樸凱偉，趙玉龍，崔明禮，陳禹宏，顧鑫

（遼寧省撫順市現代農業(yè)及扶貧開發(fā)促進中心，遼寧 撫順 113006）

遼細辛又稱細參、東北細辛等，為馬兜鈴科，細辛屬多年生草本植物，為常用中藥，具有解表散寒、祛風止痛、通竅、溫肺化飲等功效，可用于治療風寒感冒、鼻塞流涕、痰飲喘咳、風冷頭痛、風濕痹痛等。

遼細辛生長周期較長，生長期病害發(fā)生嚴重，難以控制[1]。傳統(tǒng)繁育方式速度慢，無法滿足市場需求，可利用組培快繁技術，在較短時間內達到了高效誘導外植體分化增殖的目的，在保存母體優(yōu)良性狀和遺傳性狀穩(wěn)定的同時，提高了種苗的抗病性能和繁殖效率[2]。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗地點

撫順市園藝科學研究所組培快繁試驗室。

1.2 試驗材料及試驗方法

1.2.1 試驗材料選取。晴朗天氣，取遼細辛帶芽根狀莖，剪成2～3 cm 節(jié)段，洗去表面泥土后流水沖洗30 min，置于超凈工作臺中，用70%酒精消毒20 s 后，再用0.1%HgCl2消毒5～8 min，無菌水沖洗5 次后，將莖段兩端切除后接種于初代培養(yǎng)基中。

1.2.2 建立無菌系初代培養(yǎng)。初代培養(yǎng)基以MS 為基礎培養(yǎng)基，附加濃度為1.0～3.0 mg/L 的6-BA、濃度為0.3 mg/L的NAA、蔗糖30 g/L、瓊脂7 g/L，pH 值6.8，放置在光照培養(yǎng)室中培養(yǎng)[3]。每天光照14 h，照度2000 lx，溫度控制在24～26℃，觀察培養(yǎng)效果。

1.2.3 繼代培養(yǎng)及不定芽誘導。初代培養(yǎng)的遼細辛頂端長出新芽、基部膨脹生長出淺綠色愈傷組織后，切取愈傷組織接種到以MS 為基礎培養(yǎng)基，附加濃度為1.0～3.0 mg/L 的6-BA和濃度為0.3 mg/L 的NAA 進行繼代培養(yǎng)。培養(yǎng)到一定數量后再接種到以MS 為基礎培養(yǎng)基，附加濃度為0.5～1.5 mg/L 的6-BA 和濃度為0.1～0.2 mg/L 的NAA 的誘導培養(yǎng)基中誘導不定芽。培養(yǎng)條件如上，觀察愈傷組織分化狀況。

1.2.4 生根培養(yǎng)。遼細辛試管苗生長到2.5 cm 左右并附有3～4 片葉片時，接種到以1/2MS 為基礎培養(yǎng)基，附加濃度0.5～1.0 mg/L 的IBA、蔗糖20 g/L、瓊脂7 g/L、pH 值6.8的生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)條件如上，觀察遼細辛試管苗生根狀況。

2 結果與分析

2.1 初代培養(yǎng)中生長調節(jié)劑對遼細辛愈傷組織誘導的影響

接種1 周后開始萌動，頂部長出新芽；2 周后新芽基部開始膨大，隨后生長出淺綠色愈傷組織；3 周后愈傷組織繼續(xù)生長有少量芽眼冒出。結果詳見表1，可知當NAA 濃度同為0.3 mg/L、6-BA 濃度為2.5 mg/L 時，遼細辛愈傷組織萌發(fā)率較高，達到85%，愈傷組織萌發(fā)量多，質量好。

表1 不同處理愈傷組織萌發(fā)情況

2.2 生長調節(jié)劑對遼細辛不定芽誘導的影響

接種1 周后愈傷組織膨大并不斷分化，2 周后愈傷組織表面出現淺綠色突起的芽點，3 周后芽點逐漸形成不定芽，4 周后每塊愈傷組織上的不定芽數量達到4～6 個即可轉接。結果詳見表2，可知當培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA時，增值平均數量為5.5，不定芽生長健壯，葉片數量多，長速快，是較有利于遼細辛不定芽誘導的激素組合。

表2 不同處理遼細辛不定芽誘導情況

2.3 生長調節(jié)劑對遼細辛生根影響

接種1 周后，基部出現白色根點；3 周后根長可長到2～3 cm，根數可達2～5 根，即可移栽馴化了。結果詳見表3。由表3 可知，當IBA 濃度為0.4 mg/L 時，生根率為90%，每株生根數達到5.0 條，平均根長2.5 cm，所生根較粗、堅韌、質量好，1/2MS+0.4 mg/LIBA+20 g/L 蔗糖為遼細辛較適生根培養(yǎng)基。

表3 不同處理遼細辛生根情況

3 結論

試驗結果表明，利用組織培養(yǎng)方式，通過根狀莖誘導愈傷組織從而進一步誘導不定芽，可快快遼細辛種苗繁育速度。使用MS+2.5 mg/L6-BA+0.3 mg/LNAA 的培養(yǎng)基誘導遼細辛愈傷組織效果較好。以MS+1.0mg/L6-BA+0.1 mg/LNAA 為培養(yǎng)基能更好地誘導出遼細辛的不定芽，是試驗篩選出的繼代增殖培養(yǎng)基。生根試驗表明，使用1/2MS+0.4 mg/LNAA+20 g/L蔗糖，生根率達到90%，每株平均生根數5.0 條，平均根長2.5 cm，為較適合遼細辛生根的培養(yǎng)基。