周金蓮

(新疆維吾爾自治區(qū)兒童醫(yī)院/檢驗科 新疆 烏魯木齊 830054)

肺炎克雷伯菌作為一種革蘭陰性菌致病菌，該種菌種的出現會引發(fā)呼吸道遭受到嚴重的感染，同時還會引發(fā)支氣管炎、肺炎等呼吸道感染的產生，一些感染嚴重者還會出現傷口感染、泌尿系統(tǒng)感染及腦膜炎等感染的產生[1]。近年來，在臨床上抗生素被廣泛應用，隨之而來肺炎克雷伯菌的耐藥性也不斷增大。臨床上相關的調查結果顯示，肺炎克雷伯菌的耐藥性的出現與菌株中頭孢菌素酶、超光譜β-內酰胺酶的形成有直接關系[2]。碳青霉烯類的抗生素種類有亞胺培南、美羅培南、厄他培南等，通過對細胞壁青霉素進行抑制，并與蛋白相結合，從而完成了對粘肽合成的有效組織，使細胞壁的完整性遭受到破壞，取得了殺滅細菌及促進細菌溶解的功效[3]。該類藥物的抗菌譜光，對于頭孢菌素酶、超廣譜β-內酰胺酶起到了良好的抵御能力，抗菌活性強，在格蘭陰性多重耐藥菌中展現出了良好的應用效果。耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌屬于肺炎克雷伯菌中的一種不常見的耐藥菌株類型，形成機制為點作用部位青霉素結合蛋白的改變和碳青霉烯酶的形成[4]。近年來，臨床上加大了對耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌的研究，由于兒童的年齡較小，自身的免疫功能發(fā)育尚不成熟，作為一類特殊群體，關于兒童的耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌相關研究文獻并不多。在本次研究中，選取28例2021年8月份至2022年1月份于在醫(yī)院中接受治療的兒童，通過將肺炎克雷伯菌分離出來，菌株數量共126株，對兒童耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌(CRKP)的臨床分布情況及其耐藥性進行觀察。

1 資料與方法

1.1 一般資料

28例在醫(yī)院中接受治療的兒童，就診時間為2021年8月份至2022年1月份，選取送檢各類標本，對同一患兒相同部位先后分離的重復菌株，送檢標本包括氣管抽吸物、痰、尿、肺泡灌洗液、腦脊液、導管尖端、咽拭子、血、引流液等，將肺炎克雷伯菌分離出來，菌株數量共126株，在分離、培養(yǎng)及鑒定菌株的病原菌時，按照常規(guī)方法進行處理。

1.2 菌種鑒定

在鑒定CRKP菌株時使用Vitek 2 Compact全自動微生物檢定儀及其相關配套的Vitck 2。由法國梅里埃公司提供頭孢硝噻吩紙片，由Oxoiod公司提供MH瓊脂培養(yǎng)基、血平板、巧克力平板。質控菌株檢測，由國家衛(wèi)生計生委臨床檢驗中心提供檢測，檢測菌種為肺炎克雷伯菌ATCC700603，大腸埃希菌ATCC25922。

1.3 菌株培養(yǎng)及鑒定

按照《微生物檢驗操作規(guī)程》(第3版)中的要求來培養(yǎng)細菌，運用接種環(huán)在相應的平板培養(yǎng)基上進行接種，孵育需要在35-37℃的孵化箱中進行，將孵育的時間控制在24-28h。在常規(guī)分類培養(yǎng)之后，開展氧化酶及革蘭染色試驗，之后使用全自動細胞鑒定儀及其相關配套設備的鑒定卡，在對CRKP進行鑒定時需要按照相關的說明書進行。

1.4 藥敏試驗

以美國臨床及實驗室標準化協會(2014版)的相關標準作為判讀依據，運用MIC法運用Vitek 2Compact型細胞鑒定儀及其相關配套的GNS藥敏卡，對分離出來的CRKP開展藥敏試驗，之后開展Carba NP實驗。

1.5 觀察指標

(1)觀察CRKP菌株的臨床分布情況，樣本包括尿液、痰液、膿液、血液、引流液、傷口分泌物、咽拭子、其他幾種。(2)觀察CRKP菌株的耐藥率及敏感率。

1.4 統(tǒng)計學處理

SPSS22.0軟件，計數資料用(%)表示，用X2檢驗，差異顯著(P<0.05)。

2 結果

2.1 CRKP菌株的臨床分布

126株CRKP菌株，樣本分布主要集中在痰液、尿液中，占比分別為50.79%和16.67%。樣本分布科室主要集中在新生兒科、ICU科中，占比分別為35.71%、20.63%。

表1 CRKP菌株的臨床分布[n(%)]

2.2 CRKP菌株的耐藥率及敏感率

126株CRKP菌株，CRKP對青霉素類、頭孢類、喹諾酮類的耐藥性>90%，三種抗生素的耐藥性對比無差異(P>0.05)。對氨基糖苷類、四環(huán)素類、磺胺類的耐藥性較低，三種抗生素的耐藥性對比無差異(P>0.05)。青霉素類、頭孢類、喹諾酮類的耐藥性高于氨基糖苷類、四環(huán)素類、磺胺類抗生素的耐藥性，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表2 CRKP菌株的耐藥率及敏感率[n(%)]

3 討論

肺炎克雷伯菌本身作為一種腸桿菌屬，是導致社區(qū)及醫(yī)院感染的主要致病菌。超廣譜β-內酰胺酶的出現，促使β-內酰胺類藥物的耐藥菌株數量不斷增加，從而促使革蘭陰性菌感染疾病的治療難度隨之而提升[5]。在臨床上碳青霉烯類抗生素的使用量呈現出逐年遞增發(fā)展趨勢，對碳青霉烯類抗生素耐藥菌株的選擇性生長起到了促進性作用。臨床上有相關的數據研究顯示，肺炎克雷伯菌對CPKP的耐藥率為1%-20%。隨著CPKP的出現，從而增加了肺炎克雷伯菌的治療難度[6]。

在本次研究中將28例兒童作為研究對象，對其CRKP的臨床分布情況及耐藥性特點進行調查分析，分離出來的CRKP株數為126株。本文研究結果顯示，126株CRKP菌株，樣本分布主要集中在痰液、尿液中，占比分別為50.79%和16.67%。樣本分布科室主要集中在新生兒科、ICU科中，占比分別為35.71%、20.63%。CRKP菌株的來源主要集中在新生兒科中，之所以在新生兒科中有較高的概率，是因為新生兒科中收治的患兒主要為低胎齡的早產兒，由于抗生素使用時間長、住院時間長，加之在疾病治療中需要使用侵襲性醫(yī)療設備，從而促使CRKP感染的概率隨之而提升。126株CRKP菌株，CRKP對青霉素類、頭孢類、喹諾酮類的耐藥性>90%，三種抗生素的耐藥性對比無差異(P>0.05)。對氨基糖苷類、四環(huán)素類、磺胺類的耐藥性較低，三種抗生素的耐藥性對比無差異(P>0.05)。青霉素類、頭孢類、喹諾酮類的耐藥性高于氨基糖苷類、四環(huán)素類、磺胺類抗生素的耐藥性，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。從研究結果中可知，CRKP對于青霉素類、頭孢類、喹諾酮類的抗生素耐藥性高達90%以上，之所以出現該種情況是因為CRKP能夠產碳青霉烯酶有直接關系，能夠將碳青霉烯類抗生素進行水解，同時對于青霉素、頭孢類及其他β-內酰胺類的抗生素有水解作用。同時，CRKP中的β-內酰胺類抗生素作用靶點蛋白-青霉素結合蛋白位點出現了明顯的改變，從而促使β-內酰胺類耐藥性的產生[7]。CRKP對于喹諾酮通過對外膜滲透性進行降低及外排泵機制從而產生喹諾酮類耐藥。由于四環(huán)素類、氨基糖苷類、磺胺類抗生素等，由于與β-內酰胺類抗生素的抗菌機制存在極大的不同，從而促使耐藥性較低[8]。臨床上應以藥敏結果為依據，對抗菌藥物進行合理選擇，在條件允許的條件之下，經驗型用藥可選擇四環(huán)素類、氨基糖苷類、磺胺類抗生素，以此來完成對感染的有效控制。痰液和血液是CRKP主要的標本來源，由于CRKP具有較為復雜的耐藥機制，主要機制之一為碳青霉烯酶，能夠對青霉素類、碳青霉烯類、單環(huán)β-內酰胺類及頭孢菌素類進行水解，從而產生耐藥性[9]。因此，在未來的研究中，需要將CRKP的耐藥機制作為重點研究內容，只有充分的了解其耐藥機制，才能夠更好的為臨床用藥提供科學的指導[10]。同時，由于綜合病區(qū)及重癥監(jiān)護病區(qū)中收治的患兒病情較為復雜，當兒科患者在遭受到感染之后，會有較大的抗生素選擇壓力，較容易篩選出較多的多重耐藥菌株。在兒童中分離出來的株對青霉烯類、氨基糖苷類及喹諾酮類藥物所產生的耐藥率相仿，但是比成人的分離株低，兒童分離株對第一、二、三代頭孢菌素耐藥率明顯壁成人分離株低，之所以會出現該種情況可能與兒童抗生素所使用的頭孢類藥物有關，在藥物的誘導之下，會產生耐藥菌。

綜上所述，在兒童中CRKP有著較廣的分布，尤其是在新生兒中感染率最高。由于CRKP有著嚴重的耐藥情況，有很大一部分抗生素均展現出了較高的耐藥性，臨床上在進行抗菌藥物選取時需要以藥敏結果為依據有針對性的進行選擇，以此來完成對感染的有效控制。