郭俊梅

門源縣陰田鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,青海門源 810399

牛流行熱也叫三日熱或暫時熱，是一種由牛流行熱病毒感染引起急性熱性傳染病。牛流行熱臨床表現(xiàn)具有典型的突發(fā)性高熱熱點，牛流行熱的主要傳染源為病牛，該病的發(fā)生具有顯著的周期性和季節(jié)性特征。平均每3～5年或6～8年流行一次，往往為小流行與大流行交替發(fā)生。一般情況每次大流行間隔著一次小流行，且地方性流行發(fā)病具有時間長、損失大特點。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

本文選取2016～2021年從青海省門源縣陰天鄉(xiāng)養(yǎng)牛場采集的牛血清1 200份病例作為研究對象。血清樣本采集于全鄉(xiāng)的養(yǎng)牛散戶和幾個中小型規(guī)?；B(yǎng)殖場。采集的牛血清樣本均統(tǒng)一帶回實驗室，在同樣的處理條件下完成檢測。牛血清樣本先在37 ℃的環(huán)境下靜置30 min，再放置在4 ℃的環(huán)境下靜置15 min，然后以3 000 r/min做血清離心分離。最后將分離好的血清放置在-20 ℃下保存，血清采用間接ELISA法檢測前應提前放置在4 ℃的環(huán)境下待檢[1]。

1.2 一般材料與儀器

1.2.1 檢測試劑

檢測試劑采用由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所診斷中心所提供的牛流行熱病毒間接ELISA抗體檢測試劑盒。

1.2.2 檢測儀器

美國BIO-RAD公司的iMARK型酶標儀；德國eppendorf公司的離心機及微量加樣器。

1.3 檢測方法

采用間接ELISA法進行檢測，檢測方法參考如下：①取10 μL待檢血，將其余90 μL血清稀釋液混合均勻，加入準備好的抗原ELISA反應板，放置在37 ℃的環(huán)境下30 min進行孵育；②PBST洗滌3次，再加入1:100稀釋酶標記二抗，同樣放置在37 ℃的環(huán)境下30 min進行孵育；③PBST洗滌3次，再加入底物TMB，對其采取遮光處理，同樣放置在37 ℃的環(huán)境下進行反應；④反應10 min后加入終止液；⑤使用酶標儀讀取OD450值。

1.4 判斷標準

結果判斷依據(jù)公式S/P＝（OD450樣本-OD450陰性對照）/（OD450陽性對照-OD450陰性對照）的原理進行判斷。依據(jù)公式計算出S/P值：若S/P≥0.3，則為陽性；若S/P＜0.22，則為陰性；若S/P值介于0.22～0.3，則為可疑病例。對于檢出結果存在疑問的，可通過重復檢測進行驗證。若重復檢測的結果S/P＜0.3，則為陰性；若S/P≥0.3，則為陽性。

1.5 統(tǒng)計分析

對1 200份樣本血清信息進行檢測分析，并對檢測結果采用綜合分析、卡方檢驗（χ2）進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析。最后結合結果比對血清采樣的場點，分析牛流行熱的流行情況和感染率，分析不同場點間牛流行熱的感染率差異情況，分析和討論牛流行熱的發(fā)生與流行條件，以及防治牛流行熱的措施。

2 結果

2.1 檢測結果

采 用 間 接ELISA法 對1 200份 血 清 樣 本 進行牛流行熱病毒抗體檢測分析。表1為陰田鄉(xiāng)2016～2021牛流行熱病毒抗體檢測統(tǒng)計表。從表1中可以看出，本次調查統(tǒng)計結果顯示陽性樣本共計59份，檢出陽性率4.92%。其中牛養(yǎng)殖散戶病毒抗體陽性檢出率為3.08%，規(guī)?；ｐB(yǎng)殖場陽性檢出率為1.83%。散戶場點與中小型規(guī)?；瘓鳇c牛流行熱病毒抗體檢出陽性率存在差異性，差異具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。這從側面反映出陰田鄉(xiāng)散戶養(yǎng)殖牛流行熱感染率高于規(guī)?；B(yǎng)殖[2]。

表1 陰田鄉(xiāng)2016～2021牛流行熱病毒抗體檢測統(tǒng)計表

2.2 空間分布分析

根據(jù)檢測結果，門源縣陰田鄉(xiāng)的散戶養(yǎng)牛場點和中小型規(guī)?；B(yǎng)牛場的牛流行熱檢出率存在差異，差異具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。這從側面反映出散戶養(yǎng)牛點的牛流行熱感染率高于中小型規(guī)模牛養(yǎng)殖場點。

陰田鄉(xiāng)位于門源縣東部，南部大部分地區(qū)為高山草甸類草場，北部則為平坦開闊的谷地。氣候屬高原冷溫半濕潤氣候區(qū)，具有雨熱同期，夏季炎熱多雨，冬季寒冷干燥的特點。全年最高氣溫7 ℃，最低氣溫-18 ℃，年降水量為445 mm。整體來看，陰田鄉(xiāng)牛群牛流行熱的空間部分差異不大。本次研究所采集的牛血清樣本中，各村均有檢測陽性率。

2.3 種間分布分析

本次研究選取的樣本包含奶牛、黃牛。表2為陰田鄉(xiāng)2016～2021牛流行熱奶牛、黃牛檢出陽性率統(tǒng)計表。從表2中可以看出奶牛與黃牛的牛流行熱病毒抗體陽性檢出數(shù)量為24和35，奶牛與黃牛陽性檢出率分別為2.00%、2.92%。奶牛與黃牛流行熱病毒抗體檢出陽性率存在差異，差異具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。這反映出黃牛流行熱感染率高于黃牛流行熱感染率。

表2 陰田鄉(xiāng)2016～2021牛流行熱奶牛、黃牛檢出陽性率統(tǒng)計表

3 討論

牛流行熱病毒是一種生命力強、傳染力強的病毒。該病毒傳播擴散迅速，短期內流行特征顯著。該病毒的傳播媒介為吸血昆蟲。牛群一旦有牛發(fā)生感染，即可在短期內造成多牛發(fā)病，呈現(xiàn)地方流行或大流行趨勢，部分疫區(qū)常常發(fā)生跳躍式流行或疫區(qū)與非疫區(qū)的地方性流行。牛感染牛流行熱病毒后一般經(jīng)過流行發(fā)病，雖然發(fā)病率高，但致死率相對較低。該病在臨床表現(xiàn)最急性型、急性型、慢性型三種病癥。其中以最急性型的死亡率最高，急性型、慢性型的致殘率更高。最急性型、急性型臨床表現(xiàn)突發(fā)高熱、流淚、流泡沫樣涎水、流鼻液，呼吸急迫，后期變僵硬，出現(xiàn)跛行，甚至于癱瘓。發(fā)病后體溫40～43.5 ℃，最急性型體溫可達42.5 ℃，急性型最高體溫達41.7 ℃，慢性型最高體溫達43.5 ℃。最高體溫一般出現(xiàn)在發(fā)病后3 d，發(fā)病2～3 d后高熱癥狀開始恢復。

在流行時間上，一般6～9月氣溫較高、降雨較多，且降雨較為集中的時段感染率最高。南方地區(qū)2～4月、8～9月多雨時段發(fā)生率較高，其中9月份大流行情況最為嚴重。在流行規(guī)律上，一般3～5年小流行一次，6～8年大流行一次。根據(jù)牛流行熱病毒的傳播媒介，高溫多雨時段蚊蟲大量繁殖，為牛流行熱病毒的傳播提供了良好的條件。因此，高溫多雨的時段牛流行熱的感染率最高。根據(jù)本文對陰田鄉(xiāng)牛流行熱的調查，陰田鄉(xiāng)感染牛流行熱的散戶點和規(guī)?；B(yǎng)殖場存在一些相同的特征：①養(yǎng)殖場環(huán)境臟、亂、差，糞污處理隨意；②養(yǎng)殖場消毒不全面、不徹底；③防疫免疫不及時；④牛舍基礎設施差，通風、采光條件差；⑤養(yǎng)殖戶缺乏防疫意識和專業(yè)系統(tǒng)的防疫知識，對牛流行熱認識不足；⑥治療方法單一，治療方式不當，過分依賴抗生素。這些特征從一定程度上反映了陰田鄉(xiāng)牛流行熱流行的原因。根據(jù)原因，預防牛流行熱就需要養(yǎng)殖戶加強對養(yǎng)殖場的環(huán)境管理、飼養(yǎng)管理。養(yǎng)殖戶要及時清除牛舍糞污，做好全場的全面徹底消毒工作，保持牛舍牛場的干燥潔凈。同時重視牛流行熱活疫苗的免疫接種，按照規(guī)定的接種流程、接種時間和接種操作，在每年5月份做好疫苗接種預防工作。每頭牛肌肉注射4 mL牛流行熱活疫苗。在治療上，建議采用中西藥結合治療，加強中藥對癥用藥，重視活血化瘀，才能起到標本兼治的效果。

本文調查研究，散戶養(yǎng)殖場點的感染率高于規(guī)模化養(yǎng)殖場點。黃牛、奶牛為主要的易感群體，其中黃牛的感染率高于奶牛。調查中感染牛流行熱的牛養(yǎng)殖場點的相似特征說明牛流行熱的流行與養(yǎng)殖管理和養(yǎng)殖人員的防疫準備有著緊密的關系。牛流行熱作為一種熱性急性傳染病，具有感染快、擴散快、季節(jié)性流行的特征。此外，牛流行熱具有典型的周期性流行特征。該病的小流行、大流行往往在新老疫區(qū)間隔發(fā)生。建議養(yǎng)殖戶根據(jù)牛流行熱病因及流行周期做好防疫準備，才能有效控制該病帶來的養(yǎng)殖損失。