戶艷霞，趙 璇，張 寶，李江美，干華磊，馬駿潔，李佛琳，吳德喜

（1.云南省煙草公司大理州公司，云南 大理 671000；2.上海萬力華生物科技有限公司，上海 201203；3.紅塔集團大理卷煙廠，云南 大理6 710002；4.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院，云南 昆明 650201；5.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草學(xué)院，云南 昆明 650201）

煙草黑脛病是由煙草疫霉菌引起的一種頑固性土傳病害，其病原菌可在土壤中存活數(shù)年并具有累積效應(yīng)，可侵染煙株各生長階段，已成為煙草最頑固的病害之一[1]。該病發(fā)生范圍廣、危害重且防治難度大，除單獨發(fā)生之外，還會與煙草青枯病以及根黑腐病一起復(fù)合侵染，使煙葉的質(zhì)量和產(chǎn)量下降，發(fā)生嚴重時造成的損失達到75%及以上，甚至有絕收的可能，嚴重影響了各個煙區(qū)農(nóng)民的經(jīng)濟收益[2]。長期以來，生產(chǎn)上防治煙草黑脛病以化學(xué)藥劑為主，化學(xué)藥劑防效好，但病原菌抗藥性、農(nóng)藥殘留等問題也隨之出現(xiàn)。有效的生防菌防治煙草黑脛病可以避免化學(xué)藥劑的弊端，符合綠色生態(tài)防控、綠色優(yōu)質(zhì)煙葉生產(chǎn)的需求[3-4]。木霉菌是一種廣泛存在于土壤、植物根際和葉面的腐生型真菌，對多種植物病原真菌具有拮抗作用，是一類廣譜生防菌[5-6]。本試驗用生產(chǎn)上常用的化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅（Metalaxyl mancozeb）作為對照，比較5 種木霉產(chǎn)品田間防治煙草黑脛病的效果試驗。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試藥劑

供試木霉產(chǎn)品共有以下5 種，一是東方農(nóng)韻牌木霉菌（2 億孢子/g）可濕性粉劑，上海萬力華生物科技有限公司生產(chǎn)；二是菌翹翹牌木霉菌（2 億個/g）水分散粒劑，云南星耀生物制品有限公司生產(chǎn)；三是稪活牌木霉菌（木霉菌10 億孢子/g）可濕性粉劑，山東惠民中聯(lián)生物有限公司生產(chǎn)；四是拜沃牌哈茨木霉菌（3 億CFU/g）可濕性粉劑，美國拜沃股份有限公司生產(chǎn)；五是三槍牌哈茨木霉菌（1 億CFU/克）可濕性粉劑，美國拜沃股份有限公司生產(chǎn)。對照的化學(xué)藥劑為寶大森牌68%甲霜·錳鋅（含58%甲霜靈、10%代森錳鋅）可濕性粉劑，江蘇寶靈化工股份有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 供試菌種

煙草疫霉菌由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院提供，接種用的菌種采用谷粒培養(yǎng)基培養(yǎng)后用濕潤煙草專用育苗基質(zhì)按菌種和基質(zhì)體積1∶100 配制，每株移栽前放入200 mL 到栽苗塘，和土、肥料混拌后栽煙。

1.2 試驗地基本情況

試驗于2021 年4—9 月在大理白族自治州彌渡縣紅巖鎮(zhèn)東海村委會進行，試驗煙田歷年煙草黑脛病發(fā)病嚴重。供試烤煙為感病品種紅花大金元，采用漂浮育苗后覆膜移栽，按當?shù)貎?yōu)質(zhì)煙葉生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范進行栽培管理。

1.3 試驗設(shè)計

試驗共設(shè)置7 個處理，每個處理3 次重復(fù)，每個小區(qū)32 m2栽種60 株，煙株行距1.3 m、株距0.4 m。施肥量按常規(guī)進行，1 hm2田施氮肥75 kg、磷肥90 kg、鉀肥225 kg、商品有機肥1 t。有機肥和含氮磷鉀煙草專用復(fù)合肥全部作為基肥施用，硫酸鉀作為追肥施用。具體處理情況見表1。

表1 各處理施藥情況

處理2～處理7 按照各藥劑用量，分別在移栽當天和之后7 d 各施用1 次，每次每株兌水200 mL 施加。

1.4 調(diào)查內(nèi)容和調(diào)查方法

1.4.1 農(nóng)藝性狀調(diào)查

本試驗按照煙草行業(yè)標準《煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查測量方法》（YCT 142—2010）進行。不同處理每小區(qū)于煙草移栽后的30 d 調(diào)查記錄1 次煙株的株高、莖圍、葉片數(shù)、節(jié)距、最大葉葉長和葉寬等農(nóng)藝性狀，并計算葉面積（葉長×葉寬×0.634 5）。每間隔15 d 各調(diào)查一次田間農(nóng)藝性狀，直至腳葉成熟期結(jié)束。

1.4.2 煙草黑脛病發(fā)生情況調(diào)查

本試驗按照國家標準《煙草病蟲害分級及調(diào)查方法》（GB/T 23222—2008）進行煙草黑脛病分級調(diào)查。調(diào)查時期在腳葉成熟期，對全部煙株進行調(diào)查。發(fā)病率、病情指數(shù)、防治效果計算如式（1）、式（2）、式（3）所示。

1.5 數(shù)據(jù)處理

利用Excel 2010、STST 方差分析軟件進行數(shù)據(jù)處理，用Duncan’s 新復(fù)極差法進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同木霉菌對煙株農(nóng)藝性狀的影響

調(diào)查各處理煙株的田間農(nóng)藝性并進行比較，和清水對照相比，采用藥劑防治的處理農(nóng)藝性狀明顯好，6 種藥劑按照葉面積從大到小依次是：化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅＞東方農(nóng)韻木霉菌＞拜沃哈茨木霉菌＞菌翹翹木霉菌＞稪活木霉菌＞三槍哈茨木霉菌，表明供試的5 種木霉菌控制煙草黑脛病后對于煙株的生長有利，但和化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅相比，效果差一些，具體見表2。

表2 腳葉成熟期不同處理煙株的農(nóng)藝性狀比較

2.2 不同木霉菌對煙草黑脛病防控效果

2.2.1 發(fā)病普遍性調(diào)查及分析

發(fā)病率調(diào)查結(jié)果和通過發(fā)病率計算的相對防效結(jié)果如表3 所示。供試的5 種木霉菌和化學(xué)藥劑對煙草黑脛病的防治效果從高到低的排列順序依次是：化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅（85.37%）＞東方農(nóng)韻木霉菌（69.63%）＞拜沃哈茨木霉菌（68.67%）＞菌翹翹木霉菌（66.00%）＞稪活木霉菌（60.53%）＞三槍哈茨木霉菌（54.20%），表明供試的5 種木霉菌對煙草黑脛病均有一定的防治效果，但均沒有化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅效果好。

表3 腳葉成熟期不同處理煙草黑脛病發(fā)生情況比較 單位：%

對供試6 種藥劑發(fā)病率計算的防治效果數(shù)據(jù)進行方差分析，并通過新復(fù)極差（SSR 法）比較得出以下結(jié)論。6 個處理間差異達到極顯著（1%水平）的是：化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅和東方農(nóng)韻木霉菌、拜沃哈茨木霉菌、菌翹翹木霉菌、稪活木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間，東方農(nóng)韻木霉菌和稪活木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間，拜沃哈茨木霉菌和稪活木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間，菌翹翹木霉菌和三槍哈茨木霉菌之間。6 個處理間差異僅達到顯著（5%水平）的是：菌翹翹木霉菌和稪活木霉菌之間，稪活木霉菌和三槍哈茨木霉菌之間，具體見表4。

表4 不同處理發(fā)病率計算的防治效果差異顯著性測驗結(jié)果

2.2.2 發(fā)病嚴重性調(diào)查及分析

病情指數(shù)調(diào)查結(jié)果及相對防效表明，供試的5 種木霉菌和對照化學(xué)藥劑對煙草黑脛病的防治效果從高到低依次是：化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅（86.40%）＞東方農(nóng)韻木霉菌（69.87%）＞菌翹翹木霉菌（69.20%）＞稪活木霉菌（67.1%）＞拜沃哈茨木霉菌（63.33%）＞三槍哈茨木霉菌（60.87%），表明供試的5 種木霉菌對煙草黑脛病在病害嚴重性方面均有一定的防治效果，但是沒有化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅防治效果好，具體見表5。

表5 腳葉成熟期不同處理對煙草黑脛病的防治效果比較

對供試6 種藥劑病情指數(shù)計算的防治效果數(shù)據(jù)進行方差分析，并通過新復(fù)極差（SSR 法）比較得出以下結(jié)論。一是6 個處理間差異達到極顯著（1%水平）的是化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅和東方農(nóng)韻木霉菌、菌翹翹木霉菌、稪活木霉菌、拜沃哈茨木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間。二是6 個處理間差異僅達到顯著（5%水平）的是東方農(nóng)韻木霉菌和拜沃哈茨木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間，菌翹翹木霉菌和三槍哈茨木霉菌之間，具體見表6。

表6 不同處理病情指數(shù)計算的防治效果差異顯著性測驗結(jié)果

3 結(jié)論與討論

通過本次試驗可以得出，供試的5 種木霉菌對接種煙草疫霉菌條件下的田間煙草黑脛病在發(fā)病普遍性和嚴重性方面，防效不及化學(xué)藥劑甲霜·錳鋅（86.40%），但均有一定的防控效果。通過發(fā)病率計算的相對防治效果如下，東方農(nóng)韻木霉菌（69.87%）、拜沃哈茨木霉菌（68.67%）和菌翹翹木霉菌（66.00%）防治效果較好，其次為稪活木霉菌（60.53%），三槍哈茨木霉菌（54.20%）防治效果最差。通過病情指數(shù)計算的相對防治效果，東方農(nóng)韻木霉菌（69.87%）、菌翹翹木霉菌（69.20%）和稪活木霉菌（67.1%）防治效果較好，其次為拜沃哈茨木霉菌（63.33%）和三槍哈茨木霉菌（60.87%）。

本試驗采用人工接種通過谷粒培養(yǎng)的煙草疫霉菌，若不采取防控措施，發(fā)病普遍性和嚴重度均會較高（本試驗清水對照發(fā)病率60.56%，病情指數(shù)平均36.55），對比試驗各處理取得比較好的防治效果，表明供試的6 種藥劑分別在移栽當天和之后7 d 各施用1 次，能夠有效防控?zé)煵菀呙咕秩緹煵莅l(fā)病，結(jié)果和相關(guān)學(xué)術(shù)研究報道基本一致[7-9]。但試驗結(jié)果和生產(chǎn)反映的效果也有不一致的地方，一方面是生物菌劑在存放、運輸方面穩(wěn)定性不如化學(xué)藥劑，另一方面可能是使用、調(diào)查評價方法方面出現(xiàn)的問題。

煙草黑脛病是煙草生產(chǎn)中常見且為害嚴重的病害，長期使用化學(xué)藥劑必然出現(xiàn)病菌的抗藥性、藥劑殘留及環(huán)境污染等問題，篩選有效的生物菌劑配合化學(xué)藥劑防控?zé)煵莺诿劜≡诋斍笆潜容^現(xiàn)實的，本試驗結(jié)果可供生產(chǎn)參考。