周 萍 葛 巖 茹 妍 馬子君▲

1.江蘇省新沂市中醫(yī)醫(yī)院藥劑科，江蘇新沂 221400；2.上海藥明津石醫(yī)藥科技有限公司臨床部，上海 200000；3.甘肅省金塔縣人民醫(yī)院藥劑科，甘肅金塔 735300

心腦一號(hào)顆粒劑是新沂市中醫(yī)醫(yī)院心內(nèi)科名老中醫(yī)臨床應(yīng)用多年的驗(yàn)方，由丹參，桃仁，紅花，川芎，當(dāng)歸，白芍，炙黃芪，伏神，白術(shù)，炙甘草等藥材組成。具有治療氣滯血瘀之心悸、失眠、多夢(mèng)、健忘、胸痛等癥的功效。傳統(tǒng)湯劑攜帶不方便，煎煮時(shí)間長(zhǎng)，新劑型顆粒劑與原方具有相同的療效，但具有服用量小、服用方便等特點(diǎn)[1-5]。心腦一號(hào)顆粒劑采用現(xiàn)代提取技術(shù)，本研究探索心腦一號(hào)顆粒劑的生產(chǎn)工藝。對(duì)處方中各藥物通過水提醇沉及醇提正交試驗(yàn)，找到各藥物最佳提取工藝，以建立心腦一號(hào)顆粒劑院內(nèi)制劑適合大型生產(chǎn)的工藝。為醫(yī)院制劑備案研發(fā)提供參考[6-8]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

精宏DK-S24恒溫水浴鍋（上海精宏實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；十萬(wàn)分之一電子天平DZTP002（賽多利斯集團(tuán)）；精宏GRX20熱風(fēng)循環(huán)烘箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；電子調(diào)溫電熱套S20（天津市泰斯特）；電子恒速攪拌器2011378（常州國(guó)宇儀器制造有限公司）；離心機(jī)TG18G（上海赫田科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 試藥

丹參、桃仁、紅花、川芎、當(dāng)歸、白芍、炙黃芪、伏神、白術(shù)、炙甘草（新沂市中醫(yī)醫(yī)院草藥庫(kù)）、乙醇（北京化工廠，批號(hào)：200102），糊精（嘉興市天磊化工有限公司，批號(hào)：200103），甜蜜素（嘉興市天磊化工有限公司，批號(hào)：200506）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 提取工藝研究

2.1.1 水提工藝研究 取丹參150 g，桃仁50 g，紅花 50 g，川芎 150 g，當(dāng)歸 150 g，白芍 150 g，炙黃芪 150 g，伏神 150 g，白術(shù) 150 g，炙甘草 100 g，通過對(duì)藥材提取的加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)等因素的考察，以L9（34）開展正交試驗(yàn)，出膏率為考察指標(biāo)，并進(jìn)行方差分析，考察水提工藝和最佳因素。

2.1.2 醇沉濃度的選擇 為了達(dá)到純化的目的，采用乙醇沉淀的方法以去除水提液中的雜質(zhì)，按最佳工藝條件（加水量8倍，煎煮1.5 h，煎煮3次）得水煎液四份，濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20（60℃），攪拌下加乙醇至醇沉濃度，放置過夜，濾過。醇沉濃度選擇了40%、50%、60%、70%四個(gè)濃度[9-10]。

2.1.3 小試實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 取丹參150 g，桃仁50 g，紅花 50 g，川芎 150 g，當(dāng)歸 150 g，白芍 150 g，炙黃芪150 g，伏神 150 g，白術(shù) 150 g，炙甘草 100 g，加 8 倍水煎煮3次，每次1.5 h。合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10～1.20（60℃）左右，放冷，加乙醇至醇沉濃度60%，邊加邊攪拌，放置過夜，濾過，回收乙醇，減壓干燥，得浸膏粉。

2.2 制粒工藝研究

2.2.1 加輔料量的考察 ①根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，選用糊精作為輔料，取不同比例的浸膏與輔料混合，用適量的85%乙醇作為潤(rùn)濕劑，篩粒，整粒，60℃以下干燥至恒重，確定吸濕率、成型速度和溶解速度。②玻璃干燥器在室溫下平衡48 h，干燥器內(nèi)相對(duì)濕度為75%。在已干燥恒重的稱量瓶底部放入約1 g的樣品，動(dòng)搖其均勻分布，準(zhǔn)確稱量，干燥器的氯化鈉過飽和溶液，48 h后，計(jì)算吸濕百分率[11]。吸濕百分率=（吸濕后藥粉重量-吸濕前藥粉重量）/吸濕前藥粉重量×100%。③成型性測(cè)定：取樣品10 g，依次通過1號(hào)篩和4號(hào)篩，能通過1號(hào)篩但不能通過4號(hào)篩的合格顆粒除以樣品重量即為成型率。以成型率100%為25分。④溶解性測(cè)定：取0.5 g樣品顆粒加入10 ml離心管（最小量程 0.1 ml），加入 10 ml沸水，攪拌 5 min，3000 r/min離心15 min，棄上清液，80℃烘干至恒重，計(jì)算溶解率。以溶化率100%為25分[12-13]。溶化率（%）=溶化顆粒重/總顆粒重× 100%。

2.2.2 濕潤(rùn)劑的選擇 取浸膏粉10 g，加1.5倍糊精混合，然后噴到不同濃度的乙醇混合10 min，收集不能通過1號(hào)篩和能通過五號(hào)篩的顆粒和粉末，計(jì)算粗粒和細(xì)粉的總比例。

2.2.3 休止角測(cè)定 將3只漏斗串聯(lián)并固定于水平放置的坐標(biāo)紙上適宜高度處，使漏斗下口距坐標(biāo)紙的距離為H，將樣品沿漏斗壁倒入最上面的漏斗中，直到最下面漏斗藥粉的圓錐體尖端接觸到漏斗口為止，此時(shí)由坐標(biāo)紙測(cè)出圓錐體底部的半徑R，計(jì)算出休止角（tga=H/R）。

2.2.4 顆粒劑吸濕性考察 將制備好的顆粒干燥至恒重后，將約1 g樣品放在5 ml的平稱瓶底部，輕輕搖晃均勻，準(zhǔn)確稱量，放入裝有氯化鈉過飽和溶液的干燥器中（稱量時(shí)瓶蓋打開），測(cè)定6、12、24、48、60 h的顆粒吸濕率。

2.2.5 甜味劑加入量的考察 考慮到大多數(shù)中藥是苦的，患者會(huì)感到阻力，為了便于顆粒成型，加入一定量的甜蜜素作為基本配方成分。取適量浸膏粉，加入3倍糊精，分成4份，分別加入0.2%、0.5%、1.0%、1.5%甜蜜素，品嘗味道[14]。

2.2.6 三批中試試驗(yàn) 以三批中試試驗(yàn)物料數(shù)據(jù)表進(jìn)行投料，計(jì)算理論產(chǎn)量（袋）、實(shí)際產(chǎn)量（袋）、成品率（%），驗(yàn)證工藝穩(wěn)定性。見表1。

表1 三批中試試驗(yàn)物料數(shù)據(jù)表

3 結(jié)果

3.1 提取工藝研究

3.1.1 水提工藝研究 水提正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，按出膏率分析，可見影響提取的因素的順序?yàn)锳＞B＞C，最佳工藝條件為 A2B2C3，確定最佳水提工藝為加水量8倍，煎煮1.5 h，煎煮3次，見表2～ 4。

表2 因素水平表

3.1.2 醇沉濃度的選擇 結(jié)果表明醇沉濃度為60%醇沉效果最佳，故選擇60%的醇沉濃度，見表5。

表5 不同醇沉濃度測(cè)定結(jié)果

3.1.3 小試實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 小試實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)出膏率與最佳提取工藝數(shù)據(jù)基本一致，表明提取工藝穩(wěn)定可行，見表6。

表6 小試出膏率

3.2 制粒工藝研究

3.2.1 加輔料量的考察 考察結(jié)果顯示，1∶1.5浸膏和糊精比的綜合評(píng)分值較高，考慮藥材批次提出量的不同，最終選擇糊精作為該顆粒劑的成型輔料比例為1∶1～1∶1.5，見表7～11。

表7 不同輔料及不同比例考察

3.2.3 顆粒劑休止角測(cè)定 一般要求顆粒劑填充

表3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果

表4 方差分析結(jié)果

表8 不同比例的吸濕百分率

表9 不同比例的成型性

表10 不同比例的溶解性

表11 不同比例綜合評(píng)分

3.2.2 濕潤(rùn)劑的選擇 根據(jù)表格中粗粒與細(xì)粉的總和百分率的評(píng)價(jià)指標(biāo)，選擇總和百分率最低的4.43%為最佳乙醇濃度即85%的乙醇作為濕潤(rùn)劑。見表12。物料的休止角應(yīng)控制在35°以下，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表13。結(jié)果符合顆粒劑的要求。

表12 濕潤(rùn)劑的選擇

表13 顆粒劑休止角

3.2.4 顆粒劑吸濕性考察 應(yīng)《中華人民共和國(guó)藥典》[15]要求，顆粒劑水分不得超過8%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該顆粒劑60 h內(nèi)吸濕性符合標(biāo)準(zhǔn)，投入生產(chǎn)時(shí)須在制粒后的60 h內(nèi)進(jìn)行內(nèi)包裝，見表14。

表14 顆粒劑吸濕性

3.2.5 甜味劑加入量的考察 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明甜蜜素比例為0.5%時(shí)，口感適中，見表15。

表15 甜味劑加入量

3.2.6 三批中試試驗(yàn)結(jié)果 三批中試試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明成品率均達(dá)到95%以上，且成品率數(shù)據(jù)穩(wěn)定，表明該工藝方法穩(wěn)定可靠，見表16。

表16 三批中試試驗(yàn)數(shù)據(jù)

4 小結(jié)

通過對(duì)藥材提取的加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)等因素的考察，以出膏率為考察指標(biāo)，考察水提工藝和最佳因素，得出最佳工藝為加水量8倍，煎煮1.5 h，煎煮3次。為了達(dá)到純化的目的，采用乙醇沉淀的方法以去除水提液中的雜質(zhì)，結(jié)果表明醇沉濃度為60%醇沉效果最佳，故選擇60%的醇沉濃度。加入浸膏與糊精比例為1∶1.5，甜蜜素量為0.5%，選擇85%的乙醇作為潤(rùn)濕劑。經(jīng)驗(yàn)證成型性較好，含水量適宜，顆粒制備工藝穩(wěn)定可行，可為院內(nèi)制劑備案制研發(fā)奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。