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        吉林烏頭和龍船烏泡合劑對正常大鼠的痛覺調(diào)節(jié)作用

        2022-11-11 13:03:14王雪純付立波彭佳琪李佳林朱妮娜
        長春師范大學(xué)學(xué)報 2022年10期
        關(guān)鍵詞:實驗

        王雪純,付立波,呂 航,彭佳琪,李佳林,朱妮娜

        (長春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,吉林 長春 130032)

        根據(jù)國際疼痛學(xué)會(IASP)的定義,疼痛是一種由于實際的或是潛在的組織損傷導(dǎo)致的不好的感覺和情緒情感體驗,或者是與此類似的經(jīng)歷[1]。目前一般通過藥物來達(dá)到鎮(zhèn)痛效果,阿片類藥物的作用效果強(qiáng),但具有許多不良反應(yīng),有極強(qiáng)的成癮性,可能會對機(jī)體造成不可逆的傷害[2],因此尋找無依賴性的鎮(zhèn)痛藥物迫在眉睫。而中草藥的鎮(zhèn)痛作用歷史悠長,許多中藥材能起到一定的鎮(zhèn)痛作用且副作用較小。

        龍船烏泡又稱過江龍,具有舒筋活絡(luò),治療跌打損傷及筋骨疼痛的功效[3];吉林烏頭同樣具有散寒止痛,祛風(fēng)除濕的功效,在民間常用來治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牙痛、神經(jīng)痛、心腹冷痛等癥[4]。研究表明,吉林烏頭主要成分有生物堿類、黃酮類、多糖等[5]。但至今尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)于吉林烏頭和龍船烏泡對痛覺調(diào)節(jié)的研究。因此本實驗采用灌胃及行為學(xué)測痛等方法,探討吉林烏頭和龍船烏泡對痛覺的作用,以期能對臨床鎮(zhèn)痛藥物的開發(fā)提供理論依據(jù)。

        1 材料

        1.1 實驗動物與藥品

        使用雄性Wistar大鼠6只,長春億斯實驗動物技術(shù)有限公司提供。購買后6只大鼠單獨喂養(yǎng),保證大鼠自由進(jìn)水進(jìn)食,室內(nèi)溫度保持適宜和穩(wěn)定,維持實驗室的安靜,確保實驗大鼠穩(wěn)定的生活條件。

        吉林烏頭,龍船烏泡購買于恩春堂大藥店;生理鹽水產(chǎn)自遼寧明康制藥有限公司。

        1.2 實驗儀器

        主要實驗儀器有灌胃針(深圳瑞沃德公司),YLS-6B智能熱板儀(上海曼普生物公司);YLS-3E電子壓痛儀(意大利UGO)。

        2 方法

        2.1 水煮液母液及不同質(zhì)量濃度溶液的制備

        稱取龍船烏泡和吉林烏頭各10 g,分別放在陶瓷缸中,先將吉林烏頭煎15 min,然后將吉林烏頭和龍船烏泡分別熬煮3次,取水煮液的母液,再用母液分別配制成5、10、20 mg/mL的合劑。

        2.2 行為痛覺測試

        行為痛覺測試包括熱板測試和壓板測試。在實驗之前對正常雄性大鼠進(jìn)行一周的熱板和壓板測試訓(xùn)練,6只正常雄性大鼠都進(jìn)行相同訓(xùn)練,每天3 輪,每輪5 次,以此減少大鼠的應(yīng)激性和實驗誤差。經(jīng)過7天訓(xùn)練后,第8天注射生理鹽水作為對照,之后用不同質(zhì)量濃度的混合液進(jìn)行灌胃。在每次灌胃之前需要先測3次基礎(chǔ)HWL,作為基礎(chǔ)值。灌胃之后在第5、10、15、20、30、45、60 min進(jìn)行行為學(xué)測痛。

        2.3 數(shù)據(jù)處理

        收集整理數(shù)據(jù),用實驗前測得的3次HWL值的平均值作為基礎(chǔ)值,實驗中測得的結(jié)果與其比較,計算HWL的變化百分比。實驗數(shù)據(jù)以“均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差”(x±s)的形式表示,用SPSS 22.0軟件分析數(shù)據(jù),采用單因素方差分析方法進(jìn)行組間比較和分析。

        3 實驗結(jié)果

        生理鹽水與不同質(zhì)量濃度(5、10、20 mg/mL)合劑灌胃后大鼠 HWL的變化百分比見表 1、表 2和表3。

        表1 灌胃5 mg/mL合劑大鼠的HWL的影響

        由表1可知,與生理鹽水(對照組)相比,5 mg/mL合劑灌胃大鼠的左爪熱刺激HWL具有顯著差異(P<0.05),右爪熱刺激及機(jī)械刺激HWL無差異(P>0.05);大鼠右爪機(jī)械刺激HWL顯著差異(P<0.05)。

        表2 灌胃10 mg/mL合劑大鼠的HWL的影響

        由表2可知,與生理鹽水(對照組)相比,10 mg/mL合劑灌胃大鼠的左爪熱刺激HWL具有顯著差異(P<0.05),右爪熱刺激HWL具有極顯著差異(P<0.01);大鼠左爪機(jī)械刺激HWL具有極顯著差異(P<0.01),右爪機(jī)械刺激HWL具有顯著差異(P<0.05)。

        表3 灌胃20 mg/mL合劑對大鼠HWL的影響

        由表3可知,與生理鹽水(對照組)相比,20 mg/mL合劑灌胃大鼠左爪熱刺激HWL具有顯著差異(P<0.05),右爪熱刺激HWL具有極顯著差異(P<0.01);大鼠左爪和右爪機(jī)械刺激HWL均具有顯著差異(P<0.05)。

        4 討論

        本實驗結(jié)果表明,與灌生理鹽水相比,吉林烏頭和龍船烏泡混合水煮液灌胃后,大鼠HWL明顯增加,因此合劑對大鼠確實起到了鎮(zhèn)痛作用,且鎮(zhèn)痛效果在15 min左右最為明顯,具有時間上的規(guī)律性。本實驗還發(fā)現(xiàn),對大鼠灌胃5、10、20 mg/mL 混合水煮液的作用效果不同,大鼠 HWL 也有顯著差異。通過觀察數(shù)據(jù)可以得出,隨著混合水煮液質(zhì)量濃度的逐漸增加,大鼠HWL 也逐漸增加,說明吉林烏頭和龍船烏泡合劑對正常大鼠鎮(zhèn)痛作用具有劑量依賴性。

        許多烏頭類中藥材例如川烏以及附子等同樣具有一定程度的鎮(zhèn)痛功能,能夠有效緩解疼痛,陳紹斌[6]用烏頭桂枝散采用熱敷痛點的方法,治療患者坐骨神經(jīng)痛,發(fā)現(xiàn)效果良好。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),烏頭類藥材中的烏頭堿、草烏甲素[7]、粗莖烏頭堿A等生物堿有良好鎮(zhèn)痛作用而且不會具有成癮性[8]。另外有動物實驗[9]表明,烏頭堿和次烏頭堿能夠明顯減少足腫脹大鼠模型的抽搐次數(shù)而且能減輕疼痛,其鎮(zhèn)痛機(jī)制與中樞神經(jīng)細(xì)胞膜Na+通道開放密切相關(guān)??赡苡捎诩譃躅^含有烏頭堿等多種生物堿,能對正常大鼠起到一定的鎮(zhèn)痛作用。中藥復(fù)方還可以通過調(diào)控5-羥色胺(5-HT)含量及其受體的表達(dá)等多種途徑發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用[10]。而龍船烏泡的相關(guān)研究較少,與鎮(zhèn)痛作用相關(guān)的有效成分及鎮(zhèn)痛調(diào)控途徑仍需進(jìn)一步探究。本實驗表明吉林烏頭和龍船烏泡合劑具有一定的鎮(zhèn)痛作用,對鎮(zhèn)痛藥物的開發(fā)和研究提供初步理論基礎(chǔ)。

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