馮欣靜，周志磊,3，姬中偉,3，楊懿，徐岳正，毛健,*

1(糧食發(fā)酵與食品生物制造國家工程研究中心，江蘇 無錫，214122)2(江南大學 食品學院，江蘇 無錫，214122)3(江南大學(紹興)產業(yè)技術研究院，浙江 紹興，312000)4(國家黃酒工程技術研究中心，浙江 紹興，312000)

黃酒具有口感醇厚、香氣馥郁等特色，深受我國消費者的青睞。多樣的釀造原料、復雜的釀造工藝及多菌種共酵體系賦予了黃酒豐富的功能性成分，主要包括多糖、低聚糖、蛋白質、多肽、游離氨基酸、有機酸和風味物質[1]，其中糖類物質占比最高。黃酒中糖類物質主要包括葡萄糖、麥芽糖、海藻糖、黃酒低聚糖與黃酒多糖等[2]。低聚糖已被報道可有效促進腸道益生菌的增殖[3]，但黃酒低聚糖能否發(fā)揮此種功效尚未可知。黃酒低聚糖是由2～10個單糖通過糖苷鍵連接而成的低聚合度糖，主要來源于原料稻米與小麥中淀粉的酶解、小麥麩皮酶解、微生物自身代謝等[4]。黃酒中低聚糖含量豐富，低聚異麥芽糖是黃酒低聚糖的主要成分[4]。BAI等[5]利用高效液相色譜法對黃酒中低聚異麥芽糖進行定量檢測，測得黃酒中低聚異麥芽糖含量多集中于7～8 g/L。然而，尚未有人對黃酒中低聚糖進行分離純化及功能研究。

研究發(fā)現(xiàn)膳食低聚糖具有增強胃腸動力、上調機體有益代謝產物含量及增加腸內有益菌群豐度等功能[6]。黃酒低聚糖難以被胃和小腸酶解，大多數(shù)可到達結腸內被結腸微生物發(fā)酵利用[4]。短鏈脂肪酸(short chain fatty acids，SCFAs)為結腸微生物酵解難消化碳水化合物的代謝產物，具有促進腸道蠕動、調節(jié)pH促進有益菌增殖、調節(jié)脂質代謝等功效[7]。黃酒低聚糖是否可通過對腸道菌群的有益調節(jié)發(fā)揮益生功效仍有待探討。

本研究選取市場主流的半干型黃酒為原料，通過黃酒原液濃縮、乙醇醇沉、旋蒸除乙醇、Sevage法除蛋白、旋蒸除Sevage試劑、3 000 Da與300 Da膜分離、冷凍干燥技術等步驟對黃酒低聚糖進行分離，同時通過DEAE Sepharose Fast Flow與Sephadex G15對黃酒低聚糖進行純化。低聚果糖是廣泛應用于食品工業(yè)中的功能性低聚糖[3]，而葡萄糖可作為菌群發(fā)酵的共同碳源被腸道菌群利用[8]。因此本研究通過小鼠腸道菌群體外發(fā)酵研究比較了葡萄糖(陰性對照組)、低聚果糖(陽性對照組)與黃酒低聚糖的體外益生效果，為黃酒低聚糖后續(xù)功能驗證提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 實驗樣品

本研究所用半干型黃酒樣品，中國紹興某公司。

1.1.2 實驗試劑

DEAE Sepharose Fast Flow、Sephadex G15，北京索萊寶科技有限公司；低聚果糖，上海麥克林生化科技有限公司；BBL、LBS、BDS、EMB培養(yǎng)基，青島高科園海博生物技術有限公司；乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸，上海阿拉丁有限公司；系列葡聚糖標準品，美國聚合物標準品公司；半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸，美國Sigma-Aldrich公司；其余試劑，國藥集團化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

R-1020旋轉蒸發(fā)器、SHB-B95型循環(huán)水式多用真空泵，杭州庚雨儀器有限公司；卷式膜納濾設備，紹興海納膜技術有限公司；ME204號立式大容量多管離心機、Trace 1300 ISQ氣相色譜-質譜聯(lián)用儀，賽默飛世爾科技有限公司；752N紫外可見光分光光度計，杭州匯爾儀器設備有限公司；Beta 1-8實驗室型凍干機，北京博勱行儀器有限公司；HYG-B全溫搖瓶柜，蘇州培英實驗設備有限公司；SKD-1800全自動凱氏定氮儀，上海沛歐分析儀器有限公司；DHL-A電腦恒流泵、DBS-100電腦全自動部分收集器，上海青浦滬西儀器廠；AW 200 SG厭氧工作站，瑞士康科技有限公司；pH計，梅特勒-托利多儀器有限公司；Waters 1525 EF高效液相色譜儀，美國沃特世公司；ICS 5000離子色譜儀，美國戴安公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 實驗樣品

1.3.1.1 黃酒原液濃縮與分級醇沉

黃酒低聚糖的分離純化步驟如圖1所示。首先利用旋轉蒸發(fā)器于55 ℃將黃酒原液以9∶1的體積比減壓濃縮。向濃縮物中添加無水乙醇至體系內乙醇體積分數(shù)達75%，充分攪拌后于4 ℃冰箱靜置過夜，24 h后離心收集合并沉淀，并于-20 ℃冰箱保存。

圖1 黃酒低聚糖分離純化流程圖

1.3.1.2 Sevage法除黃酒蛋白

將所得沉淀以去離子水溶解后，置于旋轉蒸發(fā)器中旋蒸除去體系內殘留乙醇。將溶液與Sevage試劑[V(三氯甲烷)∶V(正丁醇)=4∶1]在搖瓶中以5∶1體積比混合，置于全溫搖瓶柜內充分混勻。2 h后將混合液于立式大容量多管離心機中離心(4 000 r/min，8 min)，此時變性蛋白聚集于有機試劑與水層分界處。收集上層糖液重復上述操作，直至分層處基本無蛋白沉淀。收集合并上層糖液，置于旋轉蒸發(fā)器中旋蒸除去體系內有機試劑，上清液保存于-20 ℃。

1.3.1.3 膜分離收集黃酒低聚糖

參考CAI等[9]的研究方式對黃酒低聚糖進行截留，并進行適量修改。將除蛋白后的黃酒糖液置于卷式膜納濾設備中，以3 000 Da聚醚砜超濾膜進行截留。隨后向膜過濾機中添加足量去離子水，直至體系內低聚糖充分過濾。收集濾出液，保存于-20 ℃冰箱。隨后以300 Da聚酰胺納濾膜對上述濾出液進行截留，向膜過濾機中添加足量去離子水，收集截留液保存于-20 ℃冰箱。將糖液置于-80 ℃冰箱中過夜冷凍后，于冷凍干燥機進行凍干，得到淡黃色粗黃酒低聚糖粉。

1.3.1.4 黃酒低聚糖提取率與回收率的測定

按1.3.1.3將黃酒原液分別以3 000 Da超濾膜與300 Da納濾膜過濾后，測定300～3 000 Da截留范圍內黃酒液中總糖含量與還原糖含量。測得各步驟所得糖液中總糖(苯酚硫酸法[9])與還原糖(DNS法[9])含量，黃酒低聚糖提取率與回收率,如公式(1)～公式(3)所示：

m1=m2-m3

(1)

(2)

(3)

式中：m1為黃酒低聚糖總含量；m2為黃酒截留液總糖含量；m3為黃酒截留液還原糖含量；m4為各步驟糖液總糖含量；m5為各步驟糖液還原糖含量；m6為各步驟糖液低聚糖總量。

1.3.2 黃酒低聚糖的純化

1.3.2.1 DEAE Sepharose Fast Flow離子交換柱層析純化

參考沈赤[10]的研究方法，并進行適當修改。采用離子交換柱層析技術分離攜帶不同電荷的黃酒低聚糖。玻璃層析柱內徑2 cm，柱高80 cm，上樣體積5 mL，上樣質量濃度10 mg/mL。將DEAE Sepharose Fast Flow填料緩慢傾倒入層析柱內，沖洗平衡后分別以去離子水、0.1、0.2、0.3 mol/L NaCl溶液進行洗脫，各洗脫液均洗脫20管。調節(jié)恒流泵流速至2 mL/min，每5 min收集1管樣品，以苯酚硫酸法逐管檢測收集管內糖含量。

1.3.2.2 Sephadex G15葡聚糖凝膠柱純化

參考易曉敏等[11]的研究方法，并進行適當修改。利用Sephadex G15對DEAE Sepharose Fast Flow離子交換柱分離后的低聚糖組分進行二次純化。將該組分配制為10 mg/mL的溶液，上樣體積5 mL，以去離子水為洗脫液進行洗脫，同時用自動部分收集器逐管進行收集。調節(jié)恒流泵流速至0.5 mL/min，每10 min 收集一管樣品，以苯酚硫酸法逐管檢測收集管內糖含量。

1.3.2.3 黃酒低聚糖分子質量分布

配制5 mg/mL的黃酒低聚糖溶液，糖液經0.22 μm水系濾膜過濾后注入液相小瓶中待測，以Waters 1525色譜儀進行分子質量測定。分別稱取重均分子質量為180、342、505、1 200、3 650 Da的葡聚糖標準品并配制為5 mg/mL的標準溶液。以色譜峰的保留時間(Rt)為橫坐標，分子質量的對數(shù)值(lgMw)為縱坐標進行回歸得標準曲線方程，通過標準曲線計算得到黃酒低聚糖分子質量。洗脫程序參考了劉衛(wèi)寶[12]的研究方法。

1.3.2.4 黃酒低聚糖的單糖組成

利用ICS 5000離子色譜儀對黃酒低聚糖的單糖組成進行分析，預處理與洗脫方法參考了劉衛(wèi)寶[12]的研究，并進行適當修改。配制包括鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸在內的5 mg/L的低質量濃度混合單糖標準溶液與200 mg/L的葡萄糖標準溶液。高濃度葡萄糖標準品用于測定黃酒低聚糖中葡萄糖的摩爾比，低濃度標準品用于測定黃酒低聚糖中其余單糖的含量。

1.3.3 黃酒低聚糖對腸道菌群體外增殖評價

1.3.3.1 小鼠糞便勻漿的配制

新鮮的小鼠糞便從江南大學動物實驗中心獲得，小鼠此前未進行過抗生素治療。以無菌糞便收集盒收集小鼠糞便，立即用無菌磷酸鹽緩沖液(PBS，0.1 mol/L)轉移至厭氧操作箱內。小鼠糞便與PBS緩沖液以1∶10(g∶mL)比例配制。經渦旋振蕩器充分混勻后，以3層無菌紗布混合過濾得到糞便勻漿用于接種[13]。

1.3.3.2 體外發(fā)酵方法

小鼠糞便菌群的發(fā)酵方式參考鄭志昌等[8]的方法，并進行適當修改。糞便培養(yǎng)基的配制參考王如月[13]的研究方案。分別以葡萄糖、低聚果糖與黃酒低聚糖(純化后)充當碳源物質，培養(yǎng)基在115 ℃下滅菌30 min。以葡萄糖組為陰性對照組，低聚果糖組為陽性對照組，黃酒低聚糖組為實驗組進行厭氧培養(yǎng)。體外發(fā)酵在無菌三角瓶中進行，每瓶分裝入30 mL培養(yǎng)基。糞便菌液以10%(體積分數(shù))接入，并置于厭氧工作站37 ℃下恒溫培養(yǎng)。在孵育前，以無菌注射器從管內吸取1.5 mL培養(yǎng)基進行指標測定，隨后在發(fā)酵4、8、12、24、36、48 h時以相同的方式獲得隨后的等分試樣，并保存在-80 ℃直至分析。各分組設置3個平行實驗。

1.3.3.3 發(fā)酵液OD600值的測定

參考李娟[14]的方法對發(fā)酵液OD600值進行測定，并進行適當修改。1 mL發(fā)酵液于4 ℃下12 000 r/min離心5 min，分別收集上清液與菌體。向菌泥管中加入1 mL無菌水后渦旋混勻，隨后置于酶標儀測定OD600值以表征菌體生長情況。

1.3.3.4 發(fā)酵液pH值的測定

收集各時間點發(fā)酵液后迅速浸入冰水以停止發(fā)酵。隨后以精密pH計測定1.3.3.3所得上清液的pH值。

1.3.3.5 發(fā)酵液糖余量測定

各時間點發(fā)酵液的糖余量以苯酚硫酸法進行測定[9]。

1.3.3.6 發(fā)酵液SCFAs含量測定

取1 mL發(fā)酵上清液進行SCFAs的提取。以乙醚萃取發(fā)酵液中SCFAs，經無水Na2SO4除水后，過0.22 μm有機相濾膜后注入液相小瓶中待測。預處理與上機條件參考了WANG等[15]的研究方法。

1.3.3.7 黃酒低聚糖對小鼠腸道特定菌群生長情況的影響

按說明書要求對雙歧桿菌、乳桿菌、擬桿菌與大腸桿菌檢測培養(yǎng)基進行配制，隨后于121 ℃下滅菌20 min備用。取不同時間點的發(fā)酵液并以生理鹽水進行梯度稀釋，取合適稀釋度的100 μL稀釋液均勻涂布于不同的選擇培養(yǎng)基上[16]。將平板置于厭氧工作站37 ℃恒溫培養(yǎng)48 h。培養(yǎng)結束后進行平板計數(shù)。

1.3.4 數(shù)據(jù)分析

本研究各實驗設置3組平行，使用GraphPad Prism 8進行統(tǒng)計分析，所有數(shù)據(jù)均表示為平均值±標準差。多重比較之間的差異采用單因素方差分析和Fisher′s LSD檢驗進行分析，P<0.05被認為是顯著的。

2 結果與分析

2.1 黃酒低聚糖提取率

通過苯酚硫酸法及DNS法測得黃酒原液中低聚糖含量為(13.88±0.02)g/L。各步驟黃酒低聚糖提取率及回收率如表1所示。經圖1系列步驟操作后，黃酒低聚糖提取率達(31.80±0.89)%，黃酒低聚糖回收率為72.49%～86.44%。在醇沉階段，部分低聚糖仍溶于上清液中，未能完全被乙醇沉淀；在Sevage試劑除蛋白階段，有機相與水相分層處的糖液未能完全收集，存在一定損失；超濾與納濾階段的損失主要歸因于卷式膜過濾機內部及濾膜內殘存部分低聚糖；低聚糖凍干粉的質量略低于過膜后所測糖液質量，原因可能是部分糖粉殘留于凍干盤難以徹底刮凈。

表1 黃酒低聚糖的提取率及回收率

2.2 黃酒低聚糖的純化

2.2.1 DEAE Sepharose Fast Flow分離純化黃酒低聚糖

采用DEAE Sepharose Fast Flow對黃酒低聚糖溶液進行分離純化。如圖2-a所示，粗黃酒低聚糖經DEAE Sepharose Fast Flow層析柱洗脫后可得4種不同低聚糖組分(Huangjiu oligosaccharides，HJO)HJO-1，HJO-2，HJO-3與HJO-4。其中HJO-1含量占比(76.19±0.90)%，HJO-2含量占比(7.63±0.58)%，HJO-3含量占比(5.85±0.37)%，HJO-4含量占比(10.33±0.68)%?？紤]到收集時間成本與脫鹽成本，本實驗選用HJO-1進行后續(xù)分離純化，測得HJO-1的提取率達(66.23±1.03)%。

2.2.2 Sephadex G15分離純化黃酒低聚糖

利用Sephadex G15對HJO-1組分進行后續(xù)分離純化。如圖2-b所示，本次洗脫共洗脫出兩種低聚糖HJO-a與HJO-b。其中HJO-a含量占比為(94.40±0.70)%，HJO-b含量占比為(5.60±0.16)%?？紤]到收集時間成本，本研究多次收集HJO-a進行冷凍干燥，并測得HJO-a的提取率為(82.10±4.18)%。將提取到的HJO-a用于體外菌群增殖實驗。

a-DEAE Sepharose Fast Flow；b-Sephadex G15

2.2.3 黃酒低聚糖的分子質量分布與單糖組成

由圖3-a可知，經DEAE-Sepharose Fast Flow層析柱純化出的HJO-a均一性良好，峰形單一且對稱。標準曲線計算得到其重均分子質量為1 002 Da；由圖3-b可知，黃酒低聚糖HJO-a主要由葡萄糖(81.74%)、阿拉伯糖(6.13%)、甘露糖(5.51%)、木糖(4.92%)與半乳糖(1.70%)等5種單糖組成，其百分摩爾比已在文中標出。

a-分子質量；b-單糖組成

2.3 黃酒低聚糖對腸道菌群體外增殖評價

2.3.1 黃酒低聚糖的組成

測得黃酒低聚糖糖粉中低聚糖含量為(84.21±0.16)%，還原糖含量為(4.76±0.17)%，蛋白質(凱氏定氮法[9])含量為(6.51±0.14)%，水分(《食品安全國家標準 食品中水分的測定》GB 5009.3—2016)含量為(3.13±0.04)%。

2.3.2 發(fā)酵液pH值的變化

pH值是反映糖類物質在酵解過程中被人體腸道菌群利用程度的重要指標[13]，益生元可通過降低腸道pH值來抑制病原菌的繁殖[17]。如圖4-a所示，對照組、低聚果糖組與黃酒低聚糖組發(fā)酵液的pH值均隨發(fā)酵時間的延長而降低。其中以低聚果糖為碳源的發(fā)酵液pH下降最快，黃酒低聚糖組次之，而對照組下降最慢。前12 h發(fā)酵液pH變化較大，這表明菌群生長較為旺盛。24～48 h發(fā)酵液pH幅度較小，這表明菌群代謝較慢或基本停滯。低聚糖已被報道可促進腸道內乳桿菌與雙歧桿菌等益生菌的增殖[4]。添加低聚果糖與黃酒低聚糖的發(fā)酵液pH下降較快的原因可能是定向促進了腸內雙歧桿菌等益生菌的增殖，進而增加乳酸與SCFAs的含量，最終實現(xiàn)pH的快速降低。與低聚果糖相比，黃酒低聚糖組發(fā)酵液pH下降較慢，這可能是由于黃酒低聚糖的平均聚合度比低聚果糖稍大。

2.3.3 發(fā)酵液菌群密度的變化

OD600值可反映菌體密度，表征小鼠腸道菌群在不同碳源培養(yǎng)基中的生長情況[8]。如圖4-b所示，隨發(fā)酵時間的增加，對照組、低聚果糖組與黃酒低聚糖組的菌體密度均隨發(fā)酵時間的延長而逐漸增加。與低聚果糖和黃酒低聚糖組相比，前4 h對照組菌群增長速率較高，這可能是由于葡萄糖為單糖，易于被腸道菌群優(yōu)先利用。與葡萄糖相比，低聚果糖與黃酒低聚糖聚合度相對較高，需被腸道菌群逐步酵解后再利用，因此在前4 h低聚果糖與黃酒低聚糖菌群密度較對照組低。在4～24 h內，黃酒低聚糖與低聚果糖的菌群密度高于對照組，這表明低聚糖逐步被腸道菌群降解，隨后用于菌群生長繁殖。在24～48 h內，菌群代謝緩慢，這可能是由于營養(yǎng)物質基本耗盡，菌群生長進入穩(wěn)定期。

2.3.4 發(fā)酵液糖余量的變化

腸道菌群對不同碳源的消耗速率存在差異[8]。如圖4-c所示，隨發(fā)酵時間增加，對照組、低聚果糖組與黃酒低聚糖組的總糖余量均隨發(fā)酵時間的延長而逐漸降低。相比于低聚果糖組與黃酒低聚糖組，在前4 h腸道菌群對葡萄糖的消耗速率更快，這與圖4-b菌群生長曲線一致。在4～24 h，各組總糖余量相差不大，這表明黃酒低聚糖與低聚果糖被腸道菌群酵解后利用。除聚合度的影響外，糖的組成種類、單糖組成、鏈連接方式等因素也對糖消耗速率存在影響，如蕎麥蜂花粉多糖在酵解24 h后可基本被消耗[14]，在相同時間下車前子多糖僅能酵解47.2%，豌豆纖維僅能酵解20%[14]。

a-pH；b-OD600值；c-總糖余量

2.3.5 發(fā)酵過程中不同時間點發(fā)酵液SCFAs的變化

較低的pH會影響腸道菌群的組成，進而影響SCFAs的產生。本研究利用氣相色譜-質譜聯(lián)用法對發(fā)酵液中SCFAs含量進行測定。如圖5所示，隨發(fā)酵時間的增加，發(fā)酵液中乙酸、丙酸、丁酸與異丁酸含量均表現(xiàn)為逐漸增加的趨勢。在發(fā)酵過程，黃酒低聚糖組在不同發(fā)酵時間點乙酸與丁酸的含量均顯著高于對照組(圖5-a、圖5-c，P<0.05)；除4 h與8 h，黃酒低聚糖組在不同發(fā)酵時間點丙酸的含量均顯著高于對照組(圖5-b，P<0.05)，這可能是由于部分丙酸被腸道菌群利用所致；此外，除4 h時間點，黃酒低聚糖組在不同發(fā)酵時間點異丁酸的含量均顯著高于對照組(圖5-d，P<0.05)，這可能是由于黃酒低聚糖聚合度較高，發(fā)酵速率較慢所致。在發(fā)酵過程中，低聚果糖組發(fā)酵液中乙酸與丙酸含量略高于黃酒低聚糖組，而黃酒低聚糖組丁酸與異丁酸含量則稍高于低聚果糖組。

a-乙酸；b-丙酸；c-丁酸；d-異丁酸

SCFAs是腸道微生物酵解難消化的碳水化合物的主要產物[18]，在降低腸道pH值、調節(jié)宿主代謝、細胞增殖和免疫調節(jié)方面發(fā)揮重要作用。此外，SCFAs 可被宿主吸收，被認為是宿主腸道的重要能量來源[14]。據(jù)報道，喂食含低聚半乳糖的豬飼料可顯著提高豬回腸中SCFAs含量[19]，并增加糞便中雙歧桿菌與乳桿菌的含量；殼寡糖干預可增加便秘小鼠腸道SCFAs含量，并增加腸道乳桿菌與擬桿菌等菌屬的豐度[20]。因此，可推測黃酒低聚糖對SCFAs的增加可能對機體表現(xiàn)出一定的益生作用。

2.3.6 發(fā)酵過程中不同時間點發(fā)酵液特定菌群數(shù)量的變化

為探究黃酒低聚糖的益生特性，本研究對不同時間點發(fā)酵液中雙歧桿菌、乳桿菌、擬桿菌與大腸桿菌數(shù)量進行檢測，如表2所示。

表2 不同碳源對發(fā)酵過程中不同時間點發(fā)酵液特定菌群數(shù)量的變化 單位：lgCFU/mL

與對照組相比，黃酒低聚糖與低聚果糖顯著增加了不同時間點發(fā)酵液中雙歧桿菌、乳桿菌與擬桿菌的數(shù)量(P<0.05)，同時顯著降低了大腸桿菌的數(shù)量(P<0.05)。在本實驗中，黃酒低聚糖與低聚果糖效果相近，這表明黃酒低聚糖可發(fā)揮類似的益生作用。

在人體腸道菌群中，雙歧桿菌、乳桿菌與擬桿菌為重要的腸道益生菌[8,10]。腸道雙歧桿菌可參與機體多種消化酶、氨基酸、SCFAs與維生素的合成，進而發(fā)揮抗衰老、抗腫瘤、減輕腸道炎癥等功效[21]。此外，雙歧桿菌還可抑制致病菌的增殖及毒素的侵襲[16]；乳桿菌可發(fā)揮代謝產SCFAs、降低膽固醇、促進機體對礦物質的吸收等功效，從而維持腸道微生態(tài)平衡[16,22]；擬桿菌是對人體有益的共生菌，已被證明可產生SCFAs，促進機體吸收并增強機體免疫[16,23]；大腸桿菌為條件致病菌，一定條件下可誘發(fā)機體疾病，降低機體免疫力[10]。由此可推測，黃酒低聚糖對腸道菌群存在積極的調節(jié)作用，有望提取黃酒低聚糖作為膳食干預劑對腸道疾病進行靶向治療。

3 結論

本研究首次對黃酒中低聚糖進行分離純化，并進行體外菌群增殖評價，主要結論如下：

(1)本研究通過75%乙醇醇沉、Sevage法除蛋白及膜分離法從黃酒中提取黃酒低聚糖。經瓊脂糖凝膠柱DEAE Sepharose Fast Flow及Sephadex G15分離純化后得到主要的黃酒低聚糖組分HJO-a，其純度可達(84.21±0.16)%；(2)與葡萄糖相比，以黃酒低聚糖為碳源的培養(yǎng)液可顯著增加發(fā)酵液中SCFAs的含量(P<0.05)，并有效促進發(fā)酵液中腸道益生菌雙歧桿菌、乳桿菌與擬桿菌的增殖(P<0.05)，并顯著降低了條件致病菌大腸桿菌的含量(P<0.05)；(3)與低聚果糖相比，黃酒低聚糖對腸道菌群的增殖可發(fā)揮類似的調節(jié)作用，這揭示黃酒低聚糖可作為潛在的益生元被腸道菌群利用。