葛 芳，趙洪昌，林淑娜

(煙臺市海港醫(yī)院，山東 煙臺 264000)

急性髓系白血病(AML)是起源于髓系祖細胞的一類造血系統(tǒng)惡性克隆性疾病，在骨髓等造血組織中白血病細胞大量增殖，使正常造血受抑制，是血液系統(tǒng)惡性腫瘤最常見的類型[1-2]。AML分子機制涉及基因組和表觀遺傳學多個層面的改變。有研究報道，基因的異常表達及表觀遺傳學的改變與AML 發(fā)生、發(fā)展、預后及藥物的療效有關[3-6]。

SLC39A 基因家族又稱鋅離子轉運基因家族，包含14個成員，SLC39A蛋白家族的異常表達導致細胞鋅離子代謝紊亂，并與胰腺癌、乳腺癌和肺癌等癌癥有關[7-10]。SLC39A1是SLC39A 基因家族成員之一，其編碼跨膜轉運蛋白。SLC39A1蛋白的亞細胞定位主要分布在細胞器和細胞膜中，其亞細胞定位受到鋅離子的調控，對維持細胞內鋅離子穩(wěn)態(tài)起著重要作用[11]。SLC39A1 在哺乳動物的組織和細胞中廣泛表達，但其具體作用尚不清楚。本研究擬探討AML患者SLC39A1表達的臨床意義，為AML的診斷、治療提供理論基礎和指導意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 應用GEO數(shù)據(jù)庫(GSE30029)分析90例AML患者和31例健康對照者骨髓細胞SLC39A1基因的表達水平；應用TCGA(The Cancer Genome Atlas)數(shù)據(jù)庫中172例含隨訪信息的AML病歷資料，分析SLC39A1基因表達對預后的影響。

1.2統(tǒng)計學處理 利用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計學分析。不同組間連續(xù)變量資料之間的差異采用Kruskal-Wallis檢測(多組)和Mann-WhitneyU檢測(2組)進行比較。不同組間分類變量資料差異采用Pearsonsχ2檢驗及Fisher精確檢驗法進行比較。受試者工作特征曲線(ROC)及曲線下面積(AUC)用于目的基因對疾病診斷意義的評價。Kaplan-Meier生存分析及Cox回歸分析用于評價目的基因對患者預后的影響。采用Spearman秩相關進行相關性分析。所有分析設定P值為雙側分布，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1SLC39A1在AML患者中的表達水平 健康對照者SLC39A1的中位表達水平為455.1(206.0～675.0)，AML患者SLC39A1的中位表達水平為585.5(381.2～1 567.0)，SLC39A1在AML患者中表達上調，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)，見圖1。

2.2AML患者SLC39A1表達的ROC曲線 SLC39A1表達水平輔助診斷AML的AUC=0.792[95%可信區(qū)間(95%CI)為0.708～0.894，P<0.001]，見圖2。當截斷值為560.7時，診斷AML的敏感度和特異度分別為60.0%和90.3%，具有較準確的臨床診斷價值。

2.3SLC39A1表達與AML患者臨床參數(shù)的相關性 應用TCGA數(shù)據(jù)庫，以中位數(shù)831.2為截斷值，將AML分為SLC39A1高表達組和SLC39A1低表達組，分別比較SLC39A1高、低表達組AML患者的臨床參數(shù)。SLC39A1高、低表達組在性別、骨髓原始細胞、外周血原始細胞、核型分組方面比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。然而，SLC39A1高表達組年齡和白細胞數(shù)量顯著高于低表達組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。SLC39A1高表達組FAB分型中M4和M5組比率高于低表達組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。見表1。

表1 SLC39A1高、低表達AML患者臨床參數(shù)比較(TCGA)

續(xù)表1 SLC39A1高、低表達AML患者臨床參數(shù)比較(TCGA)

2.4SLC39A1表達與預后的關系 SLC39A1高表達組和SLC39A1低表達組的中位生存時間分別為11.8、22.6個月。進一步的Kaplan-Meier生存分析結果顯示，SLC39A1高表達組患者的總體生存期(OS)顯著短于SLC39A1低表達組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見圖2。隨后，應用Cox單、多因素分析以探索SLC39A1高表達是否為影響患者預后的獨立因素，SLC39A1高表達在所有AML患者中趨近于為影響患者預后不良的獨立因素(P<0.05)，見表2。

表2 AML患者總體生存的單、多因素分析因素(TCGA)

3 討 論

AML是骨髓原始細胞惡性克隆性疾病，是成人最常見的白血病。AML的治療以高劑量化療為主，目前靶向及免疫治療白血病取得一定進展，但是療效仍不理想。因此，尋找能夠改善其預后的生物標志物具有重要意義。

SLC39家族成員主要定位于細胞膜，其功能是攝取鋅，將鋅轉運至細胞質中。SLC39A1作為SLC39A家族成員之一，與其他成員共同通過攝取、儲存和排泄在內的復雜機制來維持體內鋅離子的平衡[11]。SLC39A1表達廣泛，而其他ZIP轉運蛋白，如SLC39A2和SLC39A3表現(xiàn)出更多的組織限制性表達。有研究發(fā)現(xiàn)，miR-133可以直接靶向結合SLC39A1的3′-UTR，miR-133-SLC39A1軸可能在人骨髓間充質干細胞的成骨分化中發(fā)揮重要作用[12]。

近年來研究表明，SLC39家族與癌癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關。SLC39A1在腫瘤中的作用及其機制也獲得研究者的關注。有研究報道，SLC39A1在前列腺癌中低表達，發(fā)揮抑癌基因的作用[13]。而SLC39A1表達下調的潛在機制與轉錄因子AP-2α的沉默和Ras反應元件結合蛋白-1(RREB-1)的過度表達有關[14-15]。ZHANG等[16]報道SLC39A1表達降低與肝癌預后不良相關。也有研究發(fā)現(xiàn)，SLC39A1通過促進膠質瘤細胞增殖，抑制其凋亡，并促進基質金屬蛋白2(MMP2)/MMP9的表達和影響免疫細胞向神經膠質瘤微環(huán)境的滲透，導致SLC39A1 高表達患者預后不良[17]。由此可見，SLC39A1在腫瘤中的功能和預后作用尚不明確。

本研究基于GEO和TCGA數(shù)據(jù)庫AML患者中的表達譜測序和臨床資料，初步分析SLC39A1在AML患者中的表達水平及其對預后的影響。結果發(fā)現(xiàn)，SLC39A1高表達是AML患者中常見的分子事件，SLC39A1高表達與AML患者預后不良相關，并可用于AML疾病進展的監(jiān)測。