吳憂 朱虹 張厚文 徐彬 侯伯南 徐林勝 梁順利

浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院 浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院 杭州 310005

帕金森?。≒arkinson's disease，PD）是目前第二大神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，隨著人口老齡化進(jìn)程的加劇，發(fā)病率仍在逐漸上升，嚴(yán)重威脅人類健康。目前PD臨床治療以藥物為主，常用西藥左旋多巴制劑等長(zhǎng)期療效不佳，而中醫(yī)藥具有天然、少毒、協(xié)同作用好等特點(diǎn)，在本病的長(zhǎng)期防治中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。PD的中醫(yī)病機(jī)復(fù)雜，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其以肝腎虧虛、氣血陰陽(yáng)不足為本，在本虛基礎(chǔ)上形成了風(fēng)、痰、火、瘀等病理改變[1]，因此熄風(fēng)化痰、祛瘀通絡(luò)法為PD常用的中醫(yī)辨證治療方法。菖蒲郁金湯為化痰祛瘀常用湯劑，適用于PD的中醫(yī)治療，但其作用機(jī)制尚不明確，限制了臨床推廣，因此目前在PD臨床治療中的應(yīng)用相對(duì)較少。為此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)小鼠腹腔內(nèi)注射1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶（1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP）建立亞急性PD小鼠模型，采用菖蒲郁金湯進(jìn)行干預(yù)治療，評(píng)價(jià)菖蒲郁金湯對(duì)PD小鼠行為學(xué)癥狀、中腦黑質(zhì)多巴胺能（dopamine，DA）能神經(jīng)元的存活、紋狀體神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化、神經(jīng)元自噬活性以及α-突觸核蛋白（α-synuclein，α-Syn）表達(dá)的影響，明確菖蒲郁金湯對(duì)PD小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用并探討其相關(guān)機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)雄性C57BL/6小鼠36只，8～10周齡，體質(zhì)量18～22 g，購(gòu)于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（滬）2017-0005]，飼養(yǎng)于清潔級(jí)、正壓屏障系統(tǒng)，12 h光照和黑暗交替，自由攝食和飲水，設(shè)施和飼料均來(lái)自浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證：SYXK（浙）2021-0012]。本研究經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與倫理委員會(huì)審批通過(guò)（倫理審批號(hào)：20180604-01）。

1.2 主要試劑及儀器 MPTP、小鼠抗酪氨酸羥化酶（tyrosine hydroxylase，TH）多克隆抗體均購(gòu)于美國(guó)Sigma公司（批號(hào)：M0896、ab112）；兔抗微管相關(guān)蛋白1 輕鏈3B（microtubule -associated protein 1 light chain 3 Beta，LC3B）單克隆抗體購(gòu)于美國(guó)Abcam公司（批號(hào)：EPR18709）；小鼠抗α-Syn單克隆抗體購(gòu)于美國(guó)Santa公司（批號(hào)：sc-12767）；山羊抗兔免疫球蛋白G（immunoglobulin，IgG）抗體、山羊抗小鼠IgG抗體均購(gòu)于美國(guó)CST公司（批號(hào)：7074、7076）；鼠抗甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）多克隆抗體購(gòu)于杭州華安生物技術(shù)有限公司（批號(hào)：EM1101）；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白濃度測(cè)定試劑盒購(gòu)于上海碧云天生物技術(shù)研究所（批號(hào)：P0012）。

RBMS-200C小鼠大腦冠狀切片模具購(gòu)于美國(guó)Kentscientific公司；RM2235切片機(jī)為德國(guó)Leica公司產(chǎn)品；Odyssey CLX激光成像儀購(gòu)于美國(guó)Licor公司。

1.3 菖蒲郁金湯藥物制備 由石菖蒲9 g，溫郁金6 g，炒梔子9 g，牡丹皮9 g，鮮竹葉9 g，連翹6 g，燈心草6 g，木通4.5 g，淡竹瀝15 g，玉樞丹1.5 g組成，藥材來(lái)源于本院中藥房。將石菖蒲、溫郁金、鮮竹葉、炒梔子、牡丹皮、連翹、燈心草、木通以10倍的純水浸泡，30 min后同煎，武火煎至沸騰，然后再用文火繼續(xù)煎30 min，兩煎后將余下的藥渣另加5倍的純水，再煎30 min，兩次煎的藥汁加入淡竹瀝、玉樞丹沖泡，然后濃縮成濃度為2 g·mL-1的生藥，裝瓶壓蓋，真空包裝儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 PD動(dòng)物模型制備及分組給藥 參照文獻(xiàn)[2]，按照以下方法制備小鼠亞急性PD模型：用0.9%氯化鈉溶液將MPTP稀釋至濃度為1 mg·mL-1，劑量為30 mg·kg-1，對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射，1次/d，共7 d。采用懸掛實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)小鼠行為學(xué)癥狀，并取中腦黑質(zhì)腦組織行TH免疫組化染色，觀察DA能神經(jīng)元存活情況。懸掛實(shí)驗(yàn)分?jǐn)?shù)≤2分，且中腦黑質(zhì)DA能神經(jīng)元數(shù)目較正常對(duì)照明顯減少，即為造模成功。

小鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法共分為正常對(duì)照組、MPTP模型組、菖蒲郁金湯組，每組12只。MPTP模型組和菖蒲郁金湯組按照上述方法建立PD模型，菖蒲郁金湯組在MPTP注射的同時(shí)開始給予20 g·kg-1菖蒲郁金湯生藥灌胃，1次/d，共21 d。正常對(duì)照組給予30 mg·kg-1無(wú)菌0.9%氯化鈉溶液腹腔注射，1次/d，共7 d。

1.5 行為學(xué)檢測(cè) 最后1次給藥結(jié)束后1、7、14 d，對(duì)各組小鼠進(jìn)行下述行為學(xué)檢測(cè)，檢測(cè)均在上午9～12點(diǎn)進(jìn)行，保證實(shí)驗(yàn)環(huán)境清潔。

1.5.1 爬桿實(shí)驗(yàn) 制作一長(zhǎng)50 cm、直徑1 cm的木桿，頂端放一木塞，小鼠放置在木塞上，計(jì)時(shí)1 min，然后將木塞倒立放置，小鼠自動(dòng)向上爬行，測(cè)定記錄小鼠的爬桿時(shí)間，每只小鼠共測(cè)3次，每次間隔時(shí)間30 min，取平均值為最終爬桿時(shí)間。

1.5.2 懸掛實(shí)驗(yàn) 將小鼠兩前肢懸掛于水平電線上，若小鼠用兩只后肢抓電線記3分，一只后肢抓電線記2分，兩只后肢都不能抓電線記1分，小鼠直接落下記0分。

1.5.3 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) 參照文獻(xiàn)[3]方法制作實(shí)驗(yàn)曠場(chǎng)，先讓小鼠在曠場(chǎng)內(nèi)自由活動(dòng)10 min，適應(yīng)環(huán)境，隨后將其放入曠場(chǎng)中央?yún)^(qū)域，記錄小鼠在曠場(chǎng)內(nèi)活動(dòng)的總距離和活動(dòng)平均速度，每只小鼠測(cè)定15 min。

1.6 標(biāo)本采集 各組小鼠完成最后一次行為學(xué)檢測(cè)后，采用0.3%戊巴比妥鈉0.025 mL·g-1腹腔注射麻醉，穿刺左心室，以4 ℃的0.9%氯化鈉溶液快速全身灌注，直至右心耳處流出的液體澄清。每組隨機(jī)取8只小鼠，斷頭，取腦，置于冰上，應(yīng)用腦冠狀切片模具快速切取中腦處黑質(zhì)部位腦組織（Bregma-2.8～-3.8），其中一半置于4%多聚甲醛中固定24 h，隨后梯度乙醇脫水，二甲苯透明，浸蠟，包埋，5 μm連續(xù)切片，4 ℃保存，后期進(jìn)行免疫組化染色；另一半置于-80 ℃液氮中保存，后期進(jìn)行免疫印跡法檢測(cè)。每組剩下的4只小鼠，取約1 mm×1 mm×1 mm紋狀體腦組織，2.5%戊二醛固定，常溫保存，進(jìn)行透射電鏡檢測(cè)。

1.7 TH免疫組化染色檢測(cè)DA能神經(jīng)元 取制備好的小鼠中腦黑質(zhì)腦組織切片，采用水浴法進(jìn)行抗原修復(fù)，室溫條件下孵育，血清封閉，小鼠抗TH抗體按照1:500的比例進(jìn)行稀釋，然后滴加至切片上，4 ℃過(guò)夜，滴加二抗，室溫條件下孵育，二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色，蘇木精復(fù)染，鹽酸乙醇分化，磷酸鹽緩沖液返藍(lán)后梯度乙醇中脫水，封片后光鏡觀察。觀察黑質(zhì)部位染色呈陽(yáng)性的神經(jīng)元，高倍鏡下各組隨機(jī)選取10個(gè)視野，計(jì)數(shù)TH染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，并觀察其形態(tài)變化。

1.8 透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) 取制備好的小鼠紋狀體腦組織塊，磷酸鹽緩沖液漂洗3次，1%的鋨酸溶液中固定1～2 h，漂洗3次后梯度乙醇脫水，包埋劑梯度滲透，分裝后包埋，70 ℃加熱過(guò)夜，50～70 nm超薄切片，檸檬酸鉛溶液染色15 min，醋酸雙氧鈾50%乙醇飽和溶液中染色15 min，透射電鏡觀察。

1.9 免疫印跡法檢測(cè)自噬蛋白LC3B和α-Syn的蛋白表達(dá) 將冰凍組織分剪成碎片，以蛋白裂解液進(jìn)行裂解，提取總蛋白，100 ℃條件下變性5 min，行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE），轉(zhuǎn)至聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜，室溫封閉2 h，分別加入α-Syn 抗體（稀釋比例：1:200）、LC3B抗體以及內(nèi)參蛋白抗體（稀釋比例均為：1∶2 000），4 ℃過(guò)夜，滴加辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）標(biāo)記二抗（稀釋比例：1∶2 000），室溫條件下孵育2 h 后，置于增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光試劑（enhanced chemiluminescence，ECL）工作液中，反應(yīng)2 min后封閉，暗室內(nèi)進(jìn)行感光、顯影和定影，分析蛋白條帶，以GAPDH為內(nèi)參，計(jì)算蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以表示，各組間數(shù)據(jù)比較應(yīng)用單因素方差分析，兩組線性數(shù)據(jù)相關(guān)程度分析采用Pearson相關(guān)分析。以P＜0.05為有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠行為學(xué)癥狀比較 與正常對(duì)照組比較，MPTP模型組小鼠1、7、14 d的爬桿時(shí)間均顯著延長(zhǎng)（均P＜0.01）。與MPTP模型組比較，菖蒲郁金湯組小鼠1 d時(shí)爬桿時(shí)間縮短（P＜0.05），7、14 d時(shí)爬桿時(shí)間進(jìn)一步縮短（均P＜0.01）。與正常對(duì)照組比較，MPTP模型組小鼠1、7、14 d的懸掛實(shí)驗(yàn)分值均明顯降低（均P＜0.01）。與MPTP模型組比較，菖蒲郁金湯組小鼠1 d時(shí)懸掛實(shí)驗(yàn)分值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），7、14 d時(shí)懸掛實(shí)驗(yàn)分值均增加（均P＜0.05）。與正常對(duì)照組比較，MPTP模型組小鼠1、7、14 d曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)總距離和平均速度均降低（均P＜0.01）。與MPTP模型組比較，各時(shí)間點(diǎn)菖蒲郁金湯組小鼠活動(dòng)總距離和平均速度均顯著增加（P＜0.01）。見圖1。提示菖蒲郁金湯可明顯改善PD小鼠的各種行為學(xué)癥狀。

圖1 各組小鼠行為學(xué)測(cè)試結(jié)果Fig.1 Behavioral test results of mice in each group

2.2 各組小鼠中腦黑質(zhì)DA能神經(jīng)元存活情況比較TH免疫組化染色可見，MPTP模型組小鼠中腦黑質(zhì)TH染色陽(yáng)性神經(jīng)元排列非常稀疏紊亂，胞質(zhì)染色淡，突起明顯細(xì)短。菖蒲郁金湯組小鼠中腦黑質(zhì)TH染色陽(yáng)性神經(jīng)元排列相對(duì)密集有序，染色濃度較MPTP模型組深，突起變長(zhǎng)。高倍鏡下可見，MPTP模型組小鼠TH染色陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)目較正常對(duì)照組顯著減少（P＜0.01），菖蒲郁金湯組小鼠TH染色陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)目較MPTP模型組顯著增加（P＜0.01）。見圖2。提示菖蒲郁金湯可增加PD小鼠中腦DA能神經(jīng)元的存活。

圖2 各組PD小鼠中腦黑質(zhì)TH免疫組化染色情況（40×，標(biāo)尺=50 μm）Fig.2 TH immunohistochemical staining of substantia nigra of PD mice in each group（40×，ruler=50 μm）

2.3 各組小鼠紋狀體組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)比較 正常對(duì)照組小鼠紋狀體神經(jīng)元呈橢圓形，排列緊密，包膜構(gòu)造較完整，胞內(nèi)無(wú)蛋白聚集，線粒體膜結(jié)構(gòu)完整，內(nèi)嵴清晰可見。MPTP模型組神經(jīng)元結(jié)構(gòu)明顯破壞，胞質(zhì)水腫、空泡變性，核固縮變小，線粒體膜結(jié)構(gòu)破壞，嵴模糊不清；菖蒲郁金湯組神經(jīng)元部分結(jié)構(gòu)破壞，胞質(zhì)水腫、空泡變性現(xiàn)象較MPTP模型組減輕，線粒體膜結(jié)構(gòu)相對(duì)完整，部分可見自噬溶酶體。見圖3。

圖3 各組小鼠紋狀體電鏡下細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化（醋酸雙氧鈾-檸檬酸鉛雙染色，30 000×）Fig.3 Ultrastructural changes of striatum cells in each group under electron microscope（uranyl acetate-lead citrate double staining，30 000×）

2.4 各組小鼠中腦α-Syn以及自噬蛋白LC3B蛋白表達(dá)比較 與正常對(duì)照組比較，MPTP模型組和菖蒲郁金湯組中腦α-Syn蛋白表達(dá)均明顯增加（P＜0.01）；與MPTP模型組比較，菖蒲郁金湯組α-Syn蛋白表達(dá)減少（P＜0.01）。見圖4A、4C。

與正常對(duì)照組比較，MPTP模型組和菖蒲郁金湯組小鼠腦內(nèi)微管相關(guān)蛋白1輕鏈3B-Ⅱ（microtubuleassociated protein 1 light chain 3 Beta-Ⅱ，LC3B-Ⅱ）/微管相關(guān)蛋白1 輕鏈3B-Ⅰ（microtubule-associated protein 1 light chain 3 Beta-Ⅰ，LC3B-Ⅰ）比值均增高（P＜0.01）；與MPTP模型組比較，菖蒲郁金湯組LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值則明顯增高（P＜0.01）。見圖4B、4D。

圖4 各組小鼠黑質(zhì)α-Syn和LC3B蛋白表達(dá)情況Fig.4 Protein expression of α-Syn and LC3B in substantia nigra of each group

2.5 PD小鼠中腦LC3B蛋白與α-Syn及DA能神經(jīng)元存活的相關(guān)性 MPTP模型組和菖蒲郁金湯組LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ相對(duì)表達(dá)量與α-Syn蛋白相對(duì)表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)（r=-0.825，P＜0.01），LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ相對(duì)表達(dá)量與中腦黑質(zhì)DA能神經(jīng)元存活數(shù)目呈正相關(guān)（r=0.756，P＜0.01）。見圖5。

圖5 LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ表達(dá)與α-Syn的蛋白表達(dá)、DA能神經(jīng)元存活數(shù)的相關(guān)性Fig.5 Correlation of LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰexpression with α-Syn protein expression and surviving number of DA neurons

3 討論

黑質(zhì)致密區(qū)DA能神經(jīng)元進(jìn)行性死亡以及胞質(zhì)內(nèi)路易小體是PD的主要病理特征，異常聚集的α-Syn為路易小體的主要成分。PD患者的腦內(nèi)存在自噬溶酶體途徑障礙，研究認(rèn)為這正是致使α-Syn出現(xiàn)異常聚集的重要原因，在PD的發(fā)病過(guò)程中起著關(guān)鍵作用[4-6]。近年來(lái)，激活自噬、恢復(fù)細(xì)胞的自噬溶酶體功能，從而促進(jìn)腦內(nèi)異常聚集α-Syn的清除，已成為治療PD的一個(gè)新策略[7-8]，但目前尚缺少能基于此理論有效應(yīng)用于臨床的藥物。中醫(yī)藥具有天然、少毒、協(xié)同作用強(qiáng)等特點(diǎn)，在PD的長(zhǎng)期防治中有著很好的臨床應(yīng)用前景，研究表明多種中草藥及其活性成分可通過(guò)抗炎、抗凋亡、抗氧化應(yīng)激、激活自噬等途徑治療PD[9-11]。因此，基于PD的發(fā)病機(jī)制探尋有效的中藥可能是解決PD治療難題的一個(gè)方向。

中醫(yī)認(rèn)為，痰瘀機(jī)制在PD的病程發(fā)展過(guò)程中起著重要作用，化痰祛瘀法為PD常用的中醫(yī)辨證治療方法。菖蒲郁金湯為化痰祛瘀常用復(fù)方，出自《溫病全書》，方中石菖蒲辛溫，化濕痰、開竅；郁金辛寒，行氣開郁；連翹配竹葉，輕清宣透，泄?jié)駸嵝皻猓荒就ㄅ涑礂d子、燈心草導(dǎo)濕熱；竹瀝苦寒，清化痰熱而開其竅；牡丹皮行血脈，瀉血中伏熱；玉樞丹為成藥，避穢化濁。諸藥配伍具有辟穢化痰、解毒清熱、醒腦開竅之效，適用于以痰瘀為主要病機(jī)的病癥的治療。有學(xué)者將石菖蒲、郁金與益智仁聯(lián)用，治療合并智能減退的PD患者，認(rèn)為此法可扶臟腑之本，治痰瘀之標(biāo)，上下同治，具有良效[12]。本研究結(jié)果表明，菖蒲郁金湯可以改善PD小鼠的運(yùn)動(dòng)功能障礙，增加中腦DA能神經(jīng)元的存活，由此明確了菖蒲郁金湯對(duì)PD具有神經(jīng)保護(hù)作用。

中醫(yī)理論認(rèn)為，精微物質(zhì)滯留體內(nèi)，五臟不能運(yùn)化，日久則為痰瘀，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中破損的細(xì)胞器、異常聚集的蛋白質(zhì)等病理性代謝產(chǎn)物，皆屬于中醫(yī)中的痰瘀之邪。細(xì)胞自噬程序可清除降解病理產(chǎn)物，自噬障礙則會(huì)導(dǎo)致痰瘀聚集，PD中α-Syn的異常聚集則是痰瘀聚集的具體表現(xiàn)?；奠铕鲋兴幹委烶D很可能是通過(guò)增強(qiáng)自噬的機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)。研究表明，石菖蒲揮發(fā)油的主要成分β-細(xì)辛醚可減少α-Syn聚集，保護(hù)PD大鼠中腦神經(jīng)元免受損傷[13]，可能通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激自噬的機(jī)制發(fā)揮作用[14]。前期研究證實(shí)，石菖蒲和郁金的主要單體成分姜黃素可有效改善PD小鼠的行為學(xué)癥狀，減輕PD細(xì)胞損傷，激活自噬，促進(jìn)α-Syn的清除是其發(fā)揮對(duì)DA能神經(jīng)元保護(hù)作用的主要機(jī)制[15-16]?；诖?，本研究進(jìn)一步探討了菖蒲郁金湯用于治療PD的可能機(jī)制。自噬特異蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值是目前公認(rèn)的自噬活性評(píng)價(jià)指標(biāo)[17]，本研究發(fā)現(xiàn)，菖蒲郁金湯干預(yù)后，PD小鼠中腦黑質(zhì)自噬蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值增加，且PD小鼠的LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值與α-Syn表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，與DA能神經(jīng)元的存活數(shù)呈正相關(guān)，提示菖蒲郁金湯增強(qiáng)了中腦黑質(zhì)神經(jīng)元自噬活性，且增強(qiáng)的自噬活性有效促進(jìn)了α-Syn的清除，減少了DA能神經(jīng)元的損傷。

黑質(zhì)-紋狀體通路是PD運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)的重要通路，近期研究發(fā)現(xiàn)，一種富集于紋狀體的Ras同源蛋白（the Ras homolog enriched in striatum，Rhes）可通過(guò)調(diào)節(jié)紋狀體自噬，而影響PD小鼠的運(yùn)動(dòng)障礙，可能成為PD治療的一個(gè)藥理靶點(diǎn)[18]，因此本研究進(jìn)一步通過(guò)電鏡觀察了紋狀體超微結(jié)構(gòu)變化和自噬溶酶體情況，結(jié)果顯示菖蒲郁金湯治療后紋狀體神經(jīng)元損傷減輕，同時(shí)胞質(zhì)內(nèi)自噬溶酶體也增多，提示菖蒲郁金湯還可保護(hù)紋狀體神經(jīng)元，增強(qiáng)其自噬活性。

綜上所述，菖蒲郁金湯可改善PD小鼠的行為障礙，對(duì)PD的DA能神經(jīng)元具有保護(hù)作用，增強(qiáng)神經(jīng)元自噬活性，從而促進(jìn)α-Syn的自噬性清除是其主要作用機(jī)制之一。作為化痰祛瘀常用復(fù)方，菖蒲郁金湯在PD的長(zhǎng)期防治中有較大的潛力，但目前相關(guān)的機(jī)制研究非常有限，限制了其臨床推廣，該復(fù)方通過(guò)何種通路或途徑調(diào)節(jié)自噬等具體機(jī)制期待今后更深入研究予以探討。