鄭汝蕓，羅鵬飛，舒 展*，葉勒肯·托留根，古麗孜亞·卡肯，呂雙燕

（1 阿勒泰地區(qū)動物疾病控制與診斷中心，新疆 阿勒泰 836500；2 阿勒泰地區(qū)畜牧工作站，新疆 阿勒泰 836500）

布魯氏菌?。˙rucellosis）是由布魯氏菌屬（Brucella）細菌侵入機體引起的一種以流產(chǎn)和繁殖障礙為特征的慢性人畜共患病[1]。該病在世界各國均有發(fā)生[2]，英國、日本、海峽群島、挪威和芬蘭等多個國家和地區(qū)已經(jīng)向全世界宣告徹底根除了布魯氏菌病[3]，而我國至今未能得到完全控制，仍以小范圍、點狀、分散形式流行[4]。人的布魯氏菌病主要是通過直接接觸病畜及其產(chǎn)品而感染，出現(xiàn)身體乏力、持續(xù)發(fā)熱、多汗、關(guān)節(jié)疼痛及反應(yīng)遲鈍等明顯癥狀且病程慢復(fù)發(fā)率很高[5-7]。公畜感染后會出現(xiàn)睪丸炎癥，造成不育以及神經(jīng)損傷，母畜感染后會導(dǎo)致不孕、流產(chǎn)及死胎等癥狀。OIE將該病定為必須報告的B類傳染病，我國將其列為二類動物疫病[8，9]，該病一旦出現(xiàn)會造成巨大經(jīng)濟損失[10]。

目前，布魯氏菌發(fā)現(xiàn)的有6個生物種19個生物型，其中大多數(shù)種型對人和動物都有致病性，臨床上羊種、牛種、豬種毒力最強[11]，已知能被感染的布魯氏菌病動物已超過200種，不同動物間還可出現(xiàn)交叉感染，傳染力極強[12]，全世界每年約有50萬例人感染布魯氏菌病，特別是在地中海、非洲和拉丁美洲部分國家以及西亞、南亞和東亞國家[13-15]。家畜中牛、羊和豬是最為易感的動物，傳染源主要是母畜的流產(chǎn)物、分泌物以及公畜交配通過體液傳播等途徑，污染飼料和環(huán)境后再通過消化道、皮膚傷口接觸傳染，還能產(chǎn)生氣溶膠，通過呼吸道傳染[16-18]。布魯氏菌病對畜牧業(yè)影響嚴重，尤其是在最近幾年國內(nèi)外疫情出現(xiàn)抬頭上升的趨勢并發(fā)現(xiàn)新的流行特征[19]。目前，疫苗免疫和檢疫撲殺是預(yù)防和控制布魯氏菌病的主要手段[20]。該病在青河縣近年來發(fā)病情況不詳，采用平板凝集試驗（RBT）初篩，試管凝集試驗（SAT）進行復(fù)測的方法，以青河縣8個鄉(xiāng)鎮(zhèn)和1個種羊場作為調(diào)查單位，對2016-2021年采集的牛羊血清進行布魯氏菌病監(jiān)測，為防控該病提供相關(guān)參數(shù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

樣品來源：2016-2021年，以青河縣8個鄉(xiāng)鎮(zhèn)（A、B、C-H）牛（包括荷斯坦奶牛、新疆褐牛、西蒙塔爾牛）羊（包括阿勒泰羊、湖羊等品種）和1個種羊場（I，湖羊為主）為調(diào)查對象，共采集牛血清樣品10 733頭份（詳見表1），采集羊血清樣品49 671頭份（詳見表2）。

表1 2016-2021年青河縣牛布魯氏菌病檢測樣品采集明細

表2 2016-2021年青河縣羊布魯氏菌病檢測樣品采集明細

1.2 試劑及器材

布魯氏菌虎紅平板凝集試驗抗原、陰陽性血清（哈爾濱國生生物科技有限公司生產(chǎn)）；布魯氏菌試管凝集試驗抗原、陰陽性血清（青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)）。

1.3 方法

方法參照國標《動物布魯氏菌診斷技術(shù)》（GB/T18646-2018）[21]。

1.4 結(jié)果判定

虎紅平板凝集試驗（RBT）：在陰陽性對照成立的條件下，4 min內(nèi)被檢血清出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象判定為布病陽性（+）；若混合后顏色均勻無凝集顆粒且無凝集現(xiàn)象判定為布病陰性（-）。

試管凝集試驗（SAT）：在試驗陰陽性成立且抗原對照無自凝的條件下，牛1∶100血清稀釋度，羊1∶50血清稀釋度，出現(xiàn)“++”及以上凝集現(xiàn)象時，判定為陽性；牛1∶50血清稀釋度，羊1∶25血清稀釋度，出現(xiàn)“++”以上凝集現(xiàn)象時，判定為可疑。試驗結(jié)果可疑的家畜經(jīng)30 d后采血復(fù)檢，如果仍為可疑直接判定為陽性。

2 結(jié)果與分析

2.1 牛羊布魯氏菌檢測結(jié)果

2016-2021 年，6年間在青河縣共采集牛血清10 733頭份，RBT初篩檢測結(jié)果顯示，檢疫陽性306份，SAT進行復(fù)測，陽性282份，復(fù)測檢疫牛布魯氏菌病總陽性率為2.63%，與RBT初篩結(jié)果陽性符合率為92.16%。共計采集羊血清49 671頭份，RBT初篩檢測結(jié)果顯示，陽性118份，SAT進行復(fù)測，陽性100份，復(fù)測檢疫羊布魯氏菌病總陽性率為0.20%，與RBT初篩結(jié)果陽性符合率為84.75%。詳見表3。

表3 2016-2021年青河縣牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果

2.2 不同年份牛羊布魯氏菌病檢疫情況

由圖1可以看出，牛布魯氏菌病總陽性率為2.63%。其中，2016年牛布魯氏菌病檢疫陽性率為2.37%，各年份間牛布魯氏菌病檢疫陽性率呈現(xiàn)先上升后下降趨勢，2019年至2020年期間下降了1.04個百分點。共采集羊血清49 671頭份，羊布魯氏菌病檢疫總陽性率為0.20%，各年份間檢疫陽性率呈現(xiàn)先下降后上升趨勢。

圖1 2016-2021年青河縣不同年份間牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果

2.3 不同區(qū)域間牛羊布魯氏菌病檢疫情況

由表4可以看出，9個區(qū)域間牛羊牛布魯氏菌病檢測感染率不同，其中牛布魯氏菌病感染率為0.00%～3.34%不等；羊布魯氏菌病感染率為0.00%～0.50%不等，除H區(qū)域為邊境口岸區(qū)域牛羊養(yǎng)殖數(shù)量極少，I區(qū)域為種羊場且凈化效果好以外，E區(qū)域牛羊感染率均最低。結(jié)果表明，不同區(qū)域內(nèi)布魯氏菌病防控效果存在明顯差異。

表4 2016-2021年青河縣不同區(qū)域間牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果

2.4 不同年齡段牛羊布魯氏菌病檢疫情況

由表5可以看出，牛布魯氏菌病的感染年齡段最高的為2≤X＜3，最低為6≤X；羊布魯氏菌病的感染年齡段最高為3≤X＜6。以上不同年齡段牛羊布魯氏菌病感染率存在明顯差異，其中，2≤X＜3階段牛羊布魯氏菌病的感染率都比較高，應(yīng)加強監(jiān)測頻次和加強凈化淘汰力度、疫苗免疫保護。

表5 2016-2021年青河縣不同年齡段牛羊布魯氏菌病檢測結(jié)果

3 討 論

3.1 檢疫方法的選擇

2016-2021 年，青河縣用6年時間采用RBT對初篩檢測陽性的牛羊血清通過SAT進行復(fù)測，結(jié)果顯示2種試驗方法所得到的檢疫陽性率基本一致。按照《動物布魯氏菌診斷技術(shù)》（GB/T18646-2018）標準[21]，開展牛羊布魯氏菌血清學(xué)大批次的檢測可以采用RBT初篩，其具有操作簡便、快速的優(yōu)點，但缺點是受非特異性抗體的干擾，有時可能會出現(xiàn)非特異性凝集[22]，造成人為肉眼觀察失誤或判斷出弱陽性樣品[23]。因此還需要對RBT初步篩選處理的陽性血清使用SAT進行復(fù)檢[24]。SAT具有特異性高、敏感性高的優(yōu)點，通常在布魯氏菌病的診斷中作為檢測布魯氏菌抗體的確診試驗被廣泛應(yīng)用[25，26]。

3.2 不同年份間的差異

從不同年份間牛羊布魯氏菌病感染情況來看，2016-2017年牛羊布魯氏菌病陽性率增加，尤其是牛布魯氏菌病發(fā)病率呈直線型增長趨勢，之后各年份間逐漸下降，表明強制免疫措施和凈化策略取得實效。從2017年起青河縣開始執(zhí)行《國家布魯氏菌病防治計劃（2016-2020年）》《新疆維吾爾自治區(qū)布魯氏菌病防治計劃（2017-2020年）》以及阿勒泰地區(qū)《草畜平衡監(jiān)督管理辦法》，有計劃、有步驟的落實牛羊布魯氏菌病檢測、檢疫、消毒、撲殺和無害化處理等綜合防控措施[28]，牛布魯氏菌病感染率明顯開始下降，羊布魯氏菌病防控效果高于牛，2018年羊布魯氏菌病感染率為0，說明防控措施實施比較到位。

3.3 不同區(qū)域間的差異

從不同區(qū)域間牛羊布魯氏菌病感染情況來看，各區(qū)域間牛羊布魯氏菌病呈現(xiàn)出由縣城周邊向四周擴大的趨勢，這與牧民定居城區(qū)不愿上山放牧，養(yǎng)殖方式由傳統(tǒng)放牧向集中飼養(yǎng)有關(guān)。一方面集中飼養(yǎng)量的增加造成引種數(shù)量多，加之牲畜交易頻繁，而交通監(jiān)管、檢疫等工作相對滯后都是引起牛羊布魯氏菌病感染的主要因素[29]。除H區(qū)域為邊境口岸區(qū)域牛羊養(yǎng)殖數(shù)量極少，I區(qū)域為種羊場凈化防控效果好以外，E區(qū)域牛羊感染率最低，是因為E區(qū)域地理位置比較偏遠，基本屬于丘陵溝壑或山峰地帶，本身傳入動物疫情的風(fēng)險就低。且牲畜流通極其不方便，大多都是牧區(qū)每次銷售牛羊都需要等收購廠家或牛羊販賣人員1～2月才進山一次，進入該區(qū)域的牛羊大多都是先經(jīng)過A、B區(qū)域后最后進入E、F區(qū)域，傳入疫病的風(fēng)險自然很低，I區(qū)域為種羊場，羊布魯氏菌病感染率為0%，是因為其不論從養(yǎng)殖環(huán)境、從業(yè)人員管理、飼養(yǎng)方面或引種把關(guān)方面都相當嚴格，說明防控效果好。A-D區(qū)域靠近縣城，因散養(yǎng)放牧地段少，大多都是散養(yǎng)殖場（戶），飼養(yǎng)密度、飼養(yǎng)方式、繁育方式以及檢疫凈化不扎實等都是造成牛布魯氏菌病感染率高的主要因素。D區(qū)域緊鄰縣城，布魯氏菌病感染率最高，要作為重點進行監(jiān)測。

3.4 不同年齡段之間的差異

從不同年齡段牛羊布魯氏菌病檢測情況來看，2≤X＜4階段牛布魯氏菌病的檢測陽性率高，3≤X＜6階段羊布魯氏菌病檢測陽性率高，主要是因為這個年齡段的成年牛羊多，很多都經(jīng)過市場頻繁交易，而當日交易不成功的又回到養(yǎng)殖環(huán)節(jié)，自然增加了疫情風(fēng)險[30]，說明A-G各區(qū)域之間在牛羊養(yǎng)殖、運輸、交易方面存在漏洞，一方面可能是因為青河縣牛羊養(yǎng)殖主要還是以小規(guī)模為主，很多養(yǎng)殖戶或商販對布魯氏菌病的認識不足，防控意識薄弱，造成養(yǎng)殖引入隨意頻繁，流通監(jiān)管困難。另一方面是隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展，養(yǎng)殖量不斷擴大，但布魯氏菌病監(jiān)測經(jīng)費無法滿足當前工作需要[31]，造成監(jiān)測方面存在漏洞。另外，牲畜市場價格不斷提升但疫情撲殺補助資金卻常年不變[32]，造成撲殺起來養(yǎng)殖戶不配合，加大了防疫的工作難度。因此，要從政府管理層面和養(yǎng)殖層面上雙向發(fā)力，共同推進布魯氏菌病的防控凈化工作[33]。

4 結(jié) 論

青河縣近6年牛布魯氏菌病流行率比較高，提示應(yīng)加強防控。羊布魯氏菌病流行率較低，在可控制范圍內(nèi)，總體防控效果較好，但仍存在疫情流行風(fēng)險。因此，在組織管理層面上既要摸清底數(shù)，加強全面宣傳，提高全民防控意識，又要在經(jīng)費上提供保障，檢測方法上挑選靈敏度高、結(jié)果可靠的檢測方法開展牛羊布魯氏菌病的篩查，強化產(chǎn)地檢疫和市場流通監(jiān)管，把好調(diào)運關(guān)，采取檢疫、免疫、隔離、發(fā)現(xiàn)陽性畜立即撲殺無害化處理，加大保險賠償力度等防控措施，爭取向國家凈化標準看齊。在養(yǎng)殖層面上，要采取自繁自養(yǎng)，定期開展“大清洗、大消毒”等防控措施，一旦發(fā)現(xiàn)患畜即撲殺，并配合相關(guān)部門進行無害化處理，堅決杜絕病害動物流入市場。