亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        白茶萎凋過(guò)程中兒茶素合成關(guān)鍵酶基因表達(dá)分析

        2016-05-30 17:33:43陳靜俞瀅張丹丹陳丹楊國(guó)一陳桂信葉乃興
        關(guān)鍵詞:基因表達(dá)白茶

        陳靜 俞瀅 張丹丹 陳丹 楊國(guó)一 陳桂信 葉乃興

        摘要:【目的】研究白茶萎凋過(guò)程中茶多酚、兒茶素組分含量變化與其合成途徑中關(guān)鍵酶基因的動(dòng)態(tài)表達(dá),為優(yōu)化白茶的萎凋工藝提供參考依據(jù)?!痉椒ā恳圆煌螂A段的白茶為原料,分別采用福林酚(Folin-Ciocalten)比色法和高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定茶多酚、兒茶素組分含量的變化,并以實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)白茶萎凋過(guò)程中與兒茶素物質(zhì)代謝合成相關(guān)基因(PAL、C4H、CHS、CHI、F3'5'H、F3'H、F3H、DFR、LAR、ANS、ANR和UGGT)的相對(duì)表達(dá)量。【結(jié)果】白茶萎凋過(guò)程中茶多酚含量呈逐漸降低趨勢(shì),兒茶素組分中表兒茶素(EC)、沒(méi)食子兒茶素(GC)、表沒(méi)食子兒茶素(EGC)、表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)含量整體上呈先上升后下降的變化趨勢(shì),且均在萎凋歷時(shí)32 h出現(xiàn)最大值。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果表明,兒茶素生物合成途徑關(guān)鍵酶基因PAL、C4H、CHI、F3H、F3'H、F3'5'H、DFR、LAR、ANR和UGGT均在萎凋歷時(shí)32 h呈上調(diào)表達(dá),CHS基因則隨萎凋歷時(shí)的增加呈下調(diào)表達(dá)趨勢(shì),ANS基因表達(dá)在整個(gè)萎凋過(guò)程中呈先上升后下降的變化趨勢(shì),在萎凋歷時(shí)16 h達(dá)最大值。白茶萎凋過(guò)程中兒茶素合成途徑關(guān)鍵基因表達(dá)水平具有調(diào)控兒茶素生物合成的作用?!窘Y(jié)論】在白茶萎凋過(guò)程中,兒茶素生物合成途徑關(guān)鍵酶基因PAL、C4H、F3H、F3'H、DFR、LAR、ANR的表達(dá)與兒茶素組分單體EC、GC、EGC的積累規(guī)律基本一致,其最大值均出現(xiàn)在萎凋歷時(shí)32 h,因此在制茶時(shí)可適當(dāng)縮短萎凋時(shí)長(zhǎng),以提高白茶品質(zhì)。

        關(guān)鍵詞: 白茶;萎凋;兒茶素類(lèi);兒茶素合成關(guān)鍵酶;基因表達(dá)

        中圖分類(lèi)號(hào): S571.109 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):2095-1191(2016)08-1364-06

        Abstract:【Objective】The present experiment was conducted to investigate change of contents of tea polyphel and catechins components in withering process of white tea as well as dynamic expression of genes encoding key enzymes in their biosynthesis pathways, in order to provide theoretical basis for optimizing withering craft of white tea. 【Method】Using white tea at different stages of withering as materials, the contents of tea polyphel and catechins components in biosynthesis pathways of catechins were determined in leaves by Folin-phenol(Folin-Ciocalten) colorimetric method and HPLC. The expression quantities of key enzymes genes(PAL,C4H,CHS,CHI,F(xiàn)3'5'H,F(xiàn)3'H,F(xiàn)3H,DFR,LAR,ANS,ANR and UGGT) in biosynthesis pathways of catechins was determined by real-time quantitative PCR. 【Result】The results showed that, tea polyphel content was decreased gradually. The contents of catechins components including epicatechin(EC), gallocatechin(GC), epigallocatechin(EGC) and epigallocatechin gallate(ECG) first decreased and then increased, reaching maximum at 32 h after withering. The results of real-time PCR showed that, the expression quantity of key genes AL,C4H,CHI,F(xiàn)3H,F(xiàn)3'H、F3'5'H,DFR,LAR,ANR,UGGT in biosynthesis pathways of catechins increased at 32 h after withering, the expression quantity of CHS gene decreased as duration of withering increased. The expression quantity of ANS gene first decreased and then increased, reaching maximum at 16 h after withering. Furthermore, the expression quantities of genes encoding key enzymes played an important role in regulating biosynthesis pathways of catechins. 【Conclusion】In withering process of white tea, the expression of key genes PAL, C4H, F3H, F3'H, DFR, LAR, ANR in biosynthesis pathways of catechins is consistent with the accumulation law of catechins components(EC, GC, EGC), reaching maximum at 32 h after withering. Therefore, in order to improve quality of white tea, the duration of withering should be shortened in manufacture of tea.

        Key words: white tea; withering; catechins; key enzymes in biosynthesis pathways of catechins; gene expression

        0 引言

        【研究意義】萎凋是白茶品質(zhì)形成的關(guān)鍵工序。在白茶萎凋過(guò)程中,多酚類(lèi)物質(zhì)如兒茶素類(lèi)、黃酮類(lèi)、黃酮醇類(lèi)會(huì)發(fā)生變化,對(duì)茶葉色澤和滋味等品質(zhì)因子均有一定影響(宛曉春,2003)。茶多酚是影響白茶滋味、色澤的重要組成成分,其中又以?xún)翰杷仡?lèi)化合物含量最高(葉乃興,2010)。兒茶素含量隨著萎凋溫濕度的不同而發(fā)生變化,其原理可能還與兒茶素生物合成途徑上的調(diào)控基因有關(guān)。因此,有必要對(duì)比分析白茶加工過(guò)程中不同萎凋階段的茶多酚總量、兒茶素組分含量變化與其合成途徑中關(guān)鍵酶基因表達(dá)量的關(guān)系,為進(jìn)一步優(yōu)化白茶的萎凋工藝提供科學(xué)依據(jù)?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前,有關(guān)白茶凋萎的研究已有較多報(bào)道。尹軍峰(2007)采取室內(nèi)自然萎凋方式,低溫冷凍干燥固樣檢測(cè)茶多酚與兒茶素總量動(dòng)態(tài)變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者前期呈下降趨勢(shì),后期有所回升,即多種因素促使鮮茶葉凋萎過(guò)程主要化學(xué)成分呈現(xiàn)復(fù)雜的變化規(guī)律。周寒松等(2009)研究表明,在濕度70%、室溫22 ℃下萎凋48 h,白茶的失水與其理化變化相互協(xié)調(diào),進(jìn)而形成優(yōu)異的白茶品質(zhì)。王芳等(2011)研究表明,室內(nèi)自然萎凋過(guò)程中不同白茶品種的谷氨酸脫羧酶(GAD)活性整體變化趨勢(shì)基本一致,即萎凋前期的茶葉GAD活性隨谷氨酸(GLU)含量的增加而增強(qiáng),催化GLU轉(zhuǎn)化為γ-氨基丁酸(GABA),但隨著萎凋茶葉失水程度的增加,催化成GABA的能力下降,且GABA的降解速度大于生成速度,故其含量在萎凋中后期呈緩慢的下降趨勢(shì)。陳濟(jì)斌等(2012)通過(guò)研究節(jié)能日光萎凋設(shè)施及其對(duì)白茶的萎凋效果,發(fā)現(xiàn)變頻連續(xù)萎凋機(jī)可實(shí)現(xiàn)日光萎凋和自然萎凋的反復(fù)交替,且效果優(yōu)于自然萎凋。宋振碩等(2015)研究表明,隨著萎凋程度(鮮葉減重率)的加重,尤其是在減重率超過(guò)30%以后,一芽二、三葉和中小開(kāi)面二至四葉茶樣在二維空間的分布漸趨離散,即不同品種茶樣中游離氨基酸的組成模式愈加多樣。羅玲娜等(2016)研究表明,LED光照萎凋處理能實(shí)現(xiàn)萎調(diào)條件的可控性,并加快萎凋進(jìn)程,對(duì)穩(wěn)定茶葉的品質(zhì)具有重要意義,生產(chǎn)上可進(jìn)一步改進(jìn)和推廣LED光照萎凋技術(shù)。有關(guān)兒茶素合成途徑中相關(guān)酶基因的研究主要集中在:茶樹(shù)葉片不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期兒茶素和多酚類(lèi)的積累與多酚類(lèi)生物合成途徑中基因表達(dá)量的相關(guān)性(Mizutani et al.,2002),茶樹(shù)生長(zhǎng)發(fā)育期間兒茶素組分含量與酶基因表達(dá)的相關(guān)性(Singh and Christendat,2006),不同茶樹(shù)品種間兒茶素合成關(guān)鍵酶基因的差異表達(dá)分析(馬春雷等,2012)等?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】至今,有關(guān)兒茶素生物合成途徑中酶基因相對(duì)表達(dá)量的研究主要體現(xiàn)在不同茶樹(shù)組織上,而針對(duì)茶葉加工過(guò)程變化的研究報(bào)道甚少?!緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】從茶葉生化特性和分子水平兩方面對(duì)比白茶萎凋過(guò)程中茶多酚含量、組分的變化差異及兒茶素生物合成途徑關(guān)鍵酶基因的動(dòng)態(tài)表達(dá),以期為優(yōu)化白茶的萎凋工藝提供參考依據(jù)。

        1 材料與方法

        1. 1 試驗(yàn)材料

        供試鮮茶葉原料為福鼎大白茶秋梢一芽二葉,于2015年9月采自福建農(nóng)林大學(xué)南區(qū)教學(xué)茶園。白茶萎凋工藝:室內(nèi)自然萎凋溫度22~25 ℃,空氣相對(duì)濕度70%~75%,分別稱(chēng)取0.1000 g的鮮葉(萎凋處理0 h)和萎凋處理4、8、16、24、32、40、48 h的葉片,共8個(gè)樣品,設(shè)3次重復(fù),經(jīng)液氮速凍后置-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。表沒(méi)食子兒茶素(EGC,純度>99%)、表兒茶素(EC,純度>

        99%)、兒茶素(C,純度>99%)、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG,純度>99%)、表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG,純度>99%)等標(biāo)準(zhǔn)樣品購(gòu)自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司;多糖多酚植物總RNA提取試劑盒購(gòu)自天根生化科技(北京)有限公司;EasyScript One- Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix試劑盒、TransStart Tip Green qPCR SuperMix試劑盒購(gòu)自北京全式金生物技術(shù)有限公司。主要儀器設(shè)備有:Agilent1200高效液相色譜儀[安捷倫科技(中國(guó))有限公司]、TGL-16臺(tái)式高效速冷離心機(jī)(湘儀離心機(jī)儀器有限公司)和熒光定量PCR儀(美國(guó)Bio-Rad公司)。

        1. 2 試驗(yàn)方法

        1. 2. 1 茶多酚含量測(cè)定 參照GB/T 8313-2008,采用福林酚(Folin-Ciocalten)比色法進(jìn)行測(cè)定,每個(gè)樣品檢測(cè)設(shè)3次重復(fù),利用SPSS 19.0進(jìn)行差異顯著性分析與誤差分析。

        1. 2. 2 兒茶素總量及組分測(cè)定 稱(chēng)取0.2000 g已均勻磨碎的茶樣,置于70 ℃預(yù)熱的70%甲醇溶液(含2.0 g/L抗壞血酸)中浸提10 min,每隔5 min攪拌1次,3500 r/min離心10 min后吸取上清液,并重復(fù)以上步驟1次,合并提取液,冷卻后加入70 ℃預(yù)熱的70%甲醇溶液定容至10.0 mL,搖勻,過(guò)0.45 μm膜(何麗梅等,2014)。然后參照Z(yǔ)hao等(2014)的方法進(jìn)行兒茶素組分高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定,每個(gè)樣品設(shè)2次重復(fù)。

        1. 2. 3 茶樹(shù)鮮葉和萎凋葉總RNA提取及cDNA合成 根據(jù)多糖多酚植物總RNA提取試劑盒提取茶樹(shù)葉片及萎凋葉的總RNA,然后參照EasyScript One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix試劑盒說(shuō)明合成cDNA第一鏈。

        1. 2. 4 兒茶素類(lèi)合成關(guān)鍵基因表達(dá)分析 根據(jù)GenBank已發(fā)表的茶樹(shù)兒茶素類(lèi)合成關(guān)鍵酶基因序列,采用Primer Premier 5.0進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)(表1),選取β-Actin為內(nèi)參基因,按照TransStart Tip Green qPCR SuperMix試劑盒說(shuō)明進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)分析,再采用2-ΔΔCt分析各關(guān)鍵基因的相對(duì)表達(dá)量。每個(gè)樣品檢測(cè)設(shè)3次重復(fù)。

        2 結(jié)果與分析

        2. 1 白茶萎凋過(guò)程中茶多酚含量動(dòng)態(tài)變化

        白茶萎凋過(guò)程中,茶多酚在多酚氧化酶的作用下發(fā)生緩慢氧化,形成茶湯主要呈味成分。同時(shí),以?xún)翰杷貫橹黧w的多酚類(lèi)化合物受多酚氧化酶和過(guò)氧化物酶的催化,生成不同層次的氧化產(chǎn)物,最終形成白茶灰綠色澤(葉乃興,2010)。由圖1可以看出,白茶鮮葉的茶多酚含量較高,隨著萎凋歷時(shí)的增加,茶多酚含量發(fā)生平緩變化,呈逐漸降低趨勢(shì),但變化幅度不明顯;在茶多酚含量降低的同時(shí),兒茶素及其氧化產(chǎn)物的澀味減弱、醇和感增加,白茶主要呈味物質(zhì)形成。

        2. 2 白茶萎凋過(guò)程兒茶素組分含量動(dòng)態(tài)變化

        采用HPLC對(duì)白茶鮮葉、萎凋茶葉進(jìn)行兒茶素組分含量測(cè)定,結(jié)果(表2)表明,在白茶萎凋過(guò)程中,兒茶素總量(TCA)隨著萎凋歷時(shí)的增加呈先下降后上升再下降的變化趨勢(shì),萎凋歷時(shí)0、4、8、16、24、32、40、48 h的兒茶素總量分別為24.85、18.85、24.56、25.51、27.14、31.35、26.38和21.04 mg/g。就兒茶素單體而言,非酯型兒茶素EC、GC、EGC和酯型兒茶素ECG的含量均在萎凋歷時(shí)32 h達(dá)最高值,分別為3.71、2.28、0.83和3.35 mg/g,含量較低但相對(duì)穩(wěn)定;EGCG較其他組分的含量高,且EGCG單體在兒茶素總量中所占比重最高。以萎凋歷時(shí)32 h為例,EGCG、EC、ECG、GC、EGC和C分別占兒茶素總量的66.09%、11.83%、10.68%、7.21%、2.64%和1.21%。

        2. 3 白茶萎凋過(guò)程中兒茶素合成途徑關(guān)鍵基因的表達(dá)量變化

        采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)白茶萎凋過(guò)程中與兒茶素物質(zhì)代謝合成相關(guān)基因PAL、C4H、CHS、CHI、F3'5'H、F3'H、F3H、DFR、LAR、ANS、ANR和UGGT的相對(duì)表達(dá)量,從圖2可以看出,各目的基因在不同萎凋歷時(shí)的表達(dá)量差異明顯,其中與苯丙烷途徑相關(guān)的兩個(gè)關(guān)鍵酶基因(PAL和C4H)表達(dá)變化趨勢(shì)一致,表現(xiàn)為先下降后上升再下降的變化趨勢(shì),且均在萎凋歷時(shí)32 h的表達(dá)量最高。在催化非酯型兒茶素生物合成的酶類(lèi)中,CHS基因隨著萎凋歷時(shí)的增加,其表達(dá)量整體上呈下降趨勢(shì);CHI基因在整個(gè)萎凋過(guò)程中呈波動(dòng)式的變化趨勢(shì),萎凋歷時(shí)32 h達(dá)最大值;F3'5'H基因在萎凋歷時(shí)4 h的表達(dá)量與萎凋前基本持平,此后隨著萎凋歷時(shí)的增加,其表達(dá)量呈先下降后上升再下降的變化趨勢(shì);F3'H、F3H、DFR和LAR基因在白茶鮮葉中的表達(dá)量并不是最高,其最大值均出現(xiàn)在萎凋歷時(shí)32 h,而后表達(dá)量逐漸降低;ANS與ANR基因的變化趨勢(shì)存在明顯差異,其中,ANS基因表達(dá)在整個(gè)萎凋過(guò)程中呈先上升后下降的變化趨勢(shì),且在萎凋歷時(shí)16 h達(dá)最大值;ANR基因在萎凋后期呈上調(diào)表達(dá),在萎凋歷時(shí)32 h呈現(xiàn)最大值。UGGT是催化酯型兒茶素合成的酶類(lèi)之一,在白茶萎凋過(guò)程中,UGGT基因也在萎凋后期呈上調(diào)表達(dá),并在萎凋歷時(shí)32 h達(dá)最大值,之后緩慢下降。

        2. 4 白茶萎凋過(guò)程中兒茶素組分與相關(guān)基因表達(dá)量的相關(guān)性

        由表3可以看出,白茶萎凋過(guò)程中兒茶素組分與相關(guān)基因表達(dá)水平的相關(guān)系數(shù)在0.142~0.992。其中,C與PAL、CHS、F3'5'H、F3'H、ANS、UGGT基因表達(dá)量極顯著相關(guān)(P<0.01,下同),與C4H、F3H、ANR基因表達(dá)量顯著相關(guān)(P<0.05,下同);EC與PAL、C4H、CHI、F3'5'H、F3'H、ANS、ANR基因表達(dá)量極顯著相關(guān),與CHS、F3H、UGGT基因表達(dá)量顯著相關(guān);GC與PAL、C4H、CHI、F3'H、F3H、ANS、ANR、UGGT基因表達(dá)量極顯著相關(guān),與DFR、LAR基因表達(dá)量顯著相關(guān);EGC與C4H、CHS、CHI、F3'5'H、F3'H、ANS、ANR基因表達(dá)量極顯著相關(guān),與F3H、UGGT基因表達(dá)量顯著相關(guān);除F3'5'H、ANS基因外,ECG與其他基因的表達(dá)量均呈顯著或極顯著相關(guān);GCG與PAL、CHS、F3'5'H、LAR基因表達(dá)量極顯著相關(guān),與F3'H、DFR基因表達(dá)量顯著相關(guān);EGCG與PAL、C4H、CHI、F3H、DFR、LAR、ANS、ANR、UGGT基因表達(dá)量極顯著相關(guān),與F3'H基因表達(dá)量顯著相關(guān);除F3'5'H基因外,總兒茶素與其他基因的表達(dá)量均呈顯著或極顯著相關(guān)??梢?jiàn),白茶萎凋過(guò)程中兒茶素合成途徑關(guān)鍵基因表達(dá)水平具有調(diào)控兒茶素生物合成的作用。

        3 討論

        3. 1 白茶萎凋過(guò)程中生化成分的變化

        白茶鮮葉在萎凋過(guò)程中逐漸失水,細(xì)胞生物膜透性增加,多酚氧化酶和過(guò)氧化酶活性提高,多酚類(lèi)化合物緩慢氧化,其含量逐步降低。由于兒茶素的部分氧化和異構(gòu)化致使其組分比例發(fā)生明顯變化,這種變化有利于減輕茶湯的苦澀味,而使白茶滋味清醇(葉乃興,2010)。本研究結(jié)果表明,白茶鮮葉在萎凋過(guò)程中逐漸失水,多酚類(lèi)化合物發(fā)生緩慢氧化,非酯型兒茶素GC、EC、EGC和酯型兒茶素ECG的含量在萎凋歷時(shí)32 h達(dá)最大值,分別為3.71、2.28、0.83和3.35 mg/g,含量較低但相對(duì)穩(wěn)定;EGCG較其他組分的含量高,且EGCG單體在兒茶素總量中所占比重最高,與單育(2011)的研究結(jié)果一致,但兒茶素含量呈下降趨勢(shì),與其他組分變化不一致,具體原因有待進(jìn)一步研究。在白茶萎凋過(guò)程中還存在呼吸作用,此時(shí)多酚類(lèi)物質(zhì)的氧化還原處于平衡狀態(tài),與劉誼健等(2003)的研究結(jié)果一致。

        3. 2 白茶萎凋過(guò)程中基因表達(dá)量的變化

        PAL和C4H是苯丙烷代謝途徑的關(guān)鍵酶類(lèi),其中,PAL是調(diào)節(jié)植物初級(jí)代謝碳流向類(lèi)苯丙烷代謝途徑的酶類(lèi)。Singh等(2009)曾報(bào)道,茶樹(shù)在受干旱、創(chuàng)傷、赤霉素及脫落酸處理過(guò)程中,PAL基因的表達(dá)水平與兒茶素類(lèi)化合物的積累呈正相關(guān)。本研究結(jié)果表明,PAL基因在白茶萎凋歷時(shí)32 h呈上調(diào)趨勢(shì),與兒茶素類(lèi)化合物積累趨勢(shì)相吻合。C4H與PAL基因的變化趨勢(shì)一致,即共同調(diào)控苯丙烷途徑的酶基因,其積累規(guī)律可能對(duì)類(lèi)黃酮途徑具有影響。CHS也是茶樹(shù)兒茶素類(lèi)物質(zhì)生成合成的關(guān)鍵酶之一。CHS催化合成的柚皮查耳酮,經(jīng)CHI、F3H、DFR、ANS催化后生成花青素;ANR能催化花青素合成兩種表兒茶素類(lèi)(EC與EGC),繼而合成酯型兒茶素類(lèi)(ECG和EGCG)。

        在白茶萎凋過(guò)程中,不同萎凋歷時(shí)對(duì)茶樹(shù)兒茶素生物合成途徑上相關(guān)酶基因表達(dá)量的影響也不同。其中,PAL、C4H、CHI、F3'H、F3H、DFR、LAR、ANR等兒茶素生物合成相關(guān)酶基因表達(dá)量均在萎凋歷時(shí)32 h達(dá)最高值。與非酯型兒茶素生物合成相關(guān)的F3'H、F3H和LAR基因表達(dá)變化趨勢(shì)基本一致,但CHI和CHS基因的表達(dá)變化趨勢(shì)不同,可能與其催化機(jī)制差異有關(guān),具體原因有待進(jìn)一步研究。另外,DFR、ANS、ANR基因的表達(dá)變化趨勢(shì)與F3'H、F3H、LAR基因也不一致,但這3個(gè)關(guān)鍵酶基因的表達(dá)量相對(duì)較低,未影響到非酯型兒茶素的合成。

        3. 3 白茶萎凋過(guò)程中生化成分與基因表達(dá)量間的相關(guān)分析

        在白茶萎凋過(guò)程中,DFR、LAR、PAL、C4H、ANR基因的表達(dá)規(guī)律與兒茶素組分單體GC、EGC的積累規(guī)律相吻合,其原因可能是上述類(lèi)黃酮合成途徑的最終產(chǎn)物被酯化、氧化或其他的生化反應(yīng)消耗,而未生成兒茶素類(lèi)物質(zhì),與孫美蓮(2010)的研究結(jié)果一致。其中,DFR基因的表達(dá)量與總兒茶素積累量呈顯著相關(guān),進(jìn)一步說(shuō)明DFR是主導(dǎo)兒茶素合成的重要酶類(lèi)之一。ANR可催化花青素合成EC與EGC,其表達(dá)量可能對(duì)EC及EGC含量具有相關(guān)性,但EC與EGC的變化趨勢(shì)不一致,可能與其不穩(wěn)定性有關(guān),因?yàn)镋C可異構(gòu)化生成C,EGC可異構(gòu)化生成GC,且EC可經(jīng)羥基化生成EGC,但具體原因有待進(jìn)一步探究。

        4 結(jié)論

        在白茶萎凋過(guò)程中,兒茶素生物合成途徑關(guān)鍵酶基因PAL、C4H、F3H、F3'H、DFR、LAR、ANR的表達(dá)與兒茶素組分單體EC、GC、EGC的積累規(guī)律基本一致,其最大值均出現(xiàn)在萎凋歷時(shí)32 h,因此在制茶時(shí)可適當(dāng)縮短萎凋時(shí)長(zhǎng),以提高白茶品質(zhì)。

        參考文獻(xiàn):

        陳濟(jì)斌,金心怡,郝志龍,江麗萍,方守龍,劉素惠. 2012. 節(jié)能日光萎凋設(shè)施及其對(duì)白茶萎凋效果研究[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 28(19):171-177.

        Chen J B,Jin X Y,Hao Z L,Jiang L P,F(xiàn)ang S L,Liu S H. 2012. Research of sunlight withering room and its withering effect on white tea[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering,28(19):171-177.

        何麗梅,鄭德勇,葉乃興,葉小輝,趙峰,楊江帆. 2014. 白茶黃酮醇類(lèi)物質(zhì)的HPLC測(cè)定及水解工藝優(yōu)化[J]. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),43(6):579-584.

        He L M,Zheng D Y,Ye N X,Ye X H,Zhao F,Yang J F. 2014. HPLC determination and hydrolysis process optimization of flavonol substances of white tea[J]. Journal of Fujian Agricultural and Forestry University(Natural Science Edition),43(6):579-584.

        劉誼健,郭玉瓊,詹梓金. 2003. 白茶制作過(guò)程主要化學(xué)成分轉(zhuǎn)化與品質(zhì)形成探討[J]. 福建茶葉,(4):13-14.

        Liu Y J,Guo Y Q,Zhan Z J. 2003. Transformation of main chemical component and tea quality formation during the processing period of white tea[J]. Tea in Fujian,(4):13-14.

        羅玲娜,林永勝,周子維,郭佳星,李思偲,孫云,郭春芳. 2016. 不同 LED 光質(zhì)萎凋?qū)Π撞杵焚|(zhì)的影響[J]. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),45(3):262-268.

        Luo L N,Lin Y S,Zhou Z W,Guo J X,Li S C,Sun Y,Guo C F. 2016. Effect of different LED lights in withering on quality of white tea[J]. Journal of Fujian Agriculture and Forestry University(Natural Science Edition),45(3):262-268.

        馬春雷,姚明哲,王新超,金基強(qiáng),陳亮. 2012. 茶樹(shù)2個(gè)MYB轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 林業(yè)科學(xué),48(3):31-37.

        Ma C L,Yao M Z,Wang X C,Jin J Q,Chen L. 2012. Cloning and expression of two MYB transcription factors in tea plant(Camellia sinensis)[J]. Scientia Silvae Sinicae,48(3):31-37.

        單育. 2011. 茶樹(shù)酚類(lèi)物質(zhì)的生物合成及關(guān)聯(lián)合成酶基因的差異表達(dá)[D]. 合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué).

        Shan Y. 2011. The biosynthesis of polyphenols and the differential expression of relative genes in tea plant[Camellia Sinensis(L.) O. Kuntze][D]. Hefei:Anhui Agricultural University.

        宋振碩,王麗麗,陳鍵,楊軍國(guó),張應(yīng)根,陳林. 2015. 茶鮮葉萎凋過(guò)程中游離氨基酸的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律[J]. 茶葉學(xué)報(bào),56(4):206-213.

        Song Z S,Wang L L,Chen J,Yang J G,Zhang Y G,Chen L. 2015. Changes on free amino acids in fresh tea leaves du-

        ring withering[J]. Acta Tea Sinica,56(4):206-213.

        孫美蓮. 2010. 茶兒茶素生物合成相關(guān)基因表達(dá)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析[D]. 合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué).

        Sun M L. 2010. Gene expression of catechins biosynthesis in tea plant[Camellia Sinensis(L.) O. Kuntze] with real time fluorescence quantitative PCR[D]. Hefei:Anhui Agricultural University.

        宛曉春. 2003. 茶葉生物化學(xué)[M]. 第3版. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社.

        Wan X C. 2003. Tea Biochemistry[M]. The 3rd Edition. Beijing:China Agriculture Press.

        王芳,鄭德勇,楊江帆. 2011. 白茶萎凋過(guò)程中GAD和GABA形成的相關(guān)性研究[J]. 食品工業(yè),(8):81-83.

        Wang F,Zheng D Y,Yang J F. 2011. Study on correlation between GAD and GABA during withering of white tea[J]. The Food Industry,(8):81-83.

        葉乃興. 2010. 白茶:科學(xué)·技術(shù)與市場(chǎng)[M]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社.

        Ye N X. 2010. Science Technology and Maket of White Tea[M]. Beijing:China Agriculture Press.

        尹軍峰. 2007. 名優(yōu)綠茶鮮葉攤放過(guò)程主要化學(xué)成分變化規(guī)律及環(huán)境影響的研究[D]. 杭州:浙江大學(xué).

        Yin J F. 2007. Variation of main chemical components as well as influencing factors in fresh leaves of famous and excellent green-tea during spreading[D]. Hanzhou:Zhejiang University.

        周寒松,潘玉華,黃先洲. 2009. 白茶人工調(diào)溫調(diào)濕萎凋水分變化初探[J]. 茶葉科學(xué)技術(shù),(3):23-25.

        Zhou H S,Pan Y H,Huang X Z. 2009. Change of moisture in the witering of white tea by artificial temperature control[J]. Tea Science and Technology,(3):23-25.

        Mizutani M,Nakanishi H,Ema J,Ma S J,Noguchi E,Inohara-Ochiai M,F(xiàn)ukuchi-Mizutani M,Nakao M,Sakata K. 2002. Cloning of β-primeverosidase from tea leaves,a key enzyme in tea aroma formation[J]. Plant Physiology,130(4):2164-2176.

        Singh K,Kumar S,Rani A,Gulati A,Ahuja P S. 2009. Phenylalanine ammonia-lyase(PAL) and cinnamate 4-hydroxylase(C4H) and catechins(flavan-3-ols) accumulation in tea[J]. Functional & Intergrative Genomics,9(1):125-134.

        Singh S A,Christendat D. 2006. Structure of Arobidopsis dehydroquinate dehydratase-shikimate dehydrogene and implications for metabolic channeling in the shikimate pathway[J]. Biochemistry,45(25):7787-7796.

        Zhao F,Lin H T,Zhang S,Lin Y F,Yang J F,Ye N X. 2014. Simultaneous determination of caffeine and some selected polyphenols in Wuyi Rock Tea by high-performance liquid chromatography[J]. Journal of Agricultural and Food Chemi-

        stry,62(13):2772-2781.

        (責(zé)任編輯 蘭宗寶)

        猜你喜歡
        基因表達(dá)白茶
        繪本
        繪本
        繪本
        這只貓說(shuō)得好有道理
        意林(2019年10期)2019-06-03 16:37:12
        ANIMATING ‘IP’
        ANIMATING ‘IP’COMICS AND EMOJIS BECOME ENTERTAINMENT BRANDS
        低溫處理對(duì)斑馬魚(yú)CNSS系統(tǒng)應(yīng)激相關(guān)基因的影響
        抗菌肽對(duì)細(xì)菌作用機(jī)制的研究
        基因芯片在胃癌及腫瘤球細(xì)胞差異表達(dá)基因篩選中的應(yīng)用
        美洲大蠊提取液對(duì)大鼠難愈合創(chuàng)面VEGF表達(dá)影響的研究
        亚洲最新版无码AV| 色欲av伊人久久大香线蕉影院| 人与动牲交av免费| 欧性猛交ⅹxxx乱大交| 一本加勒比hezyo无码视频| 国产一区精品二区三区四区| 欧美乱妇高清无乱码免费| 欧美黑吊大战白妞| 日韩精品久久久一区| 日本在线中文字幕一区| 麻豆69视频在线观看| 亚洲va中文字幕无码毛片| 日本精品a在线观看| 啪啪视频免费看一区二区| 视频在线观看国产自拍| 免费无码一区二区三区蜜桃| 中文幕无线码中文字蜜桃| 精品亚洲不卡一区二区| 邻居人妻的肉欲满足中文字幕| 欧美人妻少妇精品久久黑人| 亚洲综合性色一区| 人妻风韵犹存av中文字幕| 亚洲国产精品一区二区毛片| 国产台湾无码av片在线观看| 久久无码人妻一区=区三区| 国产在线播放免费人成视频播放| 国产精品一区二区性色| 天天躁日日躁狠狠躁av| 正在播放淫亚洲| 国产3p一区二区三区精品| 中文字幕色av一区二区三区| 玖玖资源站无码专区| 在线亚洲精品国产成人二区| 美丽的小蜜桃在线观看| 国产美女在线精品免费观看| av无码精品一区二区乱子| 在线观看国产激情免费视频 | 日本精品少妇一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久秋霞| 日本精品极品视频在线| 国产熟女一区二区三区不卡|