吳良

（江西省景德鎮(zhèn)第三人民醫(yī)院檢驗科，江西 景德鎮(zhèn) 333000）

2型糖尿?。╠iabetes mellitus type 2，T2DM）患病率逐年升高，持續(xù)處于高血糖環(huán)境將引起微小血管病變，損傷機體腎功能，不利于疾病預(yù)后[1]。因此，對T2DM患者腎功能進行早期篩查、早期干預(yù)，延緩腎損傷具有重要意義。腎臟損傷分子1（kidney injury molecule 1，KIM-1）、α1-微球蛋白（α1-microglobulin，α1-MG）、尿中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL）及血清胱抑素C（cystatin C，CysC）是目前臨床應(yīng)用較廣的早期腎損傷的指標[2]。其中KIM-1屬于跨膜蛋白，在正常腎組織中不表達；α1-MG是腎近曲小管的標志性蛋白，當腎小管上皮細胞結(jié)構(gòu)損傷時，α1-MG水平升高；CysC可經(jīng)腎小球濾過，當腎小球濾過率受限時，CysC水平升高；NGAL是脂質(zhì)運載蛋白，當腎小管上皮細胞受到刺激，NGAL水平升高。但上述指標單一檢測僅評估腎小管或腎小球損傷情況，有一定局限性，會出現(xiàn)漏診和誤診情況[3]。基于此，本研究旨在探討多項指標聯(lián)合檢測在診斷T2DM合并早期腎損傷患者的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2020年1月至2021年1月本院收治的51例T2DM患者作為研究對象，根據(jù)24 h尿蛋白排泄率分為單純T2DM組（24 h尿蛋白排泄率＜30 mg/24 h，n=24例）和早期腎損傷組（30 mg/24 h≤尿蛋白排泄率＜300 mg/24 h，n=27），選取同期健康體檢者作為對照組（n=31）。單純T2DM組男10例，女14例；年齡35～62歲，平均（53.26±8.95）歲。早期腎損傷組男12例，女15例；年齡36～65歲，平均（54.54±7.98）歲。對照組男16例，女15例；年齡34～66歲，平均（55.98±7.48）歲。患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書，本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準。

1.2 納入及排除標準納入標準：首次診斷T2DM并經(jīng)臨床確診者[4]；T2DM病史＞5年，尿蛋白陽性者。排除標準：合并糖尿病急性并發(fā)癥者；確診糖尿病前已患腎臟系統(tǒng)疾病者；出現(xiàn)原因不明蛋白尿者；曾使用大劑量糖皮質(zhì)激素者。

1.3 方法抽取3組空腹靜脈血3 ml，置入血清分離管中，靜置60 min，3 000 r/min離心15 min，留取上清液，使用瑞典Mercodia公司試劑盒，采用全自動生化儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，型號：BS-830）以乳膠免疫比濁法檢測CysC、α1-MG水平。收集3組晨尿（清潔中段尿）10 ml，1500 r/min離心5 min，離心半徑10 cm，留取上清液，使用美國雅培公司試劑盒，采用特定蛋白分析儀（西門子公司，型號：BN ProSpec）以免疫散射比濁法檢測KIM-1、NGAL水平。

1.4 觀察指標比較3組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC水平；比較3組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC陽性率，參考范圍：血清CysC：0.6～1.4 mg/L；血清α1-MG：10.2～24.2 mg/L；尿KIM-1：0～9.9 ng/L；尿NGAL：0～45 μg/L，超過正常范圍上限定義為陽性。比較T2DM合并早期腎功能損傷患者單獨及聯(lián)合檢測的特異度和靈敏度，特異度=真陰性例數(shù)/（假陽性+真陰性）例數(shù)×100%，靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽性+假陰性）例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以“±s”表示，比較采用t檢驗，多組比較采用單因素方差分析，計數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC水平比較3組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；早期腎損傷組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC水平均高于單純T2DM組及對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 3組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC水平比較（±s）

表1 3組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC水平比較（±s）

注：KIM-1，腎臟損傷分子1；NGAL，中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白；CysC，胱抑素C；α1-MG，α1-微球蛋白。與早期腎損傷組比較，aP＜0.05

組別早期腎損傷組單純T2DM組對照組F值P值例數(shù)27 24 31尿KIM-1（ng/L）30.24±2.63 18.24±2.39a 6.78±1.65a 798.999＜0.001尿NGAL（μg/L）42.54±9.25 30.78±7.01a 8.23±0.87a 207.261＜0.001血清CysC（mg/L）4.04±0.36 2.11±0.31a 0.71±0.13a 1040.937＜0.001血清α1-MG（mg/L）22.04±9.36 13.11±2.31a 11.74±1.29a 27.888＜0.001

2.2 3組各項單獨及聯(lián)合檢測陽性率比較早期腎損傷組尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG、血清CysC及聯(lián)合檢測陽性率均高于單純T2DM組、對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 3組各項單獨及聯(lián)合檢測陽性率比較[n（%）]

2.3 單獨與聯(lián)合檢測T2DM合并早期腎功能損傷患者的價值比較尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC聯(lián)合檢測的敏感度、特異度高于各項單獨檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 單獨及聯(lián)合檢測T2DM合并早期腎功能損傷患者的價值比較[%（n/N）]

3 討論

T2DM主要臨床表現(xiàn)為高血糖，持續(xù)的高糖環(huán)境會增加腎小球壓力，導(dǎo)致血管內(nèi)皮受損，造成腎損傷。腎功嚴重受損后，將加速疾病進展。早期腎損傷具有可逆性，無明顯癥狀，較難發(fā)現(xiàn)，進展中的腎損傷可導(dǎo)致血管性腎硬化，逐漸發(fā)展為腎衰竭，故合理診斷是關(guān)鍵。隨著對相關(guān)腎損傷標志物的深入研究，尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC已成為診斷T2DM早期腎損傷的檢測方法。

本研究結(jié)果顯示，早期腎損傷組尿KIM-1、尿NGAL、血清CysC及血清α1-MG陽性率均高于單純T2DM組、對照組（P＜0.05），提示尿KIM-1、尿NGAL、血清CysC及血清α1-MG在T2DM合并早期腎功能損傷中具有一定意義。KIM-1在急性腎損傷中可呈高表達，是近端小管損傷的重要標志物。NGAL是預(yù)測急性腎損傷的特異標志物，作為小分子分泌蛋白，在遠端小管及集合管中產(chǎn)生，可保護腎小管細胞，當機體腎臟損傷時，呈顯著升高趨勢，上升速度快于尿素氮、血清肌酐等傳統(tǒng)指標，且有研究發(fā)現(xiàn)，NGAL對腎臟病變的預(yù)后也具有較高預(yù)測價值[5]。CysC為穩(wěn)定性較強的內(nèi)源性小分子蛋白，可自由通過機體腎小球濾膜，在近曲小管重吸收，當T2DM患者腎功能損傷時，CysC隨著腎小球濾過率降低而升高，由此可判斷機體腎功能。α1-MG是以單體或二聚體形式存在的腎近曲小管的標志性蛋白，主要由淋巴細胞和肝細胞產(chǎn)生，正常情況下單體α1-MG可自由通過腎小球過濾膜，被近曲小管重吸收、分解，長期高血糖環(huán)境可損傷腎小管上皮細胞結(jié)構(gòu)，致重吸收功能發(fā)生障礙，α1-MG則升高。有研究表明，上述指標單獨診斷T2DM合并早期腎損傷存在漏診和誤診情況[6]。

糖尿病患者腎小球、腎小管損傷均會導(dǎo)致糖尿病腎病發(fā)生，多項聯(lián)合檢測已成為當前診斷T2DM合并早期腎功能損傷的主要方式。本研究結(jié)果顯示，尿KIM-1、尿NGAL、血清CysC及血清α1-MG聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度均高于各項單獨檢測（P＜0.05），提示多項聯(lián)合檢測可提高對T2DM合并早期腎功能損傷的診斷價值。因CysC在蛋白質(zhì)分解代謝中具有重要作用，不受肝功能、炎癥等因素影響，能自由通過腎小球過濾膜，由腎單位排出，可反映腎小球輕微損傷[7-8]；KIM-1與凋亡小體的表面特異性表位相結(jié)合，強化巨噬細胞吞噬能力，是選擇性近端小管損傷標記物；NGAL在中性粒細胞中發(fā)現(xiàn)，可誘導(dǎo)抗氧化劑酶的表達，保護活性氧自由基介導(dǎo)的細胞不受損；腎小管受損時，腎小球濾過二聚體α1-MG，導(dǎo)致體內(nèi)α 1-MG水平升高。上述指標聯(lián)合可取長補短，反映腎小球、腎小管損傷情況，提高對T2DM合并早期腎功能損傷的診斷價值，與朱佐芳等[9-10]研究結(jié)果一致。

綜上所述，尿KIM-1、尿NGAL、血清α1-MG及血清CysC檢測T2DM合并早期腎功能損傷中具有重要作用，聯(lián)合檢測可提高診斷價值。