吳思慧 周旭林 黃文康 徐岷

1.江蘇大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212000；2.江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院消化科，江蘇鎮(zhèn)江 212000

隨著對腫瘤細胞的研究深入，越來越多的研究證實增加氨基酸和葡萄糖的消耗是惡性腫瘤細胞的特征[1]，L 系統(tǒng)在腫瘤細胞負責(zé)營養(yǎng)物質(zhì)的運輸，主要運輸中性氨基酸，而L 型氨基酸運載體1（L-type amino acid transporter 1，LAT1），在其中是不可或缺的一種分子。根據(jù)研究，LAT1 往往在胚胎組織和腫瘤細胞中表達，并且參與細胞的增殖過程[2]。LAT1 與程序性細胞死亡1 配體1（programmed cell death 1 ligand 1，PD-L1）協(xié)同作用于肺癌細胞，增強肺癌細胞干性，從而促進肺癌細胞的增殖，并且相比于非耐藥肺癌細胞，LAT1 在對培美曲塞耐藥的肺癌細胞中顯著上調(diào)[3]，隨著LAT1 在各類腫瘤細胞和臨床標(biāo)本中被發(fā)現(xiàn)，LAT1對腫瘤發(fā)生發(fā)展的影響及其機制受到了廣泛的關(guān)注及研究。本研究采用meta 分析方法，對既往臨床研究進行綜合分析處理，探討LAT1 與實體腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索

兩名作者分別獨立對Medline/PubMed、EMbase、EBSCO、The Cochrane Library、Springerlink、Web of Science 核心合集數(shù)據(jù)庫、Wiley Onlinelibary 及中國知網(wǎng)和Cochrane 臨床對照試驗中心注冊數(shù)據(jù)庫進行文獻檢索，文獻檢索時間為建庫至2021 年5 月，英文的檢索單詞有L-type amino-acid transporter 1、LAT1、cancer 及相關(guān)同義詞。中文檢索詞包括L 型氨基酸運載體1、腫瘤及相關(guān)同義詞。

1.2 文獻選入標(biāo)準

①文獻中患者臨床病理資料完整，腫瘤診斷明確；②病理組織中的LAT1 已進行表達檢測；③文獻提供足量的病例數(shù)；④文獻需包含LAT1 表達與腫瘤臨床病理特征之間關(guān)系的相關(guān)研究，尤其是腫瘤轉(zhuǎn)移。

1.3 排除標(biāo)準

①研究非腫瘤患者的文獻；②采用動物模型或細胞系的研究；③綜述、meta 分析、個案病例報告等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用RevMan 5.4 軟件對文獻偏倚風(fēng)險進行評價，并對有相同結(jié)局指標(biāo)的文獻進行統(tǒng)計學(xué)分析。二分類資料效應(yīng)量采用比值比（OR）表示，用95%CI，OR ＞1，P ＜0.05 表示LAT1 為導(dǎo)致腫瘤預(yù)后差的各項研究指標(biāo)的危險因素，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義。采用I2檢驗對研究結(jié)果行異質(zhì)性檢驗，統(tǒng)計學(xué)同質(zhì)性（I2<50%，P ＞0.10），采用固定效應(yīng)模型分析；異質(zhì)性（I2≥50%，P ≤0.10），采用隨機效應(yīng)模型分析。若異質(zhì)性過大且無法分析其來源，則僅描述性分析。以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究文獻收集情況及質(zhì)量評價

根據(jù)文獻納入和排除標(biāo)準，最終納入15篇[4-18]，其中均為英文文獻，涉及患者1 786 例（圖1）。所篩選的文獻質(zhì)量見圖2。

圖1 文獻篩選流程圖

圖2 納入研究的風(fēng)險偏倚評估

表1 納入研究的基本特征

2.2 meta 分析結(jié)果

2.2.1 LAT1 陽性與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 8 篇文獻[4-5,8-9,13,15-17]，共1 035 例患者。對LAT1 表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進行了報道對比，其中6 篇文獻[4-5,13,15-17]對皮膚黑色素瘤、胰腺癌、非小細胞肺癌、肺多形性癌、乳腺癌進行了相關(guān)病例研究，行異質(zhì)性分析I2=49%，P=0.08，異質(zhì)性較小，采用固定效應(yīng)模型分析，行meta 分析結(jié)果示LAT1 表達對于以上所述腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為危險因素，有顯著關(guān)系（OR=2.03，95%CI：1.44～2.86，P ＜0.000 1），而將結(jié)腸癌作為亞組進行分析[8-9]，行異質(zhì)性分析I2=92%，P=0.000 4，異質(zhì)性較大（圖3），此次meta 分析對LAT1 在結(jié)腸癌患者中腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響意義不大。

圖3 腫瘤患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與L 型氨基酸運載體1表達關(guān)系的森林圖

2.2.2 LAT 陽性與腫瘤血管侵犯的關(guān)系10 篇文獻[4-6,8-12,14,18]（共1 226 例患者）對LAT1 表達與血管侵犯進行了報道，其中1 篇文獻[11]對大細胞肺癌與小細胞肺癌均進行了報道。其中8 篇文獻[4-6,10-12,14,18]分別對胰腺癌、非小細胞及小細胞肺癌、大細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、肝細胞癌、舌癌進行了相關(guān)研究，行異質(zhì)性分析I2=37%，P=0.13，異質(zhì)性較小，采用固定效應(yīng)模型分析。meta 分析結(jié)果示，LAT1 表達對于以上所述腫瘤的血管侵犯為危險因素，有顯著關(guān)系（OR=2.92，95%CI：2.16～3.96，P ＜0.000 01），而將結(jié)腸癌作為亞組進行分析[8-9]，行異質(zhì)性分析I2=89%，P=0.002，異質(zhì)性較大（圖4），此次meta 分析對LATI 在結(jié)腸癌患者中對其腫瘤血管侵犯的影響意義不大。

圖4 腫瘤患者血管侵犯與L 型氨基酸運載體1 表達關(guān)系的森林圖

2.3 發(fā)表偏倚及敏感性分析

分別納入上述研究的文獻均超過8 篇，漏斗圖顯示各因素的發(fā)表偏倚除去亞組外均較小，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與LAT1 表達關(guān)系的漏斗圖見圖5，血管侵犯與LAT1 表達關(guān)系的漏斗圖見圖6，本研究在LAT1 表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和淋巴管侵犯meta 分析中，均表現(xiàn)出一定的偏倚，這可能是因為本研究納入的文獻所使用的樣本例數(shù)偏少或發(fā)表本身所具有的偏倚性，可待相關(guān)病例研究更新后再行分析。

圖5 腫瘤患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與L 型氨基酸運載體1 表達關(guān)系的漏斗圖

圖6 腫瘤患者血管侵犯與L 型氨基酸運載體1 表達關(guān)系的漏斗圖

3 討論

腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者預(yù)后差的主要原因之一，本研究對多種實體腫瘤的LAT1 的表達與其相應(yīng)的轉(zhuǎn)移方式進行了meta 分析，重點包括了實質(zhì)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和血管侵犯。在本研究中，結(jié)果提示在多數(shù)腫瘤中，LAT1 的高表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯均具有顯著關(guān)系。值得注意的是，在結(jié)腸癌患者中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯與LAT1 表達的meta 分析異質(zhì)性過大，提示分析無意義，可能是由于結(jié)腸癌患者的樣本數(shù)過少、納入文獻不足。由此本研究得出結(jié)論，對于多數(shù)實體腫瘤，LAT1 的高表達與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，血管侵犯有一定關(guān)系。在既往研究中，LAT1 也被報道與腫瘤轉(zhuǎn)移存在一定關(guān)系，LATI 過表達被認為是癌癥腦轉(zhuǎn)移的共同特性[19]，除此以外，多數(shù)腫瘤的轉(zhuǎn)移灶中可以發(fā)現(xiàn)LAT1 的表達高于原發(fā)灶，如胃癌[20]，卵巢癌[21]。在膽管癌細胞系中，通過對LAT1 進行干擾敲減，可以下調(diào)4F2hc 在細胞中的表達，并隨后下調(diào)ERK1/2 信號通路以及磷酸化[22]。在胃癌中，LAT1 是CRKL 蛋白的下游靶點之一，通過在細胞系中對CRKl 的表達進行干擾，會下調(diào)LAT1 的表達并進一步干擾胃癌細胞的轉(zhuǎn)移能力[23]。LAT1 在腫瘤血管生成中是一個新的關(guān)鍵角色，其調(diào)節(jié)增殖、翻譯和促血管生成VEGF-A信號，治療性抑制LAT1 可能為增強抗血管生成治療提供一個理想的選擇，從而抑制腫瘤血行轉(zhuǎn)移的能力[24]。

綜上，本研究探討了LAT1 的表達與實體腫瘤中轉(zhuǎn)移因素的關(guān)系，通過統(tǒng)計學(xué)的分析，顯示LAT1表達與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴管侵犯和血管侵犯之間存在一定的關(guān)系，提示LAT1 是多種實體腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的促進因素之一，提示干擾或抑制LAT1 表達有望抑制腫瘤轉(zhuǎn)移或減緩許多腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的速度，從而改善腫瘤患者的預(yù)后。