾。各組分別投喂枯草芽孢桿菌HSP05添加量為0(對(duì)照組)、105(BS1組)、107(BS2組)、109CFU/g(BS3組)的試驗(yàn)飼料。試驗(yàn)期4周。

以魚(yú)粉、豆粕和玉米粕為主要蛋白質(zhì)源，魚(yú)油和磷脂油為主要脂肪源，小麥面粉為主要糖源，并補(bǔ)充無(wú)機(jī)鹽、維生素等配制出基礎(chǔ)飼料，基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。飼料原料經(jīng)粉碎、80目過(guò)篩、混合均勻后，添加不同體積固定濃度的枯草芽孢桿菌HSP05，配制枯草芽孢桿菌HSP05終濃度分別為105、107、109CFU/g的試驗(yàn)飼料，對(duì)照組添加等體積的生理鹽水。飼料原料全部混合均勻后，噴水制備面團(tuán)，用飼料顆粒機(jī)擠壓膨化成型，常溫陰至半干，剪切成1.5 mm×(3～5) mm的顆粒，置陰涼干燥處保存。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (DM basis) %

1.3 養(yǎng)殖管理

健康的凡納濱對(duì)蝦幼蝦購(gòu)自山東煙臺(tái)海陽(yáng)對(duì)蝦養(yǎng)殖場(chǎng)，在試驗(yàn)前于25～28 ℃和27‰～30‰鹽度的循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中暫養(yǎng)2周。暫養(yǎng)期間飼喂基礎(chǔ)飼料。隨后挑選大小一致的蝦苗，體長(zhǎng)(3.0±0.2) cm，隨機(jī)分散到12個(gè)玻璃缸(300 L)中開(kāi)始養(yǎng)殖試驗(yàn)。養(yǎng)殖周期為4周。

養(yǎng)殖期間每天投喂對(duì)蝦4次(06:00、12:00、17:00和22:00)，每天清除殘餌和糞便，并記錄攝食量和健康狀況，每周測(cè)定1次體長(zhǎng)、體重。養(yǎng)殖全過(guò)程不間斷充氣，溶解氧含量不低于5 mg/L，氨氮含量不高于0.03 mg/L。每天換水1次，每次換水占總水量的2/3。

1.4 樣品采集

使用含有抗凝劑的1 mL無(wú)菌注射器從對(duì)蝦的圍心腔內(nèi)抽取血淋巴。其中抗凝劑與血淋巴的混合體積比為1∶1。隨后將血淋巴離心，用PBS調(diào)整至血細(xì)胞數(shù)量達(dá)到106個(gè)/mL，進(jìn)行吞噬活性和呼吸暴發(fā)試驗(yàn)，每組9個(gè)平行。

使用1 mL無(wú)菌注射器從對(duì)蝦的圍心腔內(nèi)抽取血淋巴，4 ℃放置過(guò)夜后，3 500 r/min離心10 min，收集上清液置于液氮中速凍，儲(chǔ)存于-80 ℃，用于免疫相關(guān)酶活性的分析，每組8個(gè)平行。

收集對(duì)蝦肝胰腺置于液氮速凍，并儲(chǔ)存于-80 ℃，用于消化酶和免疫相關(guān)酶活性的分析，每組8個(gè)平行。在酶活性測(cè)定時(shí)，將適量對(duì)蝦肝胰腺樣品加入PBS勻漿緩沖液中制成20%的組織勻漿樣品，4 ℃，2 500×g離心10 min，收集上層澄清勻漿液分裝備用。

1.5 侵染試驗(yàn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，進(jìn)行為期1周的副溶血弧菌侵染試驗(yàn)。每個(gè)玻璃缸中留50 L海水和25只凡納濱對(duì)蝦，用濃度為107CFU/mL的副溶血弧菌浸浴。侵染期間不換水，投喂添加菌株的飼料，每12 h統(tǒng)計(jì)一次死亡情況，及時(shí)撈出死蝦和糞便。

1.6 指標(biāo)測(cè)定

1.6.1 生長(zhǎng)性能

在養(yǎng)殖試驗(yàn)過(guò)程中，每周、每缸隨機(jī)選取8尾對(duì)蝦測(cè)定其體長(zhǎng)(body length，BL)、體重(body weight，BW)。試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)各缸對(duì)蝦進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算存活率(survival rate，SR)、增重率(weight gain rate，WGR)、飽滿度(condition factor，CF)和特定生長(zhǎng)率(specific growth rate，SGR)，計(jì)算公式如下：

式中：W0為對(duì)蝦初始體重；Wt為對(duì)蝦終末體重；Lt為對(duì)蝦終末體長(zhǎng)；T為養(yǎng)殖試驗(yàn)時(shí)間。

1.6.2 血細(xì)胞免疫反應(yīng)測(cè)定

1.6.2.1 吞噬活性

試驗(yàn)方法在Delaporte等[15]的方法基礎(chǔ)上稍作修改，簡(jiǎn)述如下：用PBS調(diào)整血細(xì)胞濃度為106個(gè)/mL；取4 μL、25%的熒光微球加入400 μL血細(xì)胞中，混合均勻，18 ℃下避光孵育1 h；加入26 μL多聚甲醛終止反應(yīng)；4 ℃、800×g離心10 min去除游離的熒光微球；加入400 μL PBS重懸血細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀FL-1通道檢測(cè)分析血細(xì)胞的綠色熒光。采用血細(xì)胞吞噬率，即吞噬微球的血細(xì)胞數(shù)目占血細(xì)胞總數(shù)的百分比來(lái)表征吞噬能力。

1.6.2.2 呼吸爆發(fā)

血細(xì)胞呼吸爆發(fā)產(chǎn)生的活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)可以將二氫羅丹明123(dihydrorhodamine 123，DHR123)氧化為發(fā)熒光的羅丹明123(rhodamine 123，RHO123)[16]，經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，比較呼吸爆發(fā)吸收峰偏移程度以比較血細(xì)胞的呼吸爆發(fā)活性。將對(duì)蝦血細(xì)胞數(shù)量調(diào)整為106個(gè)/mL，于25 ℃、黑暗條件下孵育10 min，添加佛波酯(PMA)使其終濃度達(dá)到0.1 μg/mL，繼續(xù)孵育10 min后添加DHR123，使DHR123終濃度為2 μg/mL，繼續(xù)孵育30 min。采用流式細(xì)胞儀FL-1通道檢測(cè)分析呼吸爆發(fā)活性。

1.6.3 酶活性測(cè)定

肝胰腺消化酶[淀粉酶(AMS)、蛋白酶(PR)、脂肪酶(LPS)]、轉(zhuǎn)氨酶[(谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)]、抗氧化相關(guān)酶[超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)]活性和血清免疫相關(guān)酶[酚氧化酶(PO)、溶菌酶(LZM)]活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定。

1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVE)，采用LSD方差齊性檢驗(yàn)方法比較各組之間的差異，顯著性水平定義為P<0.05。

2 結(jié) 果

2.1 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響

如表2所示，各組存活率均在75%以上，各組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。BS1、BS2和BS3組的終末體重和終末體長(zhǎng)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS1、BS2和BS3組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。各組之間飽滿度無(wú)顯著差異(P>0.05)。BS1、BS2和BS3組的增重率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS2組的增重率顯著高于BS3組(P<0.05)。BS1、BS2和BS3組的特定生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS1、BS2和BS3組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表2 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of dietary Bacillus subtilis HSP05 on growth performance of Litopenaeus vannamei

2.2 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦肝胰腺消化酶和轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

如表3所示，BS1、BS2和BS3組的肝胰腺蛋白酶、淀粉酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS2和BS3組的肝胰腺蛋白酶、淀粉酶活性顯著高于BS1組(P<0.05)。各組之間肝胰腺脂肪酶活性無(wú)顯著差異(P>0.05)。BS1、BS2和BS3組的肝胰腺谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，BS2組的肝胰腺谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于BS1組(P<0.05)，BS1、BS2和BS3組之間肝胰腺谷草轉(zhuǎn)氨酶活性無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表3 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦肝胰腺消化酶和轉(zhuǎn)氨酶活性的影響Table 3 Effects of dietary Bacillus subtilis HSP05 on activities of digestive enzyme and transaminase in hepatopancreas of Litopenaeus vannamei U/mg prot

2.3 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清和肝胰腺免疫相關(guān)酶活性的影響

如表4所示，BS1、BS2和BS3組的血清酚氧化酶和溶菌酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS1、BS2和BS3組之間血清酚氧化酶活性無(wú)顯著差異(P>0.05)，BS2和BS3組的血清溶菌酶活性顯著高于BS1組(P<0.05)。BS1、BS2和BS3組的肝胰腺過(guò)氧化氫酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS2和BS3組的肝胰腺過(guò)氧化氫酶活性顯著高于BS1組(P<0.05)。BS2和BS3組的肝胰腺超氧化物歧化酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS3組的肝胰腺超氧化物歧化酶活性顯著高于BS2組(P<0.05)。

2.4 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞免疫活性的影響

如表5所示，BS1、BS2和BS3組的血細(xì)胞吞噬率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，BS2和BS3組的血細(xì)胞吞噬率顯著高于BS1組(P<0.05)。BS1、BS2和BS3組的呼吸爆發(fā)活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，BS2和BS3組的呼吸爆發(fā)活性顯著低于BS1組(P<0.05)。

表4 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清和肝胰腺免疫相關(guān)酶活性的影響Table 4 Effects of dietary Bacillus subtilis HSP05 on serum and hepatopancreas immune related enzyme activities of Litopenaeus vannamei

表5 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞免疫活性的影響Table 5 Effects of dietary Bacillus subtilis HSP05 on blood cell immune activities of Litopenaeus vannamei %

2.5 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦抗病力的影響

如圖1所示，副溶血弧菌侵染持續(xù)3 d時(shí)，對(duì)照組的存活率就已明顯低于BS1、BS2和BS3組；副溶血弧菌侵染持續(xù)7 d時(shí)，對(duì)照組的存活率為46.67%，而B(niǎo)S1、BS2和BS3組的存活率均達(dá)到82.67%以上，且BS1、BS2和BS3組之間的差異不明顯。

圖1 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦抗病力的影響Fig.1 Effects of dietary Bacillus subtilis HSP05 on disease resistance of Litopenaeus vannamei

3 討 論

3.1 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響

枯草芽孢桿菌是水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的益生菌株，其豐富的產(chǎn)酶系統(tǒng)可促進(jìn)飼料中大分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用，促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的健康生長(zhǎng)。本研究結(jié)果表明，飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05能顯著提高凡納濱對(duì)蝦的終末體長(zhǎng)、終末體重、增重率和特定生長(zhǎng)率。綜合枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響，尤其是增重率方面，發(fā)現(xiàn)107CFU/g是促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)的適宜添加量。這與芽孢桿菌對(duì)刺參(Apostichopusjaponicus)[17-18]、斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeusmonodon)[19-20]及凡納濱對(duì)蝦[21-22]等的研究結(jié)果相似。在本試驗(yàn)中，枯草芽孢桿菌HSP05的促生長(zhǎng)效果與其添加量不呈正相關(guān)，109CFU/g枯草芽孢桿菌HSP05組的增重率顯著低于107CFU/g枯草芽孢桿菌HSP05組。這可能是由于過(guò)量的枯草芽孢桿菌抑制了凡納濱對(duì)蝦腸道內(nèi)其他菌群的生長(zhǎng)，導(dǎo)致腸道菌群失衡而造成其生長(zhǎng)緩慢，更深層次的原因還有待深入研究。

3.2 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦肝胰腺消化酶和轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

枯草芽孢桿菌促進(jìn)對(duì)蝦生長(zhǎng)可能與其產(chǎn)酸、抗菌肽、胞外酶等小分子活性物質(zhì)等作用有關(guān)。本研究中，飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05能顯著提高凡納濱對(duì)蝦肝胰腺蛋白酶、淀粉酶活性，這與胡毅等[23]的研究結(jié)果類似，其在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌及復(fù)合益生菌，結(jié)果顯示添加益生菌可提高對(duì)蝦腸道消化酶活性，促進(jìn)對(duì)蝦健康生長(zhǎng)。此外，谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶升高往往代表著肝胰腺出現(xiàn)炎癥。本試驗(yàn)中，飼料中添加了枯草芽孢桿菌HSP05顯著降低了凡納濱對(duì)蝦肝胰腺谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性，這與Vega-Carranza等[12]、張健等[24]研究結(jié)果相似，表明枯草芽孢桿菌HSP0有著改善健康、增強(qiáng)免疫的作用。

3.3 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦非特異性免疫力的影響

凡納濱對(duì)蝦免疫能力是細(xì)胞免疫和體液免疫協(xié)同作用的結(jié)果。酚氧化酶原存在于血細(xì)胞內(nèi)，極微量微生物多糖可引起血細(xì)胞的胞吐作用，釋放、激活酚氧化酶原系統(tǒng)，提高機(jī)體對(duì)病原微生物的抵抗力[25-26]。在本研究中，與對(duì)照組相比，BS1、BS2和BS3組凡納濱對(duì)蝦血清酚氧化酶和溶菌酶活性顯著上升，這是激活酚氧化酶原系統(tǒng)的必然結(jié)果。類似的，謝佳磊等[27]的研究得出，飼料中添加枯草芽孢桿菌(5×109CFU/kg)可以提高克氏原螯蝦(Procambarusclarkii)血清溶菌酶和酚氧化酶活性。同時(shí)，超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶能夠有效清除氧自由基，避免其造成生物體損傷，在提高對(duì)蝦機(jī)體免疫能力、增強(qiáng)對(duì)蝦疾病防御起重要作用。在本試驗(yàn)中，BS1、BS2和BS3組肝胰腺過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶活性均高于對(duì)照組，肝胰腺過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶活性分別在枯草芽孢桿菌HSP05添加量為107和109CFU/g時(shí)達(dá)到最大值，表明飼喂枯草芽孢桿菌HSP05可提高兩者活性，這與王苓等[28]以枯草芽孢桿菌飼喂凡納濱對(duì)蝦后所得結(jié)果相似。上述結(jié)果表明飼料中添加適量的枯草芽孢桿菌HSP05可提高凡納濱對(duì)蝦的非特異性免疫力，或可有助于提高其抗病力。

血細(xì)胞免疫反應(yīng)是機(jī)體抵御病原微生物侵襲的重要手段。凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞的吞噬率隨著枯草芽孢桿菌HSP05添加量增加而增加，原因可能是枯草芽孢桿菌HSP05被攝入后，利用表面抗原或其產(chǎn)生的代謝物調(diào)節(jié)對(duì)蝦的免疫防御系統(tǒng)，使對(duì)蝦血細(xì)胞吞噬率提高。Rengpipat等[29]研究結(jié)果同樣表明添加芽孢桿菌S11可以激活細(xì)胞免疫防御功能。在吞噬作用期間，呼吸爆發(fā)被用來(lái)殺死病原菌，特別是依賴于ROS，但是它們的過(guò)度產(chǎn)生會(huì)干擾包括脂類、蛋白質(zhì)和核酸在內(nèi)的生物分子，并產(chǎn)生氧化損傷和氧化應(yīng)激[30]。在本研究中，飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05可以抑制血細(xì)胞呼吸爆發(fā)活性，即血細(xì)胞ROS產(chǎn)量被顯著抑制，從而降低過(guò)量的ROS對(duì)機(jī)體的損害。這種對(duì)呼吸爆發(fā)的抑制能力可能與過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶活性提高有關(guān)。

3.4 飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05對(duì)凡納濱對(duì)蝦抗病力的影響

病害問(wèn)題是造成凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖成功率低的主要原因，存活率是抗病力的外在直觀體現(xiàn)，副溶血弧菌是引起凡納濱對(duì)蝦肝胰腺壞死綜合征的致病菌，致死率較高[31-32]。國(guó)內(nèi)外均有研究顯示，用芽孢桿菌飼喂對(duì)蝦或?qū)ξr幼體，可用于控制病原菌的感染[8,33-34]。本研究結(jié)果與上述結(jié)果類似，飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05提高了凡納濱對(duì)蝦在副溶血弧菌侵染下的存活率，充分發(fā)揮了免疫防御作用，但枯草芽孢桿菌HSP05的添加量對(duì)對(duì)蝦抗病力沒(méi)有明顯影響。這說(shuō)明低濃度下的枯草芽孢桿菌HSP05依舊具有抗感染效果。

4 結(jié) 論

飼料中添加枯草芽孢桿菌HSP05可促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)，增強(qiáng)免疫力，提高抗病力?？莶菅挎邨U菌HSP05的添加量為107CFU/g時(shí)，凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)表現(xiàn)最優(yōu)，非特異性免疫得到有效提高。