蔣媛媛，田逢博，字學娟*，李 茂，唐 軍，周漢林，侯冠彧

(1.海南省動物衛(wèi)生監(jiān)督所，海南 ?？?70100；2.海南大學 林學院，海南 儋州571737；3.中國熱帶農業(yè)科學院 熱帶作物品種資源研究所，海南 儋州 571737)

王草(Pennisetumpurpureum×P.americanumcv.Reyan No.4)是一種優(yōu)質熱帶禾本科牧草，是反芻家畜重要飼料來源[1-2]。在我國南方熱帶地區(qū)，因夏季高溫多雨，王草不易曬制成干草，可以通過青貯調制保存鮮草，達到飼草周年均衡供應的目的[3]。但王草等熱帶牧草糖分不足且附著的乳酸菌較少，直接青貯品質較差，通過添加糖分或者乳酸菌等處理，能夠有效改善青貯發(fā)酵品質[4-6]。糖蜜是工業(yè)榨糖的副產物，主要成分是蔗糖，青貯時添加糖蜜作為乳酸菌發(fā)酵底物，促進乳酸菌生產，提高乳酸含量，青貯發(fā)酵品質提升效果明顯[7]。然而乳酸菌和糖蜜混合添加對王草青貯發(fā)酵品質的影響未見報道。本研究通過添加不同類型乳酸菌、糖蜜以及乳酸菌和糖蜜混合處理調制王草青貯飼料，分析青貯發(fā)酵品質，探討其對青貯發(fā)酵品質的影響，為調制優(yōu)質王草青貯飼料提供科學根據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料熱研4號王草、乳酸菌詳細信息同文獻[5]。糖蜜購自本地榨糖廠。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設計 試驗共設6個處理組，對照組(CK)不加入添加劑，直接青貯，試驗組分別添加植物乳桿菌(LP)(1×106CFU/g)、鼠李糖乳桿菌(LR)(1×106CFU/g)、2 %糖蜜(M)、植物乳桿菌和糖蜜混合處理(LP+M)以及鼠李糖乳桿菌和糖蜜混合處理(LR+M)，每組3個重復。每袋稱取約200克于專用青貯袋中，加入添加劑充分混勻，用真空包裝機抽真空，密封儲存一個月之后打開青貯袋，取樣分析各項指標。

1.2.2 青貯調制和樣品處理 方法同文獻[5]所示方法進行。

1.2.3 樣品分析 干物質(DM)含量采用烘干法測定；粗蛋白(CP)含量采用凱氏定氮儀測定；中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)分析采用洗滌劑法[8]；飼料相對值(RFV)計算方法參照文獻[3]。取青貯飼料20 g，加入80 mL去離子水，在4 ℃下浸提24 h，經雙層紗布和濾紙過濾，用雷磁PHS-3C型 pH計測定pH。

有機酸含量用島津LC-20A型液相色譜儀測定。分析條件：色譜柱型號為Rspak KC-811(日本昭和電氣)，流動相為3 mmol/L高氯酸溶液，流速1 mL/min，柱溫為40 ℃，檢測波長為210 nm?？偹?TA)為上述有機酸之和，氨態(tài)氮(AN/TN)采用凱氏定氮儀直接蒸餾測定，方法參考李茂等[9]所示方法。青貯飼料評分參照劉丹丹[10]所示方法。

1.3 數(shù)據分析

試驗數(shù)據采用SAS9.0軟件包和Excel軟件進行處理和統(tǒng)計分析，數(shù)據表示為平均值±標準誤，處理間采用鄧肯氏(Duncan)多重比較檢驗，P<0.05差異顯著。

2 結果與分析

2.1 王草青貯飼料營養(yǎng)成分

由表1可見，除LP組、LR組的DM含量與CK組處于同一水平外，其他處理組的DM含量均顯著高于CK組(P<0.05)。各組青貯料的CP含量處于同一水平，添加劑對其無顯著影響(P>0.05)。與CK組相比，添加劑處理組的ADF含量均顯著降低(P<0.05)，其中LP+M組，LR+M組與CK組相比差異最為顯著(P<0.05)。添加劑處理組的NDF含量顯著低于CK組(P<0.05)。與CK組相比，添加劑處理組的RFV顯著提高(P<0.05)。

表1 王草青貯飼料營養(yǎng)成分含量(干物質基礎)

2.2 王草青貯飼料發(fā)酵品質

由表2可知，添加劑的使用能顯著降低王草的pH(P<0.05)，且各處理組pH降低幅度差異不明顯(P>0.05)。CK組的乳酸含量最低，M組、LP+M組和LR+M組對乳酸含量的提升作用最明顯(P<0.05)。添加劑組乙酸與丁酸的含量均顯著低于CK組(P<0.05)，且M組、LP+M組和LR+M組相比于LP組和LR組又有明顯降低(P<0.05)，前者丁酸含量降為0%。添加劑處理組與CK組丙酸含量差異不顯著(P>0.05)。LP組、LR組的總酸含量較CK組顯著提高(P<0.05)，而M組、LP+M組和LR+M組的總酸含量與CK組差異不明顯(P>0.05)。添加劑的使用顯著降低了青貯料的氨態(tài)氮含量(P<0.05)。

表2 王草青貯飼料發(fā)酵品質(干物質基礎)

2.3 王草青貯飼料Flieg評分

由王草青貯飼料Flieg氏青貯評分表(表3)可知，王草直接青貯總分最低，經添加劑處理后各組貯藏效果都得以提升。各組的乳酸評分在同一水平，但乳酸菌處理組的乙酸與丁酸評分明顯低于其余添加劑處理組，表明單獨添加乳酸菌青貯效果不理想。糖蜜與糖蜜乳酸菌混合添加處理組的總分達到了最高分100。

表3 王草青貯飼料Flieg氏青貯評分

3 討 論

3.1 添加劑對王草青貯飼料營養(yǎng)成分的影響

由于袋裝青貯無汁液的流失，因此，有害微生物對營養(yǎng)成分的消耗是青貯料DM含量降低的主要原因。在本研究中，M組、LP+M組與LR+M組的DM含量顯著高于CK組，這說明上述添加劑的使用促進了乳酸生成，酸化了青貯環(huán)境，而酸性環(huán)境不利于有害微生物的生長，因此，添加劑組的DM含量得以提升。而LP組與LR組DM含量與CK組差異不顯著，這與李龍興等[11]的研究結果一致，其試驗結果表明單獨添加乳酸菌時，去穗玉米青貯料的DM含量提高不顯著。但Stokes[12]卻認為添加植物乳桿菌接種劑能夠顯著提高青貯飼料DM含量，這也許是因為乳酸菌添加劑在不同青貯原料發(fā)酵過程中會表現(xiàn)出不同的青貯效果。

粗蛋白是含氮物質的總稱，乳酸菌和糖蜜的加入對王草CP含量的提高無明顯作用。ADF和NDF與青貯料的適口性及消化率息息相關。ADF的含量高，意味著其中含有較多的粗纖維，飼草的適口性因此降低，家畜對干物質的采食量也隨之減少；NDF含量與飼草的消化率呈負相關，低含量的NDF說明飼草易被消化吸收。在本試驗中，添加劑組均降低了飼草的纖維含量，顯著改善了青貯品質。原現(xiàn)軍等[13]在青稞秸稈與多年生黑麥草以6∶4混合的基礎上，添加不同濃度的糖蜜，ADF與NDF的含量均顯著降低；劉曉婧等[14]發(fā)現(xiàn)添加乳酸菌可降低青貯粗纖維含量，她認為這是乳酸菌及其產生的多種酶對纖維結構破壞的結果。RFV是評價粗飼料的重要指標，RFV值越高，可消化干物質的采食量就越多，青貯品質越好。紅敏等[15]研究得出青貯玉米的RFV值為100.12，苜蓿干草的RFV值為109.20，玉米秸稈的RFV值為69.93，羊草的RFV值為91.55。本研究中王草直接青貯RFV值較低，糖蜜乳酸菌混合添加時RFV值最高，達到了127.19。因此，添加劑的加入使王草營養(yǎng)價值得以提升。

3.2 添加劑對王草青貯飼料發(fā)酵品質的影響

本研究中，王草直接青貯的pH在4.88左右，青貯品質較差；使用乳酸菌添加劑青貯的，pH在4.2左右，青貯品質良好；使用糖蜜以及混合添加劑的青貯料，pH在3.9左右，屬于優(yōu)等青貯。劉秦華等[16]的研究表明乳酸菌添加劑對青貯料pH有顯著影響，本研究中鼠李糖乳桿菌處理組的pH與其處理結果相近，但植物乳桿菌處理的pH卻明顯低于其用布氏乳桿菌處理的結果，說明青貯效果與乳酸菌種類有關。穆麟等[17]研究表明添加糖蜜可以顯著降低青貯料pH，本研究結果與其一致。

乳酸菌主要作用是產生乳酸，酸化青貯環(huán)境，從而抑制有害微生物的活動，確保本身在發(fā)酵中占據優(yōu)勢。M組、LP+M組與LR+M組的乳酸含量均顯著高于CK組，這是由于糖蜜為乳酸菌發(fā)酵提供了底物，保證了充足的營養(yǎng)物質，促使乳酸菌大量繁殖并產生乳酸。李龍興等[11]在玉米青貯時加入3%的糖蜜，發(fā)現(xiàn)處理組的乳酸含量高于對照組，乙酸、丁酸與氨態(tài)氮含量均低于對照組。青貯中乙酸可以有效抑制有害微生物的生長，丙酸在防止青貯料需氧腐敗方面效果良好，因此適量的乙酸與丙酸可提高青貯品質。丁酸在生成過程中會分解蛋白質并生成大量的胺或氨，從而使青貯飼料腐敗變質[18]，因此，優(yōu)質的青貯料應只含少量甚至不含丁酸。從試驗結果可以看出，添加劑的加入使氨態(tài)氮含量顯著降低，這是因為添加劑組的乳酸含量較高，使有害微生物和植物蛋白酶的活性被抑制，蛋白質分解被延緩，因此氨態(tài)氮含量降低。較多的氨態(tài)氮不利于青貯品質的提高，這意味著多數(shù)蛋白質都被分解。在本研究中，乳酸菌和糖蜜均可以提高乳酸含量，降低乙酸、丙酸、丁酸以及氨態(tài)氮含量，改善王草青貯品質。

4 結 論

王草直接青貯時品質不佳，添加糖蜜和乳酸菌可有效改善王草的青貯品質，單獨添加糖蜜即可獲得優(yōu)質王草青貯飼料。