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        HPV亞型分布、病毒載量與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的相關(guān)性分析

        2022-09-29 07:00:46王麗媛
        當代醫(yī)藥論叢 2022年18期
        關(guān)鍵詞:載量亞型分化

        王麗媛,韓 燁

        (1. 泗洪縣疾病預(yù)防控制中心,江蘇 泗洪 223900 ;2. 泗洪醫(yī)院婦產(chǎn)科,江蘇 泗洪 223900)

        宮頸癌是一種較為常見的婦科惡性腫瘤,近年來其發(fā)病年齡呈現(xiàn)年輕化趨勢,嚴重威脅女性的生命健康[1]。研究顯示,宮頸癌發(fā)生發(fā)展的病理因素與高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)感染具有一定的相關(guān)性[2]。HPV 是—種環(huán)狀的雙鏈DNA 病毒,HR-HPV病毒DNA 多以整合的形式存在于機體細胞中。目前HR-HPV 感染已被公認為是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的主要因素[3]。據(jù)統(tǒng)計,有80% 以上的女性存在HPV 感染,大多數(shù)HPV 感染可自行消除,少數(shù)HPV 感染會持續(xù)存在,引起宮頸細胞病變,從而進展為宮頸癌。研究指出,HPV 病毒載量與宮頸病變的嚴重程度存在一定的相關(guān)性,隨著HPV 病毒載量的不斷增加,宮頸病變的危險性也會逐漸加大。但目前國內(nèi)外關(guān)于宮頸癌與HPV 亞型分布、病毒載量及臨床分期、病理分化程度相關(guān)性的研究報道較少。鑒于此,本研究探討了HPV 亞型分布、病毒載量與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的相關(guān)性,旨在為宮頸癌患者的病情評估及HPV 疫苗接種提供參考依據(jù)。

        1 資料與方法

        1.1 基線資料

        本文的研究對象是2017 年1 月至2020 年7 月泗洪醫(yī)院收治的60 例宮頸癌患者。其年齡為23 ~65 歲,平均(52.46±7.82)歲;國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)分期:Ⅰ期12 例,Ⅱ期30 例,Ⅲ期18 例;組織學(xué)分化程度:低分化9 例,中分化36 例,高分化15 例。本研究通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會許可,且患者均簽署了知情同意書。

        1.2 納入及排除標準

        納入標準:1)經(jīng)病理學(xué)檢查確診為宮頸癌者;2)未行手術(shù)、放化療及靶向治療者;3)未合并其他威脅生命安全疾病者。排除標準:1)患轉(zhuǎn)移性宮頸癌者;2)合并精神異常者;3)異常陰道出血者;4)病歷資料缺失者。

        1.3 方法

        1.3.1 標本采集 指導(dǎo)患者取膀胱截石位,采集前將尿道口和宮頸口的分泌物拭去,用窺陰器將陰道撐開,充分暴露宮頸。使用棉拭子在宮頸外口輕壓,順時針旋轉(zhuǎn)拭子3 ~4 圈,取得脫落的宮頸細胞。將采樣棉拭子分裝在盛有1 mL 無菌生理鹽水的保存液中,于4℃條件下保存待檢。

        1.3.2 樣本處置 1)樣本預(yù)處理:取出待測樣本,置于離心機中離心5 min,收集沉淀物。2)DNA 提?。簩㈥幮詫φ蘸完栃詫φ辗謩e加入到2 個離心管中,加入50 μL HPV DNA 提取液,震蕩混勻后進行沸水浴操作,時間為10 min。將樣本置于離心機中離心10 min,收集上清液。3)DNA 樣品保存:立即檢測時于4℃條件下保存DNA 樣品;超過24 h 檢測時將DNA 樣品保存在-20℃條件下。

        1.3.3 PCR 擴增 配制PCR 反應(yīng)混合液,加樣后進行PCR 擴增。

        1.3.4 DNA 雜交 先對試劑進行預(yù)熱,再行基因芯片定位,然后進行預(yù)雜交、變性、中和雜交、清洗等操作。

        1.3.5 顯色 準備試劑,行酶標、清洗、顯色、風(fēng)干、檢測分析等操作。

        1.3.6 HPV 病毒載量檢測 采用基因芯片法對HPV 病毒載量進行檢測。

        1.4 觀察指標

        觀察60 例宮頸癌患者HPV 的陽性率及HPV 亞型的分布情況。HPV 陽性判斷標準[4]:HPV 陰性:信 號 強 度(INS)<11.1 ;HPV 陽 性:INS ≥11.1。HPV 亞型包括18 種高危亞型和5 種低危亞型,高危亞型為HPV16 型、18 型、31 型、33 型、35 型、39型、45 型、51 型、52 型、53 型、56 型、58 型、59 型、66 型、68 型、73 型、83 型、MM4 型,低危亞型為HPV6 型、11 型、42 型、43 型、44 型。 分 析HPV亞型與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的關(guān)系。宮頸癌臨床分期:按照FIGO 標準進行分期[5]。分析HPV病毒載量與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的關(guān)系。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

        2 結(jié)果

        2.1 60 例宮頸癌患者HPV 的陽性率及HPV 亞型的分布情況

        在60 例宮頸癌患者中,HPV 陽性患者有42 例,HPV 陰性患者有18 例,其HPV 的陽性率為70.00%(42/60)。在HPV 陽性患者中,HPV16 型患者有30例(占71.43%),HPV18 型患者有3 例(占7.14%)、HPV52 型患者有2 例(占4.76%)、HPV58 型患者有2 例(占4.76%)、HPV11 型、33 型、35 型、68 型、83 型患者有各1 例(各占2.38%)。詳見表1。

        表1 60 例宮頸癌患者HPV 的陽性率及HPV 亞型的分布情況

        2.2 HPV 亞型與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的關(guān)系

        本研究中HPV16 型是患者感染的最主要HPV亞型,故僅針對HPV16 型與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的關(guān)系進行研究。HPV16 型中,宮頸癌各臨床分期之間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);HPV16 型中,宮頸癌不同臨床病理分化程度之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。詳見表2。

        表2 HPV 亞型與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的關(guān)系(例)

        2.3 HPV 病毒載量與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的關(guān)系

        HPV 病毒載量的高低與宮頸癌各臨床分期、病理分化程度之間均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。詳見表3。

        表3 HPV 病毒載量與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的關(guān)系(例)

        3 討論

        目前臨床上關(guān)于宮頸癌的發(fā)病原因尚未完全明確,一般認為本病是由多種因素導(dǎo)致的病理結(jié)果。目前已知感染HPV 是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的獨立危險因素。HPV 的傳播途徑主要有性接觸傳播(通過性行為傳播,為HPV 最重要的傳播途徑)、間接接觸傳播(如接觸HPV 患者使用過的物品)和母嬰傳播(即垂直傳播)。HPV 在人體內(nèi)多以兩種形式存在,分別為游離和整合狀態(tài),表現(xiàn)形式為無癥狀潛伏感染、急性感染、整合狀態(tài)[6]。研究顯示,在宮頸良性病變與癌前病變中,HPV 病毒DNA 常以獨立于宿主基因的近游離形式存在[7-8];在宮頸癌中,HPV 病毒DNA 多以單拷貝或多拷貝形式整合于人體的細胞基因組中,從而導(dǎo)致宿主基因組發(fā)生改變,使宿主染色體不穩(wěn)定,激活相關(guān)癌基因,并使抑癌基因失活,從而導(dǎo)致細胞因增殖、凋亡而發(fā)生癌變[9]。目前國內(nèi)外關(guān)于HPV 感染、病毒載量與宮頸癌發(fā)病的研究報道較少。國外文獻報道,有50% 左右的宮頸癌患者可檢測出HPV 感染[10]。現(xiàn)階段,關(guān)于HPV 病毒載量與宮頸癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性存在一定的爭議[11]。通常認為,HPV 病毒載量越高,HPV 的DNA 復(fù)制越活躍,機體的HPV越難被清除,從而可引起持續(xù)性HPV 感染[12-13]。因此,一些學(xué)者認為HPV 病毒載量可預(yù)測HPV 感染患者宮頸病變的程度。研究顯示,HPV 感染與宮頸鱗癌的臨床病理無相關(guān)性[14]。本研究的結(jié)果顯示,60 例宮頸癌患者HPV 的陽性率為70.00%(42/60),其中HPV16 型占71.43%。不同HPV 亞型在宮頸癌病理分化程度中的分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但在FIGO 分期中的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。相關(guān)的研究指出,HPV 亞型在不同地域存在較大的差異性,HPV16 型的平均感染率約為60%,其次為HPV18 型[15]。HPV-DNA 整合到宿主基因組后,在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。HPV 病毒載量在不同的感染階段會出現(xiàn)動態(tài)變化。當HPV 基因組機會性整合進人體基因組后,會導(dǎo)致L1 區(qū)域出現(xiàn)缺失,使病毒載量的檢測水平低于實際的載量水平。研究認為,HPV 病毒載量是宮頸癌發(fā)生風(fēng)險的標志物,且存在型別依賴性,HPV16 型和HPV18 型病毒載量可有效預(yù)測有無HPV 感染[16]。本研究的結(jié)果顯示,不同HPV 病毒載量在宮頸癌病理分化程度、FIGO 分期中的分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。這與相關(guān)文獻報道[17-18]的HPV 病毒載量與宮頸癌病變程度不具相關(guān)性基本一致。原因可能是第二代雜交捕獲試驗(HC- Ⅱ)僅可檢測到游離的HPV,而無法檢測到非基因整合狀態(tài)的HPV。

        綜上所述,宮頸癌患者感染的HPV 以HPV16 亞型為主。HPV 亞型分布與宮頸癌的病理分化程度有關(guān),與臨床分期無關(guān);HPV 病毒載量與宮頸癌臨床分期、病理分化程度均無明顯相關(guān)性。本研究可為HPV 疫苗的接種提供理論依據(jù)。但由于本研究中病例數(shù)較少,可能導(dǎo)致研究結(jié)果出現(xiàn)偏差。在接下來的研究中將繼續(xù)加大樣本量,對HPV 亞型分布、病毒載量與宮頸癌臨床分期及病理分化程度的相關(guān)性進行進一步的探討。

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