童蘭庭，力曉涵（通信作者），王建平，范婷

南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心 （江蘇南京 210011）

血細(xì)胞分析是血液學(xué)檢驗(yàn)的一個(gè)常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，其中的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比是臨床所關(guān)注的重點(diǎn)之一。白細(xì)胞分為粒細(xì)胞（granulocyte，GRAN）、淋巴細(xì)胞（lymphoma，L）、單核細(xì)胞（monocyte，M），其中粒細(xì)胞又分為中性粒細(xì)胞（neutrophil，N）、嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophil，E）、嗜堿性粒細(xì)胞（basophil，B）。目前，全自動(dòng)五分類的血細(xì)胞分析儀被廣泛應(yīng)用于臨床血細(xì)胞的檢測(cè)中。本實(shí)驗(yàn)室采用的是日本希森美康（Sysmex）公司的XN 系列全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，型號(hào)分別為XN-350、XN-550 和XN-1800。全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比具有準(zhǔn)確、快捷的優(yōu)點(diǎn)，但仍然不能完全替代血涂片手工顯微鏡鏡檢（手工鏡檢）[1-2]。本研究隨機(jī)選取2020 年8 月的50 份血常規(guī)標(biāo)本，比較XN 系列血細(xì)胞分析儀與手工鏡檢在白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

收集2020 年8 月門(mén)診及病房的血常規(guī)標(biāo)本50 份（每天10 份，連續(xù)收集5 d）。

1.2 儀器

日本希森美康（Sysmex）公司開(kāi)發(fā)的XN-350（儀器1）、XN-550（儀器2）、XN-1800（儀器3）血細(xì)胞分析儀；奧林巴斯CX-21 光學(xué)顯微鏡。

1.3 試劑

手工鏡檢試劑為珠海貝索生物技術(shù)有限公司的瑞氏-吉姆薩染色液（A 液）和pH 6.8磷酸鹽緩沖液（B 液），生產(chǎn)批號(hào)C200603。

儀器1與儀器2采用的試劑為儀器配套的CELLPACK DCL 全血稀釋液、SULFOLYSER 溶血?jiǎng)?、Lysercell WDF（WDF 溶血?jiǎng)luorcell WDF（WDF 染色液）、CELLCLEAN AUTO 清洗液。

儀器3采用的試劑為儀器配套的CELLPACK DCL 全血稀釋液、SULFOLYSER 溶血?jiǎng)?、Lysercell WDF（WDF 溶血?jiǎng)luorcell WDF（WDF 染色液）、Lysercell WNR（WNR 溶 血 劑）、Fluorcell WNF（WNF 染色液）、Fluorcell PLT（PLT 熒光染色液）、CELLPACK DFL 全血稀釋液以及低值血小板（platelet，PLT）檢測(cè)專用CELLCLEAN AUTO清洗液。

1.4 檢測(cè)方法

由專業(yè)技術(shù)人員按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序雙盲法分別做儀器檢測(cè)和手工鏡檢。（1）儀器檢測(cè)：新鮮全血標(biāo)本分別在每臺(tái)血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比檢測(cè)（自動(dòng)進(jìn)樣架模式）。（2）手工鏡檢：每份標(biāo)本制作血涂片做瑞氏染色后，遵循《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]對(duì)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比進(jìn)行手工鏡檢。

1.5 觀察指標(biāo)

比較XN 系列血細(xì)胞分析儀與手工鏡檢的檢測(cè)結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS16統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以中位數(shù)（最小值～最大值）表示數(shù)據(jù)，采用兩關(guān)聯(lián)樣本非參數(shù)檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)r反映關(guān)聯(lián)性水平（r＜0.4則可認(rèn)為相關(guān)性較差，0.4≤r＜0.6為一般相關(guān)，r≥0.6為相關(guān)性較好），P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 儀器檢測(cè)與手工鏡檢結(jié)果比較

儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；3種型號(hào)血細(xì)胞分析儀的L%、N%、E%、B%及儀器1的M%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 儀器檢測(cè)與手工鏡檢結(jié)果比較（%）

2.2 相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，3種型號(hào)血細(xì)胞分析儀的L%、M%、N%、E%和儀器1的B%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果存在一定相關(guān)性（r均≥0.4，P＜0.05）；而儀器2、儀器3的B%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性較差，見(jiàn)表2。

表2 儀器檢測(cè)與手工鏡檢結(jié)果的相關(guān)性分析

3 討論

全自動(dòng)血液分析儀目前被廣泛應(yīng)用于各級(jí)醫(yī)院檢驗(yàn)科，本實(shí)驗(yàn)室的XN 系列全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀采用的是通過(guò)電阻抗法、比色法、流式激光散射技術(shù)、核酸熒光染色技術(shù)，通過(guò)側(cè)向散射光、側(cè)向熒光信號(hào)和前向散射光，分別獲得反映細(xì)胞體積大小、RNA 及DNA 含量多少、細(xì)胞內(nèi)核的形狀及有無(wú)顆粒存在等信息；該系列儀器不僅能獲得準(zhǔn)確的白細(xì)胞五分類結(jié)果，也可以根據(jù)核酸含量，得到未成熟粒細(xì)胞的參數(shù)，同時(shí)還可以進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及提供未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)；此外，該儀器可進(jìn)行核酸熒光染色，其PLT 計(jì)數(shù)結(jié)果更加可靠。

XN-1800是XN 系列的新機(jī)型，該型號(hào)儀器在提高原有儀器性能的基礎(chǔ)上，可通過(guò)試劑反應(yīng)、信號(hào)處理、分析算法的最優(yōu)化方法檢出白細(xì)胞分類（WDF 通道）和異常細(xì)胞（WPC 通道），并提高報(bào)警信息（IP 信息）性能。但該型號(hào)儀器在白細(xì)胞分類特別是異常細(xì)胞的檢出性能方面也與其他類型儀器存在同樣的局限，即存在一定的假陽(yáng)性率和假陰性率，并不能完全表現(xiàn)出受檢標(biāo)本的血細(xì)胞形態(tài)特征，從而造成準(zhǔn)確性降低，尤其在某些疾病造成血細(xì)胞形態(tài)改變時(shí)，單純依靠?jī)x器檢測(cè)往往會(huì)造成漏診或者誤診。

手工鏡檢是血液檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。由于目前臨床只有白細(xì)胞計(jì)數(shù)商品校準(zhǔn)物，尚無(wú)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比商品校準(zhǔn)物，采用手工鏡檢測(cè)定結(jié)果對(duì)血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行校準(zhǔn)和驗(yàn)證，是保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的前提[4]。本研究結(jié)果顯示，儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；3種型號(hào)血細(xì)胞分析儀的L%、N%、E%、B%及儀器1的M%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。這可能是由于血細(xì)胞分析儀在識(shí)別白細(xì)胞形態(tài)方面仍存在一定的限制，尤其會(huì)將L 分類到M，造成M%假性增高[5-6]。Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，3種型號(hào)血細(xì)胞分析儀的L%、N%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性最好（r≥0.9），E%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性一般（0.4≤r＜0.6），儀器1的M%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性一般（0.4≤r＜0.6），而儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性較好（r≥0.6），儀器1的B%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性一般（0.4≤r＜0.6），而儀器2、儀器3的B%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性較差（r＜0.4）。這可能與血液中B 的含量較少及該型號(hào)儀器的檢測(cè)原理（如該儀器有WNR 通道能計(jì)數(shù)B 和有核紅細(xì)胞）有關(guān)。因此，為使血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果更加可靠，雖然手工鏡檢耗時(shí)，但其對(duì)細(xì)胞形態(tài)的識(shí)別是目前血細(xì)胞分析儀無(wú)法比擬的，同時(shí)手工鏡檢也能消除儀器對(duì)特殊病例（如血液病）標(biāo)本檢驗(yàn)的局限性，即存在一定的假血細(xì)胞形態(tài)特征，僅依賴儀器檢測(cè)會(huì)使準(zhǔn)確性降低，往往造成漏診或者誤診，但同時(shí)進(jìn)行手工鏡檢則可提高特殊少見(jiàn)細(xì)胞的檢出率。

綜上所述，雖然儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果存在差異，且儀器2、儀器3的B%與手工鏡檢檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性較差，但考慮到外周血中M 與B 含量較少，且XN 系列血細(xì)胞分析儀在L%、N%、E%的檢測(cè)中具有良好的性能，因此XN 系列血細(xì)胞分析儀適合大批量標(biāo)本的快速檢測(cè)，日常工作中可與手工鏡檢結(jié)合，同時(shí)應(yīng)定期對(duì)儀器的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)百分比檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行校準(zhǔn)，以確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性。