張曙光 ，周航，楊翼，尹巧芝，鄧琳雯▲

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川 成都 610072；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610075；3.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬生殖婦幼醫(yī)院，四川 成都 610041)

多囊卵巢綜合征(Polycystic Ovary Syndrome,PCOS)是一種病因不明的異質(zhì)性疾病，有研究報道其在中國育齡期女性中的發(fā)病率是5.61%[1]，為育齡女性最常見的生殖內(nèi)分泌疾病之一[2]，是引起女性排卵障礙性不孕、月經(jīng)失調(diào)和高雄激素的重要原因[3]。主要表現(xiàn)為月經(jīng)不規(guī)律、高雄激素相關(guān)表現(xiàn)、排卵障礙性不孕，同時伴有肥胖、胰島素抵抗、高胰島素血癥、糖脂代謝紊亂等代謝異常[4]。目前尚不能根治該病，且激素治療有一定的副作用，而中醫(yī)藥在治療PCOS引起的月經(jīng)紊亂、代謝異常、排卵障礙性不孕等方面經(jīng)驗豐富、療效顯著，但針對中醫(yī)藥治療PCOS的機制認識仍缺乏深入系統(tǒng)的研究，同時中醫(yī)藥治療PCOS的有效措施缺乏規(guī)范的應(yīng)用及推廣。因此借助現(xiàn)代科技知識闡釋中醫(yī)藥治療PCOS的機制勢在必行，我國眾多中醫(yī)婦科團隊也做了努力和探索，從不同角度揭示了PCOS的中醫(yī)藥治療機制。本研究通過Cite Space軟件分析PCOS的中醫(yī)藥機制研究現(xiàn)狀、熱點及趨勢，排除人力分析的局限性，為今后的科研工作提供參考方向。

1 數(shù)據(jù)來源與研究方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

本文數(shù)據(jù)全部來自于中國知網(wǎng)(CNKI)，以“多囊卵巢綜合征”“機制”“大鼠”“小鼠”“實驗研究”等為主題詞檢索中文期刊，選擇學(xué)科為“中醫(yī)學(xué)”“中藥學(xué)”“中西醫(yī)結(jié)合”，共檢索到文獻1 459篇，人工去除重復(fù)文獻、臨床研究文獻、個人經(jīng)驗總結(jié)和meta分析等文章，共納入期刊、碩博士論文659篇文章。將從中國知網(wǎng)中檢索到的文獻按照refoworks格式導(dǎo)出，以便于后續(xù)在Cite Space中進行研究。

1.2 研究方法

利用Cite Space軟件生成關(guān)鍵詞突現(xiàn)圖、關(guān)鍵詞時區(qū)圖、關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖、關(guān)鍵詞聚類圖譜，導(dǎo)出關(guān)鍵詞聚類表，根據(jù)Cite Space作圖軟件可視化分析中醫(yī)藥研究多囊卵巢綜合征熱點、趨勢。

2 數(shù)據(jù)與結(jié)果

2.1 發(fā)文量統(tǒng)計

統(tǒng)計2002-2021年發(fā)文量(圖1)，可以看出中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征研究者發(fā)文量可以分為三個階段，第一階段(2002-2005年)期間每年相關(guān)研究文章少于10篇，第二階段(2006-2016年)期間，2006年后研究文章逐年增多，但每年相關(guān)研究文章仍少于50篇，且發(fā)文量存在輕微波動。第三階段(2017-2020年)年發(fā)文量穩(wěn)定在50篇以上，說明中醫(yī)藥數(shù)據(jù)挖掘這一研究領(lǐng)域引起越來越多的學(xué)者關(guān)注，已經(jīng)成為國內(nèi)研究的一個熱點。

圖1 年發(fā)文量統(tǒng)計表

圖2 作者合作知識圖譜

通過Cite Space軟件繪制以作者為節(jié)點的知識圖譜，節(jié)點大小代表作者發(fā)文量，作者之間的連線粗細代表作者間合作緊密強度，從圖中可以看出在多囊研究機制的合作團隊中根據(jù)合作強度大小形成了眾多的研究團隊，如吳效科團隊、于丹團隊、何清湖團隊、劉丹團隊、劉廣南團隊等，其中吳效科團隊合作強度最大，其他團隊間合作較分散且薄弱。

2.2 關(guān)鍵詞突現(xiàn)性分析

關(guān)鍵詞突現(xiàn)，是用于說明在一定時間區(qū)間某個詞研究頻次驟增情況，說明該研究數(shù)量較多、研究領(lǐng)域備受關(guān)注。Begin和End是該詞成為研究熱點的時間段，strength表示突變強度，圖3是近20年成為研究強度變化較顯著的17個詞，其中“瘦素”和“多囊卵巢”是最早被學(xué)者關(guān)注，且持續(xù)熱度最久(2002-2012年)的關(guān)鍵詞，近5年內(nèi)學(xué)者對“補腎化痰法”研究較多，直至2021年仍保持較高研究熱度，中藥方劑“補腎活血方”“補腎調(diào)經(jīng)湯”“復(fù)方麥芽丸”都有過不同強度的突現(xiàn)。雖然中醫(yī)藥治療PCOS的時間較早，但研究者關(guān)注中醫(yī)藥治療機制的時間相對較晚，研究關(guān)注點較多與中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征的機制和可能在其中發(fā)揮作用的生物化學(xué)物質(zhì)相關(guān)，如竇前卵泡、神經(jīng)生長因子、促炎細胞因子、轉(zhuǎn)化生長因子-α受體、25ohd、氧化應(yīng)激-自由基損傷、信號通路、kisspeptin、3β-羥甾脫氫酶、p450芳香化酶、瘦素受體、細胞增殖、卵泡刺激素受體、腸道菌群、pi3k/akt信號通路、炎性反應(yīng)遞質(zhì)、amhr2、細胞凋亡等。

圖3 關(guān)鍵詞突現(xiàn)圖

2.3 關(guān)鍵詞時區(qū)圖分析

是指關(guān)鍵詞在整個研究中首次出現(xiàn)的時間，圓圈的大小代表關(guān)鍵詞出現(xiàn)的頻率，圓圈越大代表關(guān)鍵詞出現(xiàn)的頻率越高，反之則越低；線條代表關(guān)鍵詞之間的聯(lián)系密度。本次研究以年為單位呈現(xiàn)關(guān)鍵詞。關(guān)鍵詞時區(qū)圖可以看出整個中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征機制的研究路徑演化，分析多囊卵巢綜合征中醫(yī)相關(guān)領(lǐng)域各研究主題隨時間跨度的變化規(guī)律。從圖4可以看出關(guān)鍵詞在時區(qū)圖上分為三個階段，第一階段(2002-2005年)研究關(guān)鍵詞出現(xiàn)的較少，第二階段(2006-2016年)關(guān)鍵詞逐漸增多，第三階段(2017-2021年)新增關(guān)鍵詞更加密集。在中醫(yī)藥治療PCOS的機制中，第一階段開始使用大鼠作為實驗動物，胰島素抵抗，蒼附導(dǎo)痰丸及其治療作用機制受到研究者關(guān)注。第二階段，研究者發(fā)文量逐漸增多，說明在此時間段展現(xiàn)出此研究方向的研究潛力及價值，中醫(yī)婦科界對該疾病的重視程度日益上升，中醫(yī)藥各種治療方法在機制研究中開始增多，如中藥、黃連素、針刺、補腎化痰方、補腎調(diào)經(jīng)方等；中醫(yī)病理動物模型在實驗研究中開始被研究者重視，如腎虛血瘀模型、痰濕證模型等；研究立足于PCOS引起的病理改變、內(nèi)分泌及生殖相關(guān)問題：如高雄激素血癥、子宮內(nèi)膜容受性等，在卵巢顆粒細胞、各種細胞因子層面深入研究中醫(yī)藥干預(yù)多囊卵巢綜合征作用機制。在研究的第三階段，關(guān)鍵詞時區(qū)圖中更多中醫(yī)藥干預(yù)方法的出現(xiàn)使研究更加豐富，各種信號通路、分子生物機制用于研究中使研究層次更加深入。

圖4 關(guān)鍵詞時區(qū)圖

2.4 高頻關(guān)鍵詞共現(xiàn)

使用Cite Space軟件，對納入的有效文獻關(guān)鍵詞進行分析，生成關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖(圖5)。共得到110個共現(xiàn)關(guān)鍵詞，共計頻次1 688次，前15的高頻共現(xiàn)關(guān)鍵詞如表1所示。

圖5 關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖

表1 前15高頻關(guān)鍵詞表

表2 關(guān)鍵詞中心性表

排除研究對象“多囊卵巢綜合征”“pco”和“中藥”等一般關(guān)鍵詞，合并相同意義的關(guān)鍵詞，如“蒼附導(dǎo)痰丸”和“蒼附導(dǎo)痰湯”，通過高頻關(guān)鍵詞表可以看出研究者以大鼠為主要研究對象，結(jié)合多囊卵巢引起的胰島素抵抗、高雄激素血癥，研究中醫(yī)藥的理法方藥闡釋其治療多囊卵巢綜合征的機制。

關(guān)鍵詞中心度是指關(guān)鍵詞的重要性，相比較于高頻詞，更能體現(xiàn)其在研究領(lǐng)域的重要程度。將中心度≥0.2的關(guān)鍵詞制成圖表(表2)。相較于表1高頻關(guān)鍵詞出現(xiàn)了三分之一的變動，在中心詞表上出現(xiàn)了體現(xiàn)中醫(yī)獨特治法的補腎化痰法、補腎活血方、針刺及可能參與影響雄激素代謝的中藥提取物丹參酮[5]和限速酶P450芳香化酶[6]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作為一個高頻關(guān)鍵詞，在中心性表中排序下降，可能與多囊機制研究現(xiàn)狀有關(guān)，由于中醫(yī)藥研究經(jīng)費有限，眾多科研人員在實際科研中不可能針對某一種干預(yù)措施實行基因組篩選，從而確定中醫(yī)藥方法干預(yù)了某種基因表達。

2.5 關(guān)鍵詞聚類分析

使用Cite Space生成關(guān)鍵詞時間線圖及聚類圖譜并且導(dǎo)出聚類標簽，如圖6、7，表3。得到8個聚類，聚類#0-#7，聚類號越小代表聚類中包含的關(guān)鍵詞越多，每個聚類是多個緊密相關(guān)的詞組成的，具體包括哪些聚類詞我們可以從表3中看到。此次研究Q值(聚類模塊值)為0.456，S值(聚類平均輪廓值)為0.764。一般認為Q>0.3意味著聚類結(jié)構(gòu)顯著；S>0.5聚類就是合理的，S>0.7意味著聚類是令人信服的。這8個聚類分別是代表實驗研究動物的#0大鼠，代表中醫(yī)干預(yù)手段及治法的#1中藥、#3電針、和#7補腎調(diào)泡周期法，代表病理機制的#2胰島素抵抗，體現(xiàn)作用機制靶點及通路#5顆粒細胞和#6 PI3K/AKT信號通路，以及#4網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)。

圖6 關(guān)鍵詞時間線圖

圖7 關(guān)鍵詞聚類圖譜

表3 中醫(yī)藥研究多囊卵巢綜合征機制的相關(guān)文獻關(guān)鍵詞聚類表

3 討論

3.1 研究特點

自2002年后中醫(yī)藥治療PCOS的機制開始受到研究者關(guān)注，中醫(yī)研究者不斷深入探究，研究內(nèi)容逐漸增多，發(fā)文量逐漸增加。從研究團隊看，團隊之間不均衡，有一些合作強度較大的研究團隊，如吳效科團隊，潘競鏘團隊，但是在作者合作知識圖譜中分散著眾多較小的研究者團隊，不同團體間鮮有合著，可能與作用機制探索類文章相對于臨床研究類文章較少、基礎(chǔ)研究科研經(jīng)費花費較大有關(guān)。從關(guān)鍵詞突現(xiàn)性來看，近20年不斷有關(guān)鍵詞突現(xiàn)，而且強度差別不大，故說明中醫(yī)藥治療PCOS的機制研究較活躍，對此領(lǐng)域研究仍在不斷探索。

3.2 研究熱點

結(jié)合關(guān)鍵詞突現(xiàn)圖、關(guān)鍵詞時區(qū)圖、關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖、關(guān)鍵詞聚類圖及聚類標簽，通過關(guān)鍵詞歷史演化路徑、關(guān)鍵詞中心度和高頻關(guān)鍵詞，嘗試分析研究熱點。胰島素抵抗[7-8]，在關(guān)鍵詞時區(qū)圖上出現(xiàn)最早，共現(xiàn)圖中出現(xiàn)頻率最高、中心度最高，聚類合理，說明胰島素抵抗貫穿于中醫(yī)治療PCOS的機制研究中，其作為PCOS的主要病理改變最受研究者關(guān)注，無疑是研究的最大熱點、重點及難點。在聚類標簽中可以看出研究者常將二甲雙胍作為中醫(yī)藥方法影響PCOS胰島素抵抗機制的對照藥物，大鼠是實驗研究的主要動物，中醫(yī)藥在改善胰島素抵抗的同時也能干預(yù)代謝綜合征、脂質(zhì)異常及PCOS的氧化應(yīng)激-自由基損傷。此外高雄激素血癥[9-10]、慢性炎癥[11-12]在PCOS的病理改變中被反復(fù)提及，也是PCOS治療機制研究中的熱點。

從關(guān)鍵詞時區(qū)圖可以看到中藥方劑、中藥提取物、針灸相關(guān)療法、中成藥等多種方法成為中醫(yī)藥防治多囊卵巢綜合征的重要干預(yù)方式。綜合各圖我們可以看到中藥方劑或中成藥蒼附導(dǎo)痰湯(丸)、桂枝茯苓丸、復(fù)方麥芽丸、丹梔逍遙散、補腎活血方、補腎化痰方以及中藥提取物(隱)丹參酮、小檗堿等，針灸療法的針刺及電針，先后成為研究者關(guān)注的重點。

在細胞層面，可以看到顆粒細胞[13-14]成為高頻詞、中心詞、令人信服的聚類，顆粒細胞針對PCOS的卵泡發(fā)育、雄激素增高、胰島素抵抗、慢性炎癥發(fā)揮著重要作用，成為眾多研究中的靶基因效應(yīng)細胞。在聚類標簽中也可以看到補腎活血方、隱丹參酮、丹參酮通過干預(yù)顆粒細胞來影響胰島素抵抗、細胞增殖、子宮內(nèi)膜病變及性激素的分泌。

在分子生物層面[15-16]，PI3K/AKT信號通路成為輪廓值最大的聚類、P450芳香化酶出現(xiàn)在中心詞表上，表明在眾多分子機制中PI3K/AKT信號通路是同質(zhì)性最好的研究，P450芳香化酶參與生殖激素的合成受到研究者關(guān)注。PI3K/AKT信號通路是腫瘤機制相關(guān)通路、亦與PCOS的胰島素抵抗密切相關(guān)，是PCOS發(fā)病機制假設(shè)的分子生物基礎(chǔ)。

此外網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在PCOS的機制研究中成為熱點，這可能與中藥成分復(fù)雜，需要利用現(xiàn)代計算機技術(shù)提前篩選中藥有效成分、效應(yīng)靶點，進行分子對接有關(guān)。

3.3 研究趨勢

從關(guān)鍵詞聚類看，以大鼠為實驗動物模型，以PCOS的病理改變?nèi)缫葝u素抵抗、高雄激素血癥、慢性炎癥等為效應(yīng)指標，以中醫(yī)藥干預(yù)方法為治療手段，結(jié)合現(xiàn)代分子生物學(xué)闡釋中醫(yī)藥方法干預(yù)PCOS的機制，是目前也是未來的趨勢。從關(guān)鍵詞時區(qū)圖和關(guān)鍵詞突現(xiàn)圖來看，中醫(yī)藥研究者仍在嘗試多種不同干預(yù)方法，針刺療法、補腎化痰法、復(fù)方麥芽丸可能是未來多囊機制研究的一個趨勢。由于PCOS的中醫(yī)藥治療機制相關(guān)研究已近20年，研究者們進行了多方探討，研究成果豐碩?？偨Y(jié)經(jīng)驗得失的綜述，也將會成為一個研究熱點。以網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)為代表的計算機技術(shù)將會在未來的研究中持續(xù)發(fā)揮作用。PI3K/AKT信號通路作為PCOS發(fā)病假說的基礎(chǔ)，仍會繼續(xù)受到研究者的關(guān)注和驗證。

4 總結(jié)

利用Cite Space軟件生成作者及關(guān)鍵詞相關(guān)圖譜結(jié)合數(shù)據(jù)可視化分析中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征機制，能夠快速掌握相關(guān)研究的熱點、重點并分析出可能研究趨勢，為下一步科學(xué)研究提供方向。相較于傳統(tǒng)綜述，Cite Space方法研究能夠節(jié)省大量人力，縮短研究時間，提高研究效率，擴大研究所能涉及的時空范圍，排除人為因素出現(xiàn)的局限。但是本研究亦有相關(guān)不足，在機制研究中至關(guān)重要的分子生物學(xué)信號通路，一些較新或研究較少的信號通路，不能通過高頻關(guān)鍵詞展現(xiàn)，關(guān)鍵詞亦不能體現(xiàn)干預(yù)措施如何作用于多囊卵巢綜合征病理生理的機制。在此后的研究中應(yīng)多種研究方法結(jié)合，多角度探討，才能避免單一方法的局限性。