張濤，嚴(yán)雋陶，葉斌

1.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，上海 200437； 2.上海市第三康復(fù)醫(yī)院，上海 200436

骨關(guān)節(jié)炎是一種常見的滑膜關(guān)節(jié)疾病，其主要特征是軟骨退化以及骨過度生長等。隨著人口老齡化及肥胖癥、關(guān)節(jié)外傷患者的增加，骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率逐年升高，給家庭和社會(huì)帶來了巨大的負(fù)擔(dān)[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界骨關(guān)節(jié)炎的患病人數(shù)已超2.5億[2]。軟骨細(xì)胞衰老在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮了重要作用[3]。骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)展與關(guān)節(jié)組織中衰老軟骨細(xì)胞數(shù)量的增加有關(guān)[4]。衰老軟骨細(xì)胞可以通過增加衰老相關(guān)β半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase，SA-β-gal)表達(dá)、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinases，CDK)抑制劑p16INK4a積累、分泌衰老相關(guān)的分泌表型(senescence-associated secretory phenotype，SASP)并引起DNA損傷反應(yīng)等，破壞軟骨形態(tài)及結(jié)構(gòu)[5]。同時(shí)，作為基因表達(dá)的調(diào)節(jié)因子，microRNA在骨關(guān)節(jié)炎軟骨中被異常調(diào)節(jié)，并在軟骨細(xì)胞的衰老過程中發(fā)揮調(diào)控作用，影響疾病的進(jìn)展[6]，這意味著通過調(diào)控特定的microRNA影響軟骨細(xì)胞的衰老過程，可能是一種有效的治療方法。因此，全面了解軟骨細(xì)胞衰老相關(guān)microRNA及其機(jī)制對(duì)骨關(guān)節(jié)炎的研究和治療有著重要意義。

現(xiàn)有研究多集中在microRNA調(diào)控軟骨細(xì)胞的增殖、凋亡、自噬等方面，對(duì)軟骨細(xì)胞衰老的調(diào)控研究較少，且缺少相關(guān)文獻(xiàn)綜述。故本文介紹了在骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老中研究較多的microRNA及相關(guān)信號(hào)通路的作用機(jī)制，并對(duì)中醫(yī)藥研究現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述。

1 軟骨細(xì)胞衰老

1.1 衰老軟骨細(xì)胞的產(chǎn)生機(jī)制軟骨細(xì)胞衰老可能由線粒體功能障礙、機(jī)械載荷過大、復(fù)制衰老、氧化應(yīng)激以及DNA損傷等多種因素導(dǎo)致，繼而引起端粒侵蝕、p53、CDK抑制劑p21和p16INK4a表達(dá)增加，通過線粒體功能障礙增加活性氧(reactive oxygen species，ROS)生成以及衰老相關(guān)的異染色質(zhì)增加[7]。具體言之，軟骨細(xì)胞會(huì)隨著時(shí)間的推移而衰老和衰退。研究顯示，骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率與年齡增長呈顯著的正相關(guān)，而由年齡增長導(dǎo)致的軟骨細(xì)胞衰老是其主要發(fā)病機(jī)制之一[8]。除了增齡，創(chuàng)傷后的軟骨及細(xì)胞外基質(zhì)修復(fù)也會(huì)使得軟骨細(xì)胞的增殖潛力被激活，加速軟骨細(xì)胞衰老，刺激軟骨退化[9]。此外，關(guān)節(jié)的異常機(jī)械載荷和剪切應(yīng)力以及高熱量、低營養(yǎng)飲食等不良生活方式也可使軟骨細(xì)胞衰老的過程過早啟動(dòng)[10]。

1.2 衰老軟骨細(xì)胞相關(guān)生物標(biāo)志物軟骨細(xì)胞衰老時(shí)會(huì)發(fā)生特定的形態(tài)和分子變化。在形態(tài)上，衰老會(huì)使軟骨細(xì)胞趨于扁平和增大，并積累應(yīng)激顆粒和液泡。而在分子變化方面，軟骨細(xì)胞的衰老會(huì)引起SA-β-gal表達(dá)的增高。SA-β-gal是一種糖苷水解酶，可作為哺乳動(dòng)物組織中識(shí)別衰老細(xì)胞的生物標(biāo)志物，其在衰老細(xì)胞中活性的升高可能是由于細(xì)胞中某些溶酶體酶活性的提高[11]。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，SA-β-gal陽性染色軟骨細(xì)胞在骨關(guān)節(jié)炎軟骨組織中增加，且與疾病嚴(yán)重程度成正比[12]。

除此之外，p53/p21/視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(retinoblastoma，Rb)及p16INK4a/Rb通路相關(guān)基因也是軟骨細(xì)胞衰老的生物標(biāo)志物。雖然引起細(xì)胞衰老的上游調(diào)控通路和機(jī)制不盡相同，但其最終效應(yīng)通路基本圍繞這兩條通路。DNA損傷后，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生的改變會(huì)磷酸化p53，激活p53，上調(diào)其下游靶基因p21的轉(zhuǎn)錄，抑制CDK2的活性進(jìn)而抑制Rb蛋白去磷酸化，引起軟骨細(xì)胞G1期周期阻滯，導(dǎo)致細(xì)胞衰老[13]。而p16作為一種與年齡高度相關(guān)的生物標(biāo)志物，其細(xì)胞內(nèi)檢測水平已被證實(shí)可以作為細(xì)胞衰老和確定生物體生物學(xué)年齡的生物標(biāo)志物[14]。p16誘導(dǎo)細(xì)胞衰老的機(jī)制與p21相似，通過阻斷CDK4/6，阻止細(xì)胞周期抑制蛋白R(shí)b的下游抑制作用，從而誘導(dǎo)細(xì)胞衰老。研究表明，軟骨細(xì)胞p21或p16的高表達(dá)可以引起細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)蛋白的減少，同時(shí)上調(diào)SASP表達(dá)，導(dǎo)致軟骨破壞[15]。

但值得注意的是，除了受細(xì)胞衰老的影響，SA-β-gal還受細(xì)胞自噬和溶酶體活性等其他變化的調(diào)控，因此不能單獨(dú)將其作為反映細(xì)胞衰老的生物標(biāo)志物[16]。p21、p16基因雖然是軟骨細(xì)胞衰老的標(biāo)志物，但有研究證實(shí)，p21、p16基因與骨關(guān)節(jié)炎并無直接因果關(guān)系，誘導(dǎo)衰老軟骨細(xì)胞分泌的SASP才是直接導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病的關(guān)鍵因素[17]。

雖然衰老軟骨細(xì)胞是一種進(jìn)入穩(wěn)定生長停滯狀態(tài)的細(xì)胞，但其依然保持代謝活性，其分泌的趨化因子、細(xì)胞因子、蛋白酶和生長因子被統(tǒng)稱為SASP。作為骨關(guān)節(jié)炎最主要、最直接的驅(qū)動(dòng)因素，持續(xù)存在的SASP分泌可以影響鄰近的細(xì)胞和組織，在周圍的微環(huán)境中誘導(dǎo)一系列生理反應(yīng)，如炎癥和生長阻滯等[18]，促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨ECM大分子的降解，導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生[19]。具體言之，趨化因子與細(xì)胞因子如CCL2、CCL4、白細(xì)胞介素-1(interleukin-1，IL-1)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、腫瘤壞死因子(tumor necrosisfactor，TNF)等表達(dá)的上調(diào)可引起巨噬細(xì)胞浸潤，ROS產(chǎn)生，DNA損傷及生長停滯，出現(xiàn)炎癥和疼痛[20]；基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metallo protease，MMP)、Ⅰ型血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs，ADAMTS)等蛋白酶的表達(dá)會(huì)引起細(xì)胞外基質(zhì)降解以及軟骨損失[21]；而生長因子如轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)、人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(insulin-like growth factor-binding protein，IGFBP)等則可促進(jìn)骨生長，或?qū)е鹿琴樀男纬蒣4]。

2 microRNA在骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老中的調(diào)控

microRNA是一種長約22nt的雙鏈RNA分子，通過與靶mRNA內(nèi)的特定序列結(jié)合，進(jìn)而調(diào)控轉(zhuǎn)錄后的基因表達(dá)水平，在軟骨細(xì)胞發(fā)育和軟骨內(nèi)穩(wěn)態(tài)中起到了關(guān)鍵作用。研究證明，許多microRNA通過影響不同基因以及信號(hào)通路，在軟骨細(xì)胞的凋亡、自噬和衰老中發(fā)揮作用。軟骨細(xì)胞中任何microRNA的缺失均會(huì)導(dǎo)致骨骼發(fā)育缺陷，而某些特定microRNA的缺失則會(huì)導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞衰老，從而提高骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率[22]。因此，明確microRNA影響衰老的分子機(jī)制可為骨關(guān)節(jié)炎的診治提供思路。本文總結(jié)了骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老相關(guān)microRNA，并討論了其在骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老相關(guān)病理中的機(jī)制及意義。

2.1 miR-140目前，研究最多的軟骨microRNA為miR-140。研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染miR-140可通過負(fù)調(diào)控磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)/絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase，Akt)通路相關(guān)基因表達(dá)，抑制IL-1β誘導(dǎo)的骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞中的衰老相關(guān)標(biāo)志物SA-βGal、p16INK4a、p21、p53的表達(dá)[23]，減少SASP分泌，抑制IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞衰老和ECM穩(wěn)態(tài)失衡[24]。此外，調(diào)節(jié)Notch通路可能是miR-140調(diào)控骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老的機(jī)制之一。Notch是單程跨膜細(xì)胞表面受體，具有動(dòng)態(tài)調(diào)控SASP的作用，抑制Notch信號(hào)傳導(dǎo)可減少細(xì)胞衰老的相關(guān)特征[25]。而Notch信號(hào)通路中的關(guān)鍵基因如JAG1 、ADAM10和HEY1等，被證實(shí)可作為miR-140的靶點(diǎn)，在細(xì)胞衰老過程中發(fā)揮重要作用[23]。

2.2 miR-34amiR-34a在由人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞提取的衰老細(xì)胞胞外囊泡(extracellular vesicles，EVs)中表達(dá)增多，而清除衰老軟骨細(xì)胞可使EVs中miR-34a下降[26]。轉(zhuǎn)染miR-34a可以通過PI3K/Akt信號(hào)通路，負(fù)調(diào)節(jié)DLL1，激發(fā)軟骨細(xì)胞的死亡和衰老，增加 SA-β-gal 陽性染色的軟骨細(xì)胞，上調(diào)p16基因水平及其下游相關(guān)SASP的表達(dá)，誘導(dǎo)骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生[27]。同時(shí)，miR-34a在控制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞衰老過程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn)，miR-34a通過靶向沉默信息調(diào)節(jié)因子1(silence infor-mation regulator 1，sirtuin 1，SIRT 1)誘導(dǎo)細(xì)胞衰老，而在衰老細(xì)胞或衰老組織中上調(diào)的miR-335、miR-494和miR-34a可抑制參與抗氧化通路的基因，使衰老細(xì)胞更易受氧化應(yīng)激的影響[28]。

2.3 miR-146amiR-146a在早期人骨關(guān)節(jié)炎患者的軟骨中高度表達(dá)，可通過核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB)信號(hào)通路靶向腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6，TRAF6)和IRAK1，減少白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)誘導(dǎo)的MMP-13表達(dá)，影響炎癥、軟骨細(xì)胞自噬、凋亡、衰老以及細(xì)胞外基質(zhì)基因的表達(dá)[29]。研究表明，miR-146a 還可以通過靶向Notch信號(hào)通路，抑制SASP(包括IL-1β、IL-6、TNFα和IL-8)的表達(dá)，并通過直接調(diào)節(jié)IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞的分解代謝作用來調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞炎癥[30]。

2.4 miR-199與miR-193b研究表明，miR-199a-3p與miR-193b的表達(dá)隨年齡的增長而上調(diào)，并通過抑制BMP信號(hào)通路的關(guān)鍵下游介質(zhì)Smad1的表達(dá)，降低軟骨低聚基質(zhì)蛋白(cartilage oligomeric matrix protein，COMP)、Ⅱ型膠原蛋白(collagen-Ⅱ，Col-Ⅱ)I和Sox9等軟骨形成的早期標(biāo)記基因的表達(dá)，延緩軟骨細(xì)胞的衰老[31]。另有最新研究同樣發(fā)現(xiàn)，miR-199的表達(dá)在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過程中發(fā)揮了消極作用，這是由于miR-199可以通過調(diào)控IL-1β與MMP3水平，影響相關(guān)金屬蛋白酶和細(xì)胞因子的表達(dá)水平，加速軟骨細(xì)胞的衰老進(jìn)程[32]。

2.5 miR-495miR-495在人骨關(guān)節(jié)炎軟骨中也有升高。研究表明，miR-495過表達(dá)可直接靶向AKT1/mTOR信號(hào)通路，增加衰老標(biāo)志物 SA-β-gal、p16等的表達(dá)，刺激ECM降解相關(guān)的酶的產(chǎn)生，誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞衰老和凋亡。而下調(diào)體內(nèi)miR-495的表達(dá)則可抑制ADAMTS-5、MMP-1、MMP-13等SASP的產(chǎn)生，并增加Col Ⅱ和聚集蛋白聚糖的表達(dá)[33]。

2.6 miR-204研究顯示，持續(xù)氧化應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致軟骨細(xì)胞內(nèi)DNA損傷逐漸積累，增加miR-204表達(dá)水平，導(dǎo)致軟骨細(xì)胞衰老。同時(shí)，衰老細(xì)胞或衰老組織中上調(diào)的miR-204會(huì)抑制參與抗氧化通路的基因，使衰老細(xì)胞更容易受到氧化應(yīng)激的影響。另有研究證實(shí)，miR-204是控制軟骨細(xì)胞中硫酸化蛋白聚糖(proteoglycan，PG)合成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，抑制miR-204的表達(dá)可恢復(fù)PG合成，抑制軟骨細(xì)胞中炎癥性SASP的表達(dá)，促進(jìn)骨關(guān)節(jié)炎的恢復(fù)[34]。

2.7 miR-24miR-24是細(xì)胞周期抑制劑p16INK4a的負(fù)調(diào)節(jié)劑。Philipot等[35]研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng) IL-1β 處理的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中出現(xiàn)了miR-24和miR-24編碼簇的抑制，使p16INK4a及后續(xù)的SASP(包括MMP1、MMP13)表達(dá)增加，從而將軟骨細(xì)胞推向類似于終末分化軟骨細(xì)胞的衰老樣表型。研究提示，恢復(fù)或維持miR-24編碼簇的表達(dá)水平可作為骨關(guān)節(jié)炎的一種治療方法。

2.8 miR-101癌基因HRAS的過表達(dá)可通過MAPK信號(hào)通路減弱IL-1β誘導(dǎo)的骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡、衰老和ECM降解。而新近研究發(fā)現(xiàn)，miR-101可對(duì)HRAS的表達(dá)起到抑制作用。但通過使用內(nèi)源性競爭RNA(ceRNA)LINC00623與HRAS競爭miR-101結(jié)合，可以減弱miR-101對(duì)HRAS的抑制作用[36]。

3 microRNA與骨關(guān)節(jié)炎的中醫(yī)防治

3.1 骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老的中醫(yī)病機(jī)骨關(guān)節(jié)炎在祖國醫(yī)學(xué)中當(dāng)屬“骨痹”范疇，臨床表現(xiàn)以“關(guān)節(jié)疼痛不用，關(guān)節(jié)拘攣，步履艱難，骨節(jié)沉重，活動(dòng)不利”為主，其主要病機(jī)包括腎氣虧虛與氣滯血瘀，而此內(nèi)外兩因與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)關(guān)于軟骨細(xì)胞的衰老機(jī)制具有相似的內(nèi)涵。

在中醫(yī)理論中，腎為先天之本，內(nèi)藏一身之精氣，主司機(jī)體的生長發(fā)育，并具有“主骨生髓”的生理功能。《醫(yī)精經(jīng)義》中所載：“腎藏精，精生髓，髓生骨，故骨者腎之所主也；髓者，腎精所生，精足則髓足，髓足者則骨強(qiáng)”，說明腎中充足的精氣是骨關(guān)節(jié)維持正常的生長發(fā)育及再生修復(fù)的重要保障。但隨著年齡的逐漸增長，腎中精氣逐漸耗竭，會(huì)出現(xiàn)以腎氣虧虛為主要表現(xiàn)的各種機(jī)體功能的衰退[37]，這種功能的衰退對(duì)應(yīng)了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中衰老的過程。腎氣虛衰，則氣血生成不足，骨關(guān)節(jié)失于濡養(yǎng)，失去正常的再生與自我修復(fù)功能。由此可見，腎氣虧虛后筋骨失于濡養(yǎng)而導(dǎo)致的軟骨再生修復(fù)功能的衰退，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)關(guān)于骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老的復(fù)制性衰老機(jī)制相似。

此外，無論風(fēng)寒、痰濕之邪侵襲關(guān)節(jié)，或勞累過度，亦或外傷，最終都將導(dǎo)致關(guān)節(jié)的脈絡(luò)瘀阻、氣血不通。骨關(guān)節(jié)周圍經(jīng)絡(luò)不通，氣血難以濡養(yǎng)筋骨，筋骨不榮則痛[38]；氣血運(yùn)行不暢還會(huì)使關(guān)節(jié)損傷或衰老后的病理產(chǎn)物難以代謝，積于關(guān)節(jié)，關(guān)節(jié)不通則痛，加速軟骨關(guān)節(jié)的衰老。這也在一定程度上解釋了軟骨細(xì)胞應(yīng)激性衰老的產(chǎn)生機(jī)制。

3.2 中醫(yī)藥防治骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老的microRNA調(diào)控骨關(guān)節(jié)炎軟骨衰老的基本病機(jī)為腎氣虧虛及氣滯血瘀，因此中醫(yī)臨床治療骨關(guān)節(jié)炎以補(bǔ)益肝腎、逐瘀通經(jīng)兩種治則為主。補(bǔ)肝腎以固本，延緩機(jī)體、關(guān)節(jié)的自然衰老；調(diào)氣血以治標(biāo)，改善因外邪、外傷、勞累等各種原因?qū)е碌年P(guān)節(jié)功能衰退?，F(xiàn)有研究表明，中醫(yī)藥在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展中能夠在軟骨細(xì)胞的衰老機(jī)制方面發(fā)揮積極的調(diào)控作用。如鄭允彬等[39]使用具有補(bǔ)益肝腎、活血祛瘀功效的羌?xì)w膝舒丸治療膝骨關(guān)節(jié)炎，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該藥可升高miR-140以及miR-146a的表達(dá)，降低SASP炎性因子IL-6、IL-1β的表達(dá)，緩解骨關(guān)節(jié)炎疼痛、僵硬，改善日常生活能力。王歡等[40]發(fā)現(xiàn)桂枝有效成分桂皮醛在調(diào)節(jié)miR-146a干擾的骨關(guān)節(jié)炎滑膜炎方面同樣具有積極的治療作用。有學(xué)者研究證實(shí)，補(bǔ)腎活血中藥在膝骨關(guān)節(jié)炎的防治中具有較好的療效，其機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞內(nèi)miR-140及其下游相關(guān)靶基因的表達(dá)，減少衰老相關(guān)標(biāo)志物的生成，緩解軟骨關(guān)節(jié)的炎癥[41]。吳廣文等[42]使用獨(dú)活寄生湯灌胃3個(gè)月，觀察膝骨性關(guān)節(jié)炎大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨組織。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相較于模型組，獨(dú)活寄生湯灌胃后的大鼠軟骨組織中miR-146a表達(dá)上升，miR-155表達(dá)下降，下游相關(guān)靶基因 NF-κB p65以及p38MAPK表達(dá)顯著下降，使得組織一氧化氮合酶、環(huán)氧合酶2、MMP3和MMP13檢測值降低，提示獨(dú)活寄生湯可通過調(diào)控miR-146a和miR-155的表達(dá)水平，影響其下游NF-κB/p38MAPK信號(hào)通路，抑制軟骨細(xì)胞衰老及炎癥的發(fā)生，發(fā)揮治療作用。

除了中藥治療，針灸對(duì)于骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞衰老同樣具有較好的治療作用。陳后煌[43]以電針進(jìn)行干預(yù)，觀察其對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)電針干預(yù)可以明顯改善膝骨性關(guān)節(jié)炎大鼠軟骨的形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷及炎癥狀態(tài)，調(diào)控miR-34a、miR-146a 及miR-27b的基因表達(dá)水平，抑制細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2信號(hào)通路及其下游因子的激活，促進(jìn)軟骨細(xì)胞Col Ⅱ的合成，延緩骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變。

4 討論與展望

引起軟骨細(xì)胞衰老的主要因素有線粒體功能障礙、機(jī)械載荷過大、復(fù)制衰老、氧化應(yīng)激、DNA損傷等，上述因素會(huì)導(dǎo)致端粒損傷，提高p53、p21、p16等基因的表達(dá)及ROS的生成，繼而引起SASP分泌的增加，導(dǎo)致軟骨細(xì)胞ECM降解的增多，此亦為軟骨細(xì)胞衰老發(fā)病的主要機(jī)制。目前，基于microRNA的調(diào)控軟骨細(xì)胞衰老的相關(guān)研究主要圍繞p53、p21、p16INK4a、SIRT1、Smad1、COLII、Sox9等基因及PI3K/AKT、Notch、NF-κB、AKT1/mTOR等信號(hào)通路展開，多通過調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞SASP分泌及ECM穩(wěn)態(tài)對(duì)軟骨細(xì)胞的衰老發(fā)揮作用。目前，研究重點(diǎn)為明確microRNA在軟骨細(xì)胞衰老中的不同調(diào)控作用，根據(jù)其具體功能恢復(fù)、維持或抑制、下調(diào)其表達(dá)，從軟骨細(xì)胞衰老的角度入手為骨關(guān)節(jié)炎的診治提供思路。

中醫(yī)認(rèn)為，骨關(guān)節(jié)炎的病機(jī)包括腎氣虧虛之內(nèi)因、氣滯血瘀之外因兩方面，這與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的復(fù)制衰老及損傷應(yīng)激機(jī)制具有相似內(nèi)涵。雖然目前中醫(yī)藥干預(yù)骨關(guān)節(jié)炎的研究日漸增多，補(bǔ)益腎氣、活血化瘀類中藥及針灸調(diào)控microRNA及軟骨細(xì)胞衰老的作用機(jī)制也已被證實(shí)，但相關(guān)研究仍有待深入、系統(tǒng)地開展，推拿、針灸等中醫(yī)外治法研究也需進(jìn)一步加強(qiáng)。

在世界范圍內(nèi)，骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率仍在逐年上升。軟骨細(xì)胞衰老作為骨關(guān)節(jié)炎的重要發(fā)病機(jī)制，已經(jīng)成為當(dāng)前臨床及科研的研究熱點(diǎn)。microRNA作為一種新的基因表達(dá)調(diào)控分子，在調(diào)控軟骨細(xì)胞衰老方面發(fā)揮著重要作用，深入了解microRNA的調(diào)控機(jī)制對(duì)于骨關(guān)節(jié)炎的防治至關(guān)重要，但目前對(duì)其分子機(jī)制尚未完全闡明，microRNA和軟骨細(xì)胞衰老之間的具體關(guān)系亦有待明確，且中醫(yī)藥干預(yù)的研究方法、研究手段存在局限性。

今后，中醫(yī)藥調(diào)控microRNA相關(guān)研究可圍繞骨關(guān)節(jié)炎的內(nèi)外病機(jī)展開，從分子生物學(xué)角度研究中醫(yī)補(bǔ)益腎氣、行氣活血的現(xiàn)代科學(xué)機(jī)制，闡釋中醫(yī)藥防治骨關(guān)節(jié)炎的潛在機(jī)制，為臨床治療提供新的思路。