張 雙，賈福艷，郭紅霞，劉良月，黃 鑫，楊沛文，楊雪葳，劉修園，黃成田

（1.沈陽沈化院測試技術(shù)有限公司，沈陽 110021；2.沈陽化工研究院有限公司，沈陽 110021）

氟啶蟲酰胺是由日本石原產(chǎn)業(yè)株式會社發(fā)現(xiàn)的酰胺類殺蟲劑，它可以有效防治刺吸式口器害蟲，對蚜蟲尤其高效，對蜜蜂低毒[1-2]；聯(lián)苯菊酯是擬除蟲菊酯類殺蟲殺螨劑，其特點顯著，擊倒作用強、長殘效，對番茄白粉虱和桃小食心蟲等有較好的防效[3]。

目前，氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯的分析測定方法主要有氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜法等[4-10]，但未見同時采用乙腈（含1%乙酸）作為提取劑測定桃樣品的前處理方法及采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定兩者的殘留。本文采用乙腈（含1%乙酸）進(jìn)行振蕩提取，方法簡單，回收率好，能夠快速準(zhǔn)確地對氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯進(jìn)行定量分析，能為桃上氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯的殘留量測定提供理論參考和技術(shù)支持。

1 材料和方法

1.1 供試試劑

氟啶蟲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品（純度98.9%），北京勤誠亦信科技開發(fā)有限公司；聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.5%），國家農(nóng)藥質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心（沈陽）；乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純），Sigma-Aldrich公司；乙酸（分析純）、氯化鈉（分析純），國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；N-丙基乙二胺（PSA），博納艾杰爾科技有限公司；尼龍濾膜（0.22 μm），天津市科億隆實驗設(shè)備有限公司；純凈水，沈陽娃哈哈啟力食品有限公司。

1.2 供試儀器

島津LC-30AD高效液相色譜，日本島津公司；TRIPLE QUAD 5500質(zhì)譜儀，美國AB SCIEX公司；BP211D分析天平，德國賽多利斯公司；JJ300電子天平，常熟市雙杰測試儀器廠；HY-5回旋振蕩器，常州國華電器有限公司。

1.3 樣品前處理

稱取10.00 g粉碎后的桃樣品于150 mL錐形瓶中，加入20 mL乙腈（含1%乙酸），振蕩提取30 min，再加入約6 g氯化鈉，漩渦混勻約30 s。靜置分層后取2.00 mL提取液，加入約100 mg PSA，混勻后靜置至溶液澄清，取上清液過0.22 μm有機濾膜，后經(jīng)HPLC-MS/MS檢測。

1.4 儀器分析條件

1.4.1 氟啶蟲酰胺液相色譜條件

色譜柱Agilent Extend C18（50 mm×2.1 mm，3.5 μm）；柱溫：40℃；進(jìn)樣體積：2 μL；流動相A、B分別為水和乙腈；流速：0.5 mL/min。采用梯度洗脫模式，洗脫程序見表1。

表1 流動相梯度洗脫參數(shù)

1.4.2 聯(lián)苯菊酯液相色譜條件

色譜柱Agilent Extend C18（50 mm×2.1 mm，3.5 μm）；柱溫：40℃；進(jìn)樣體積：2 μL；流動相A、B分別為水和甲醇；流速：0.5 mL/min；采用等度洗脫模式，A相∶B相=10∶90，運行時間為3 min。

1.4.3 質(zhì)譜條件

采用多離子反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；正離子模式；電噴霧離子源（ESI）；離子源溫度：500℃；離子化電壓：4500 V；GS1：50 psi；GS2：55 psi；EP電壓：10 V；CXP電壓：9 V（氟啶蟲酰胺）、7 V（聯(lián)苯菊酯）。質(zhì)譜參數(shù)見表2。

表2 質(zhì)譜參數(shù)

1.5 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

分別稱取0.01011 g氟啶蟲酰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和0.02513 g聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于小燒杯中，用乙腈充分溶解，分別定容至10和25 mL容量瓶中，配得質(zhì)量濃度為1000 mg/L氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯儲備液備用，于-4℃避光保存。儲備液分別用乙腈稀釋配制成1、10和100 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液用于基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制和回收率試驗的添加。

1.6 添加回收率試驗

取不含有氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯的桃空白樣品，分別加入一定量的氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，在0.01、1.0和5.0 mg/kg 3個添加水平下分別設(shè)置5個重復(fù)進(jìn)行添加回收率試驗。按照1.3樣品前處理方法進(jìn)行處理，在1.4儀器分析條件下進(jìn)行分析，計算試驗的準(zhǔn)確度和精密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器條件

氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯分別以乙腈和水、甲醇和水作為洗脫溶劑，選擇C18色譜柱進(jìn)行分離。2種化合物分析時間均為3.0 min。在上述條件下，氟啶蟲酰胺的出峰時間約為1.26 min，聯(lián)苯菊酯的出峰時間約為0.88 min。從圖1～4可以看出，在選擇的色譜條件下氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯受基質(zhì)提取物影響較小，且取得了較好峰形。

2.2 前處理條件選擇

本研究參考賈福艷等[11]方法考察了乙腈、乙腈（含0.1%乙酸）、乙腈（含1%乙酸）、甲醇、甲醇（含0.1%乙酸）、甲醇（含1%乙酸）對目標(biāo)化合物的提取情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙腈的提取效果好于甲醇，隨著乙酸的加入量增加，回收率逐漸增加（表3），繼而選擇乙腈（含1%乙酸）作為提取溶劑。提取液經(jīng)過PSA凈化后，樣品中雜質(zhì)量降低，目標(biāo)化合物峰型得到改善。該前處理過程簡單、快速。

表3 不同提取溶劑的添加回收率

2.3 線性相關(guān)性分析

用空白桃提取液配制氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，線性范圍為0.002、0.005、0.01、0.02、0.05、0.1和0.2 mg/L。按照1.4儀器分析條件，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性分析（表4），線性相關(guān)性較好。

表4 氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯在桃中的線性關(guān)系

2.4 方法的準(zhǔn)確度和精密度

在0.01、1.0和5.0 mg/kg 3個添加水平下，氟啶蟲酰胺在桃中回收率為80%～91%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.3%～7.7%；聯(lián)苯菊酯在桃中回收率為85%～94%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%～5.2%（表5），方法的定量限均為0.01 mg/kg，符合農(nóng)藥殘留試驗準(zhǔn)則的要求。

表5 氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯在桃中的添加回收試驗（n=5）

3 結(jié) 論

本研究建立了能夠檢測桃樣品中氟啶蟲酰胺和聯(lián)苯菊酯殘留量的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。結(jié)果表明，該方法具有較高的精密度和準(zhǔn)確度。氟啶蟲酰胺在桃中的平均回收率為80%～91%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.3%～7.7%，聯(lián)苯菊酯在桃中的平均回收率為85%～94%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%～5.2%。本方法簡便、高效，滿足樣品殘留分析的要求，可為桃的食用安全性的初步評估提供參考。