邱麗湞 吳 博 曾宇婷 劉宇平 劉鈺君

廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院1 健康管理中心 2 檢驗科 3 病理科，廣東省廣州市 511300

作為臨床上人類的高發(fā)癌癥，結(jié)直腸癌現(xiàn)今的發(fā)病機(jī)制還未明確，研究認(rèn)為多與不良生活環(huán)境和飲食習(xí)慣、遺傳和基因突變等多種因素協(xié)同作用導(dǎo)致。近年有研究結(jié)果提示，結(jié)直腸癌患者其病情的出現(xiàn)與發(fā)展均離不開體內(nèi)免疫系統(tǒng)的紊亂，同時還有研究結(jié)果證明患者機(jī)體內(nèi)的炎癥反應(yīng)亦可影響結(jié)直腸癌患者的病情[1]。作為調(diào)節(jié)患者機(jī)體內(nèi)免疫細(xì)胞中調(diào)節(jié)免疫的重要細(xì)胞，是細(xì)胞間傳遞信息的重要物質(zhì)[2]。本研究主要探討血清免疫相關(guān)因子、外周血T淋巴細(xì)胞亞群及自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)在結(jié)直腸癌患者中的水平變化，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取本院2019年1月—2020年12月收治的42例結(jié)直腸癌患者為腸癌組，慢性腸炎患者40例為良性組，另選同期35例健康體檢者為健康組。腸癌組男27例，女15例；平均年齡(55.62±8.89)歲。良性組男27例，女13例；平均年齡(54.67±8.21)歲。健康組男24例，女11例；平均年齡(53.74±7.82)歲。腸癌組均經(jīng)病理學(xué)確診，臨床病理分期(TNM)Ⅳ期6例，Ⅲ期8例，Ⅱ期17例，Ⅰ期11例。診斷標(biāo)準(zhǔn)：腸癌組的病理診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《腫瘤病理診斷規(guī)范(結(jié)直腸癌)》[3]，臨床分期參照AJCC癌癥分期指南第8版。良性組納入標(biāo)準(zhǔn)參照《內(nèi)科學(xué)》第8版中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：肝腎功能嚴(yán)重不全者；存在其他部位腫瘤者；生命體征不穩(wěn)定者等。所用標(biāo)本為常規(guī)診療完成后的剩余空腹靜脈血標(biāo)本，凍存時間不超過30d內(nèi)備用，均征得患者知情同意及符合醫(yī)院倫理要求。

1.2 方法 T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD3+、CD8+CD28-、CD8+以及外周血NK細(xì)胞含量采用流式細(xì)胞儀檢測。血清免疫相關(guān)因子指標(biāo)包括腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、干擾素-γ(IFN-γ)、白介素-22(IL-22)，白介素-8(IL-8)，取2ml外周血標(biāo)本以3 000r/min離心12min后取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定各指標(biāo)水平。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較三組受試者的T淋巴細(xì)胞亞群(CD4+、CD3+、CD8+CD28-、CD8+)及外周血NK細(xì)胞含量。(2)比較三組受試者血清免疫相關(guān)因子：(包括血清IL-22、TNF-α、IL-2、IL-8、IFN-γ)水平。(3)比較不同臨床分期結(jié)直腸癌患者T淋巴細(xì)胞亞群(CD4+、CD3+、CD8+CD28-、CD8+)及外周血NK細(xì)胞含量。(4)比較不同臨床分期的結(jié)直腸癌患者的血清免疫相關(guān)因子水平。

2 結(jié)果

2.1 各組T淋巴細(xì)胞亞群及外周血NK細(xì)胞含量比較 患者的外周血CD8+、CD8+CD28-含量均以腸癌組最高，良性組次之，健康組最低；NK細(xì)胞、CD3+、CD4+含量均以腸癌組最低，良性組次之，健康組最高；各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2 各組血清免疫相關(guān)因子指標(biāo)水平比較 血清TNF-α、IL-22、IL-8水平以腸癌組最高，良性組次之，健康組最低；而血清IL-2、IFN-γ水平以腸癌組最低，良性組次之，健康組最高；各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1三組T淋巴細(xì)胞亞群及外周血NK細(xì)胞含量比較

2.3 外周血NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞亞群含量在不同臨床分期結(jié)直腸癌患者間比較 患者外周血CD8+、CD8+CD28-含量顯示Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期；患者外周血NK細(xì)胞、CD3+、CD4+含量顯示Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期；各分期間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表2三組血清免疫相關(guān)因子水平比較

表3外周血NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞亞群含量在不同臨床分期結(jié)直腸癌患者間比較

2.4 不同臨床分期的結(jié)直腸癌患者血清免疫相關(guān)因子水平比較 患者血清TNF-α、IL-22、IL-8水平顯示Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期；IL-2、IFN-γ水平顯示Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期；各分期間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表4血清免疫相關(guān)因子水平在不同臨床分期結(jié)直腸癌患者間的對比

3 討論

早期結(jié)直腸癌并無明顯癥狀，嚴(yán)重時可致使患者生存周期縮短。有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展既與細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)失調(diào)密切相關(guān)，更與細(xì)胞本身所處的腫瘤微環(huán)境具有密切關(guān)系。構(gòu)成腫瘤細(xì)胞微環(huán)境的重要因素之一就包括腫瘤宿主的免疫狀況，而T淋巴細(xì)胞是能反應(yīng)腫瘤宿主免疫狀況的指標(biāo)之一。

T細(xì)胞中CD8+細(xì)胞對于機(jī)體內(nèi)的殺傷細(xì)胞(細(xì)胞毒T細(xì)胞)及免疫細(xì)胞(CD8+CD28-調(diào)節(jié)性T細(xì)胞)均具有一定的表達(dá)作用，CD3+是成熟T細(xì)胞，代表了人體的總免疫狀態(tài)；CD4+在機(jī)體內(nèi)多用于輔助機(jī)體進(jìn)行關(guān)于腫瘤的免疫性問答[4-5]。NK細(xì)胞同樣作用于抗腫瘤的免疫問答，其可通過殺傷腫瘤細(xì)胞從而發(fā)揮抗腫瘤作用，當(dāng)其水平越低則對患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的作用越弱，從而致使結(jié)直腸癌患者病情加重。本研究結(jié)果顯示，腸癌組外周血CD8+CD28-、CD8+含量較健康組和良性組相比更高，NK細(xì)胞、外周血CD3+、CD4+含量則較低，TNMⅠ～Ⅳ期結(jié)直腸癌患者外周血CD8+、CD8+CD28-含量均逐漸升高，NK細(xì)胞、CD3+、CD4+含量均逐漸下降，提示檢測機(jī)體T淋巴細(xì)胞可輔助預(yù)測及診斷結(jié)直腸癌患者的病情，進(jìn)而為臨床治療提供依據(jù)，與張帆[6]研究結(jié)果一致。IFN-γ可通過增強機(jī)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞對應(yīng)標(biāo)記抗體的攝取功能，還可通過提升抗原呈遞細(xì)胞的功能，從而產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)作用。IL-22主要由CD4+細(xì)胞中的Th22細(xì)胞分泌的細(xì)胞免疫因子，可通過活化分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展，因此當(dāng)機(jī)體內(nèi)IL-22水平過高時可與相關(guān)受體結(jié)合轉(zhuǎn)導(dǎo)活化信號，促使機(jī)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的增殖分化，致使結(jié)直腸癌患者病情加重。IL-8是Th2細(xì)胞克隆分泌，可抑制Th1細(xì)胞對IFN-γ和IL-2的合成和分泌，目前發(fā)現(xiàn)，其與支氣管原位癌、肺癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，腸癌組血清TNF-α、IL-22、IL-8水平高于良性組和健康組，血清IL-2、IFN-γ水平則較低，結(jié)直腸癌患者TNMⅠ～Ⅳ IFN-γ、IL-2水平均逐漸下降，血清TNF-α、IL-8、IL-22水平則逐漸升高，提示檢測機(jī)體免疫相關(guān)因子可有效預(yù)測及診斷結(jié)直腸癌患者的病情嚴(yán)重程度，與郭小艷[7]研究結(jié)果一致。

綜上所述，NK細(xì)胞、CD3+、CD4+含量和血清IL-2、IFN-γ水平越低；外周血CD8+、CD8+CD28-含量和血清TNF-α、IL-22、IL-8水平越高，均提示患者發(fā)生結(jié)直腸癌的可能性越大，臨床可通過檢測外周血NK細(xì)胞、CD3+、CD4+、CD8+、CD8+CD28-含量及血清TNF-α、IL-22、IL-8、IL-2、IFN-γ水平的變化對結(jié)直腸癌患者的病情進(jìn)行有效的預(yù)測及診斷，有利于在該病初期即進(jìn)行相應(yīng)的有效干預(yù)，可能對提高結(jié)直腸癌患者預(yù)后具有積極的臨床作用和意義。