張曉燕，楊 靜，沈 娜，洪 玲，黃 力，曾奎杰，梅 廣，鄧樹(shù)華，李滑滑

(湖南省糧油產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)中心//國(guó)家糧食-稻谷產(chǎn)后工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410000)

稻谷、玉米在儲(chǔ)藏過(guò)程中，脂肪在脂肪酶的作用下易發(fā)生水解和氧化，產(chǎn)生脂肪酸，隨著儲(chǔ)藏時(shí)間的延長(zhǎng)，脂肪酸也逐漸上升。不同的儲(chǔ)藏條件、不同的溫濕度，脂肪酸上升的速度也不同。一般而言，溫濕度越高，脂肪酸上升速度越快[1-4]。因此，脂肪酸值被確定為判斷稻谷、玉米儲(chǔ)存品質(zhì)的關(guān)鍵性指標(biāo)。

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法[5-6]中的樣品操作方法嚴(yán)謹(jǐn)，加液、移液均用單標(biāo)線(xiàn)移液管，準(zhǔn)確度得到保證，但是操作過(guò)程較繁雜，工作效率受到限制，而且操作過(guò)程中用到大量玻璃器具，檢驗(yàn)員清洗玻璃器具的工作量和勞動(dòng)強(qiáng)非常度大。急需一種既能保證準(zhǔn)確度，又能提升工作效率，還可以降低勞動(dòng)強(qiáng)度，且適合于大批量稻谷、玉米脂肪酸值操作方法。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備

3100型錘式旋風(fēng)磨，瑞典波通儀器集團(tuán)公司；PL602E/02型電子天平，日本島津公司；BLH-3280K型礱谷機(jī)，浙江伯利恒儀器設(shè)備有限公司；DE-M17J03008瓶口分液器(量程5～50 ml)、連續(xù)性分液器(量程0～25 ml)，德國(guó)普蘭德有限公司；HY-2型往復(fù)式振蕩器(100 r/min)，常州國(guó)華儀器設(shè)備有點(diǎn)公司；一次性塑料杯(200 ml)，購(gòu)于超市。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和溶液

無(wú)水乙醇(分析純)、95%乙醇(分析純)，上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；0.100 1 mol/L氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，北京海岸鴻蒙標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

樣品制備操作按國(guó)標(biāo)方法規(guī)定[5-6]執(zhí)行。

2.1 水分測(cè)定方法

制備好的脂肪酸值用樣品，按照GB 5009.3—2016 直接干燥法測(cè)定。

2.2 國(guó)標(biāo)方法

稻谷按照GB/T 20569—2006附錄A的方法進(jìn)行測(cè)定，玉米按照GB/T 20570—2015附錄A的方法進(jìn)行測(cè)定。

2.3 改進(jìn)方法[7-9]

準(zhǔn)確稱(chēng)取制備好的樣品10.00±0.50 g，于250 ml具塞磨口錐形瓶中，用0～50 ml瓶口分液器(已校準(zhǔn))加入50.00 ml無(wú)水乙醇，置往返式振蕩器上震蕩(稻谷10 min，玉米30 min)，振蕩頻率為100次/min。靜置1～2 min，濾紙過(guò)濾(棄去前5～6滴)至一次性透明塑料杯中。過(guò)濾好后用0～25 ml連續(xù)分液器(專(zhuān)用連續(xù)移液吸頭，已校準(zhǔn))吸取25.00 ml濾液于150 ml三角瓶中，用瓶口分液器加50 ml不含CO2的蒸餾水，滴加3～4滴指示劑，用0.01 mol/L的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至呈微紅色，30 s不褪色。

2.4 改進(jìn)方法精密度實(shí)驗(yàn)

選取脂肪酸值為23.8 mg/100 g的1份稻谷樣品和脂肪酸值為54.9 mg/100 g的1份玉米樣品，采用改進(jìn)方法，在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)稻谷、玉米樣品的脂肪酸值進(jìn)行10次平行測(cè)定，計(jì)算稻谷、玉米樣品脂肪酸值測(cè)定結(jié)果，分析其精密度。

2.5 改進(jìn)方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

選取脂肪酸值分別為18.0、22.0、30.0、37.0 mg/100 g左右的稻谷樣品各3份；脂肪酸值分別為45.0、55.0、65.0、78.0 mg/100 g左右的玉米樣品各3份，分別采用國(guó)標(biāo)方法和改進(jìn)方法測(cè)定其脂肪酸值結(jié)果，對(duì)比兩種方法測(cè)得的脂肪酸值結(jié)果。

3 結(jié)果與討論

3.1 國(guó)標(biāo)方法與改進(jìn)方法操作過(guò)程對(duì)比

詳細(xì)對(duì)比國(guó)標(biāo)方法與改進(jìn)方法操作過(guò)程，查找操作過(guò)程中的不同之處，分析總結(jié)改進(jìn)方法的優(yōu)點(diǎn)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 國(guó)標(biāo)方法與改進(jìn)方法操作過(guò)程對(duì)比及改進(jìn)方法的優(yōu)點(diǎn)

由表1可以看出，改進(jìn)方法操作過(guò)程中提取劑、水的加入由瓶口分液器代替國(guó)標(biāo)方法操作過(guò)程中的單標(biāo)線(xiàn)移液管和量筒；濾液的收集由一次性透明塑料杯代替比色管，同時(shí)省去漏斗；移取濾液用連續(xù)分液器代替單標(biāo)線(xiàn)移液管。改進(jìn)方法操作過(guò)程中省去大量移液管、比色管、漏斗、量筒等玻璃器具，不僅減輕了檢驗(yàn)員清洗玻璃器具的工作量和勞動(dòng)強(qiáng)度，還節(jié)約了檢測(cè)成本，縮短了工作時(shí)間，大大提升了工作效率。

3.2 改進(jìn)方法精密度

采用改進(jìn)方法分別對(duì)05號(hào)稻谷樣品和17號(hào)玉米樣品進(jìn)行10次平行測(cè)定，脂肪酸值測(cè)定結(jié)果及精密度分析見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn)，稻谷10次平行測(cè)定結(jié)果的極差最大為1.75 mg/100 g，玉米10次平行測(cè)定結(jié)果的極差最大為1.04 mg/100 g，均小于國(guó)標(biāo)規(guī)定的重復(fù)性臨界值2 mg/100 g，說(shuō)明改進(jìn)方法測(cè)定結(jié)果符合國(guó)標(biāo)方法中的重復(fù)性要求。稻谷脂肪酸值10次平行測(cè)定結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)偏差0.64 mg/100 g，變異系數(shù)為2.63%；玉米脂肪酸值10次平行測(cè)定結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.31 mg/100 g，變異系數(shù)為0.56%，說(shuō)明改進(jìn)方法具有較高的精密度。

表2 改進(jìn)方法測(cè)定選定樣品脂肪酸值結(jié)果 mg/(100 g)

3.3 改進(jìn)方法準(zhǔn)確度

采用國(guó)標(biāo)方法和改進(jìn)方法分別對(duì)選取的12份稻谷樣品(編號(hào)01～12)和12份玉米樣品(編號(hào)13～24)的脂肪酸值進(jìn)行測(cè)定，并比較兩種方法的測(cè)定結(jié)果，見(jiàn)表3。

表3 國(guó)標(biāo)方法和改進(jìn)方法測(cè)定選取樣品的脂肪酸值結(jié)果 mg/(100 g)

由表3可見(jiàn)，12個(gè)稻谷脂肪酸值測(cè)定結(jié)果誤差為0.1～1.0 mg/100 g，12個(gè)玉米脂肪酸值測(cè)定結(jié)果誤差為0.2～1.1 mg/100 g，測(cè)定結(jié)果誤差均小于國(guó)標(biāo)方法規(guī)定的重復(fù)性臨界值2 mg/100 g。用配對(duì)試驗(yàn)法進(jìn)行顯著性分析，可得稻谷樣品改進(jìn)方法與國(guó)標(biāo)方法測(cè)定脂肪酸值時(shí)t=0.210.05；玉米樣品改進(jìn)方法與國(guó)標(biāo)方法測(cè)定脂肪酸值時(shí)t=0.190.05，說(shuō)明改進(jìn)方法與國(guó)標(biāo)方法測(cè)定稻谷、玉米脂肪酸值無(wú)顯著性差異。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)國(guó)標(biāo)方法中操作過(guò)程進(jìn)行改進(jìn)，改進(jìn)方法的測(cè)定結(jié)果與國(guó)標(biāo)方法相比，有較高的準(zhǔn)確度、精密度；操作過(guò)程中省去大量移液管、比色管、漏斗、量筒等玻璃器皿，不僅減輕了檢驗(yàn)員清洗工作和勞動(dòng)強(qiáng)度，還節(jié)約了檢測(cè)成本，縮短了工作時(shí)間，大大提升了工作效率，非常適用于大批量樣品的測(cè)定，具有較高的推廣價(jià)值。