陶 群

（建湖縣上岡鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，江蘇 鹽城 224700）

1 病原生物學(xué)特性

1.1 病原分類

犬細(xì)小病毒疾病病原屬于細(xì)小病毒科，細(xì)小病毒屬，與貓的泛白細(xì)胞減少癥疾病病原同屬細(xì)小病毒亞群。

1.2 病原生物學(xué)特征

CPV為負(fù)鏈單股的DNA病毒，無囊膜，病毒粒子呈二十面體立體對稱，直徑18～26nm，基因組全長5323bp，有三種衣殼蛋白：VP1、VP2、VP3?；蚪M包含兩個(gè)開放式閱讀框（ORFs），分別編碼非結(jié)構(gòu)蛋白NS1、NS2和結(jié)構(gòu)蛋白VP1、VP2。VP3蛋白存在于成熟的CPV病毒中，是VP2的裂解物，它只出現(xiàn)于衣殼裝配后和包裝后的基因組中。

1.3 犬細(xì)小病毒的理化性質(zhì)及培養(yǎng)特性

CPV主要在有絲分裂旺盛的細(xì)胞中繁殖，如老齡動(dòng)物的淋巴系統(tǒng)和幼齡動(dòng)物的許多組織。它能在犬貓腸肺腎的原代和傳代細(xì)胞中很好地增長，也能在貂肺、牛睪丸等細(xì)胞中增殖。37℃下培養(yǎng)3～4d即可出現(xiàn)細(xì)胞拉長、破碎、脫落等病變，傳代細(xì)胞同步接毒或是在有40%～50%細(xì)胞貼壁時(shí)接毒是提高CPV分離率和病毒滴度的傳統(tǒng)方法。

2 犬細(xì)小病毒的流行病學(xué)特征

2.1 犬細(xì)小病毒的宿主范圍及傳播途徑

高度接觸性是CPV的主要特征，犬科、貓科動(dòng)物不分年齡都可以感染。患病犬及治療好后的攜帶細(xì)小病毒犬是健康犬感染的主要傳染源，通過排糞、排尿、口水向外排毒，易感染的犬則通過間接接觸或直接而感染。

2.2 犬細(xì)小病毒的致病機(jī)理

感染是由病毒的入侵所致，最小感染劑量未知，但似乎非常小，甚至小至100個(gè)TCID50/g。病毒入侵后在感染的頭兩天，病毒在口咽部復(fù)制，通過血流轉(zhuǎn)播到其他器官，3～5d后出現(xiàn)病毒血癥，雖然腸道病變嚴(yán)重，但其感染是全身性的，病毒通過血流感染而不是通過腸腔進(jìn)入腸黏膜。

對于病毒入侵細(xì)胞的機(jī)制，有研究顯示，健康犬經(jīng)消化道感染病毒后，病毒主要攻擊兩種細(xì)胞，一種是腸上皮細(xì)胞，一種是心肌細(xì)胞，分別表現(xiàn)胃腸道癥狀和心肌炎癥狀，心肌炎以幼犬多見。

3 犬細(xì)小病毒病的臨床特征

3.1 犬細(xì)小胞病毒病的常見臨床癥狀

犬細(xì)小病毒病在臨床癥狀上體現(xiàn)兩種發(fā)病型：急性出血性腸炎型和心肌炎類型。

心肌炎型：心肌炎型細(xì)小一般發(fā)生在大約40d的幼犬身上，而最初的疾病一般沒有明顯的癥狀，看上去很健康，一旦發(fā)作，就會由于心臟功能不全、心力衰竭、呼吸困難而死亡，從發(fā)病到死亡的時(shí)間很短，有時(shí)甚至來不及搶救。然而，一些犬只會出現(xiàn)輕度腹瀉的早期癥狀，如果及時(shí)治療，也許能挽救生命。

腸炎型癥狀：腸炎細(xì)小病毒可在犬體內(nèi)潛伏7～14d，然后犬的體溫會立即上升至39.5～40.5℃，出現(xiàn)情緒低落、拒食、嘔吐、腹瀉等癥狀。在疾病的早期階段，嘔吐物是剛剛被吞進(jìn)肚子的食物，然后隨著病情的嚴(yán)重，嘔出黃綠色的黏液，有時(shí)還伴有血。此外，在疾病開始時(shí)，狗的排泄物呈淺黃色，隨著疾病的發(fā)展，糞便變成褐色或番茄色，排便次數(shù)明顯增加，糞便也帶有一種特殊的臭味。一般來說，根據(jù)嘔吐物和番茄顏色的血便，狗可以被診斷為細(xì)小疾病。如果你繼續(xù)讓狗狗腹瀉，狗狗會嚴(yán)重脫水，眼球塌陷，皮膚失去彈性，體重下降，導(dǎo)致休克、昏迷和死亡。小狗患有腸炎型細(xì)小病，如急性發(fā)作，在1～2d內(nèi)死亡；如慢性發(fā)作，發(fā)病過程可長達(dá)1周。

3.2 犬細(xì)小病毒病的剖檢病理變化

犬細(xì)小病毒病的病理變化：出血性腸炎病犬的剖檢病變是十二指腸和空腸充血、水腫，漿膜出血，腸腔內(nèi)還有紅色的水樣物，回腸也有類似的變化。淋巴結(jié)和胸腺充血、出血。組織學(xué)檢查時(shí)可見小腸黏膜上皮壞死和脫落，絨毛萎縮，隱窩萎陷或擴(kuò)張，或數(shù)減少。腸管與膀胱上皮細(xì)胞內(nèi)有核內(nèi)包涵體；心肌炎病犬的剖檢病變?yōu)榉螄?yán)重水腫，漿膜出血，心肌和心內(nèi)膜有非化 膿性壞死灶，心肌纖維彈力降低、水腫，并伴有出血斑紋，心肌病變細(xì)胞內(nèi) 有核內(nèi)包涵體。診斷：根據(jù)本病的臨床癥狀、流行特點(diǎn)和病理變化，可作出初步診斷。但對初發(fā)病例必須進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，其中包括病毒分離鑒定，血凝和血凝抑 制試驗(yàn)（此法是近年來在臨床上常用的特異、簡便的診斷方法）、熒光抗體試驗(yàn)等。在診斷時(shí)應(yīng)與犬瘟熱、犬傳染性肝炎、犬冠狀病毒病、犬輪狀病毒病加 以鑒別。

4 犬細(xì)小病毒病的診斷

4.1 犬細(xì)小病毒病的臨床綜合診斷要點(diǎn)

4.1.1 根據(jù)流行特點(diǎn)

本病雖然全年各時(shí)期均可發(fā)生，但多出現(xiàn)于溫度變化較大的時(shí)期。滿月斷奶的小犬一般體現(xiàn)為心肌炎為主要病癥，而其他時(shí)期犬多以腸炎為主要臨床癥狀癥。本病潛伏期為7～14d，病程4～7d或更長。該病全年都有發(fā)生，但2～4月份及即將入冬時(shí)期較多發(fā)，心肌炎型主要以3～4周齡的幼犬為主。飼養(yǎng)管理?xiàng)l件驟變或惡劣，長途運(yùn)輸，季節(jié)變換，溫度突變等都可增加該病的發(fā)病率和病死率，惡化病情，加劇癥狀。

4.1.2 根據(jù)臨床癥狀

對于腸炎型的病犬，一般先嘔吐后腹瀉，糞便惡臭呈黃色或醬油色，內(nèi)涵多量黏液及腸脫落物，病后2～3d糞便中出現(xiàn)血液，體溫由最初的升高降至正常，病犬呈脫水狀，精神萎靡，食欲廢絕。

而對于心肌炎型的病犬，多出現(xiàn)呼吸困難的癥狀，心悸亢進(jìn)，并伴有呻吟，可視黏膜蒼白，體質(zhì)衰竭。

4.1.3 根據(jù)病理剖檢變化

犬細(xì)小病毒病的病理變化：出血性腸炎病犬的剖檢病變是十二指腸和空腸充血、水腫，漿膜出血，腸腔內(nèi)還有紅色的水樣物，回腸也有類似的變化。淋巴結(jié)和胸腺充血、出血。組織學(xué)檢查時(shí)可見小腸黏膜上皮壞死和脫落，絨毛萎縮，隱窩萎陷或擴(kuò)張，或數(shù)減少。腸管與膀胱上皮細(xì)胞內(nèi)有核內(nèi)包涵體；心肌炎病犬的剖檢病變?yōu)榉螄?yán)重水腫，漿膜出血，心肌和心內(nèi)膜有非化 膿性壞死灶，心肌纖維彈力降低、水腫，并伴有出血斑紋，心肌病變細(xì)胞內(nèi) 有核內(nèi)包涵體。診斷：根據(jù)本病的臨床癥狀、流行特點(diǎn)和病理變化，可作出初步診斷。但對初發(fā)病例必須進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，其中包括病毒分離鑒定，血凝和血凝抑 制試驗(yàn)（此法是近年來在臨床上常用的特異、簡便的診斷方法）、熒光抗體試驗(yàn)等。在診斷時(shí)應(yīng)與犬瘟熱、犬傳染性肝炎、犬冠狀病毒病、犬輪狀病毒病加 以鑒別。

4.2 犬細(xì)小病毒病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法

臨床診斷：根據(jù)發(fā)病動(dòng)物的臨床癥狀并結(jié)合細(xì)小病毒病的流行特點(diǎn)，病犬同時(shí)具有細(xì)小病毒病典型病癥三種或三種以上可初步判定為細(xì)小病毒病。

血液常規(guī)檢測：采集病犬靜脈血液，經(jīng)預(yù)處理后，應(yīng)用血細(xì)胞分析儀對血樣進(jìn)行檢測，分析整理所得數(shù)據(jù)。

用上述臨床診斷方法，僅可對該病作出初步診斷，若要確診，需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，目前主要的方法如下：

4.2.1 血常規(guī)檢查

血液常規(guī)檢查血液中紅、白細(xì)胞數(shù)量，及糞便中潛血檢查，可以作為本病診斷的參考。

4.2.2 PCR檢測

最新研究成果顯示：建立可檢測CPV病原的巢式PCR診斷技術(shù)，可不與犬流感病毒、狂犬病病毒。犬瘟熱病毒、犬腺病毒發(fā)生交叉反應(yīng)，能檢測到10-9的CPV總RNA量，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)定性好的特性，但需要昂貴的儀器和試劑，操作煩瑣，檢測成本高，臨床應(yīng)用較少。

4.2.3 ELISA抗體試劑盒檢測方法

ELISA方法有操作簡便、快速、靈敏，可以同時(shí)檢測大批量樣品等特點(diǎn)，且不需要太昂貴的試驗(yàn)設(shè)備，故此法為該病大規(guī)模普查的首選方法。

4.2.4 采用CPV試劑盒快速診斷

該方法為實(shí)踐中簡單快捷的常用的確診方法，大致操作如下：用棉簽沾濕后在病犬糞便或肛門中取樣，將棉簽浸入裝有樣品的試管中，充分混勻后，用一次性滴管取上清液，滴到CPV檢測板上，5min后若在對照區(qū)和檢測區(qū)均出現(xiàn)紅色帶，則結(jié)果為陽性；若僅在對照區(qū)有紅線，則結(jié)果為陰性。目前該法技術(shù)成熟，成本適中，被動(dòng)物醫(yī)院甚至許多養(yǎng)犬者廣泛使用。本疫控中心對該病診斷即選用此方法。

4.3 犬細(xì)小病毒病的臨床治療

本病的治療原則是以支持療法配合特異性治療為主，并以對癥治療和控制繼發(fā)感染為輔。

4.3.1 支持療法

病犬禁食，每天至少輸液1次，必要時(shí)每天2次，連用5～7d。以能量合劑補(bǔ)充病犬維持生命所需能量；輸鉀以治療病犬因多日不食引起的鉀失衡；靜滴碳酸氫鈉以緩解后期因長期未進(jìn)食引起的酸堿平衡紊亂，防止酸中毒。

4.3.2 特異性治療

應(yīng)用犬細(xì)小病毒高免血清或細(xì)小病毒單克隆抗體，1ml/kg，肌肉注射，1次/d，連用3～5d。也可二者聯(lián)合應(yīng)用。

以上結(jié)果顯示聯(lián)合應(yīng)用高免血清和單克隆抗體；治療效果最佳，而不應(yīng)用特異性治療的病犬病死率極高。

4.3.3 對癥治療

對于頑固性嘔吐的病犬，肌注愛茂爾、阿托品；應(yīng)用磺胺脒2g、藥用炭2g、安普霉素1g、云南白藥2g、止血敏2g深部灌腸以止瀉。VK1、VK2用于止血。

4.3.4 控制繼發(fā)感染

氨芐青霉素50mg/kg與丁胺卡那霉素10mg/kg聯(lián)用療效確切。

4.3.5 犬細(xì)小病毒病的免疫

CPV最低抗體保護(hù)值為1：80。使用的免疫程序如下：對于1周歲以下的犬，應(yīng)用犬瘟熱、犬細(xì)小病毒二聯(lián)疫苗或犬瘟熱、細(xì)小病毒、傳染性肝炎、副流感四聯(lián)疫苗，剛斷奶后首免，間隔2～3周免疫1次，再間隔2～3周再免疫1次，以后每年免疫兩次。對于1周齡以上的犬，用上述疫苗每年免疫兩次，間隔2～3周。

5 結(jié)論

（1）雖然目前CPV的高免血清和單克隆抗體已經(jīng)非常普及，但就治愈率來講，如果病犬小于1周歲，并且沒有特別及時(shí)地送往專業(yè)醫(yī)院治療，即使聯(lián)合應(yīng)用血清及單克隆抗體，治療效果也不容樂觀。除此之外，心肌炎型的病犬多呈急性經(jīng)過，而且應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)烈，故診斷和難度往往大于腸炎型病犬。

（2）1歲以上的犬，患細(xì)小病毒病的概率最低，而5周齡以上1歲以下的幼犬發(fā)病率最高，這也就驗(yàn)證了綜述部分的對于不同年齡的犬發(fā)病率不同的理論。5周齡以內(nèi)的幼犬發(fā)病率明顯低于5周齡以上1歲以下的幼犬的原因應(yīng)符合上面論述過的理論，即斷奶前的幼犬，可以通過哺乳，獲得母源抗體，從而降低了該病的發(fā)病率，而哺乳停止，母源抗體消失，自身免疫機(jī)制還未建立的幼犬是該病主要的感染對象。

（3）對于CPV主要的感染對象往往是純種犬的問題，目前還沒有相關(guān)研究結(jié)果可以解釋。筆者認(rèn)為，人們飼養(yǎng)的純種犬通常必須從狗市或者寵物商店才能購得，而這些商人的意識及道德缺失，應(yīng)該是造成純種犬患細(xì)小病毒病概率高的原因之一。

（4）由于患病犬的就診時(shí)間不同，導(dǎo)致在開始檢測時(shí)病犬處于不同的病程及感染狀態(tài)，故各受檢樣品間數(shù)據(jù)差異很大。另外，犬細(xì)小病毒病程中白細(xì)胞數(shù)量整體呈下降趨勢，其途中升高者，是由于繼發(fā)細(xì)菌感染，激活機(jī)體免疫系統(tǒng)所致。

（5）臨床實(shí)踐證明，應(yīng)用在治療部分提及的中藥配方，配以西藥特異性療法并適當(dāng)支持治療，可提高該病的治愈率。方中：大黃、黃連、黃柏、黃芩有殺菌抗病毒、清熱化濕，澀腸止痢等功效，并能提高機(jī)體免疫力，地榆、田三七、烏賊骨、白芨、生蒲黃等對消化道均有止血作用；白頭翁則能清熱燥濕、涼血止痢、吸收消化道毒物，減輕腸道負(fù)擔(dān)；甘草則調(diào)和諸藥。西藥特異性治療，輔以中藥調(diào)節(jié)機(jī)體平衡，增強(qiáng)自身免疫力，這種方法有望在臨床實(shí)踐中得以普及。

（6）犬細(xì)小病毒病的發(fā)病初期，往往僅表現(xiàn)出精神不振，食欲降低或廢絕，體溫升高，很難與其他疾病如感冒，犬瘟熱等病相區(qū)分，因此很多畜主從經(jīng)濟(jì)方面考慮而放棄進(jìn)行CPV試劑盒診斷，從而貽誤了最佳治療時(shí)機(jī)。而細(xì)小病毒病的治療時(shí)機(jī)最為關(guān)鍵，一旦錯(cuò)過，則治療難度增大數(shù)倍。這是造成該病治愈率不高的主要原因。

由于筆者臨床有限，接診病例的數(shù)量有限，所得數(shù)據(jù)不能非常精確地揭示客觀規(guī)律，但通過對這有限的數(shù)據(jù)加以統(tǒng)計(jì)分析，所得的結(jié)論對獸醫(yī)工作者在細(xì)小病毒病方面的臨床工作也有一定的借鑒意義。