鞏喜軍，趙崎光，陸 麒，魏學(xué)榮，吳愛景，才 輝，楊靈通，成 魁，劉曉宇

（蘭州蘭生血液制品有限公司，蘭州 730046）

0 引言

血液制品特指人血漿蛋白類制品，其生產(chǎn)包括從原料血漿接收、入庫(kù)貯存、復(fù)檢、血漿分離、血液制品制備、檢定到成品入庫(kù)的全過(guò)程[1]。血液制品屬于無(wú)菌藥品，其生產(chǎn)所用的物料、器具均需要經(jīng)過(guò)滅菌處理。血液制品在配制、灌裝等暴露生產(chǎn)時(shí)應(yīng)當(dāng)最大限度降低微生物、各種微粒和熱原的污染。設(shè)備設(shè)施的驗(yàn)證、生產(chǎn)工藝系統(tǒng)的無(wú)菌是確保血液制品最終無(wú)菌的關(guān)鍵因素。

KSZ620/43B型隧道烘箱是一臺(tái)自動(dòng)化除菌除熱原設(shè)備，是采用層流原理和熱空氣高速消毒工藝，使容器在潔凈度為A級(jí)的密封隧道內(nèi)完成干燥、滅菌、去熱原和冷卻的無(wú)菌生產(chǎn)工藝流程。其整個(gè)輸送隧道是一個(gè)密閉的整體組合件，按結(jié)構(gòu)可分為三部分，第一部分為預(yù)熱段，第二部分為加熱段，第三部分為冷卻段[2]。該設(shè)備位于灌封機(jī)前部、洗瓶機(jī)后部，可與洗瓶機(jī)、灌封機(jī)組成一條完整的洗、烘、灌、封自動(dòng)生產(chǎn)線。與其他隧道烘箱相比，該設(shè)備應(yīng)用了風(fēng)機(jī)微壓差檢測(cè)、風(fēng)門自動(dòng)升降、水冷等新技術(shù)，在干熱效果的實(shí)現(xiàn)中，不會(huì)引入其他雜質(zhì)[3]，且實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)控溫、穩(wěn)壓，實(shí)施條件穩(wěn)定、易控，便于生產(chǎn)操作和維修保養(yǎng)，有效提高了滅菌效率?！端幤飞a(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》規(guī)定“企業(yè)的廠房、設(shè)施、設(shè)備和檢驗(yàn)儀器應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)確認(rèn)”，因此本文采用KSZ620/43B型隧道烘箱對(duì)中硼硅玻璃輸液瓶的除菌除熱原進(jìn)行確認(rèn)和試運(yùn)行試驗(yàn)[4]，以確保該設(shè)備符合無(wú)菌制劑生產(chǎn)工藝要求。

1 材料和方法

1.1 材料

KSZ620/43B型隧道烘箱購(gòu)自楚天科技股份有限公司，外形尺寸為3 680 mm×1 700 mm×2 350 mm（長(zhǎng)×寬×高），總質(zhì)量4 200 kg，腔室內(nèi)為A級(jí)環(huán)境，隧道寬600 mm，傳送帶最大傳輸速度160 mm/min，正常傳輸速度110 mm/min；預(yù)熱段長(zhǎng)580 mm，溫度＜100℃；滅菌段長(zhǎng)1 320 mm，溫度為（320±5）℃；冷卻段1長(zhǎng)780 mm，溫度為60～120℃，冷卻段2長(zhǎng)1 000 mm，溫度＜25℃。2635A型多通道數(shù)據(jù)采集器購(gòu)自美國(guó)福祿克公司[5]。中硼硅玻璃輸液瓶（規(guī)格50 mL）購(gòu)自山東藥用玻璃股份有限公司。內(nèi)毒素指示劑（效價(jià)1 250 EU/支）購(gòu)自湛江安度斯生物有限公司。

1.2 方法

1.2.1 設(shè)計(jì)確認(rèn)（design qualification，DQ）

DQ需確認(rèn)KSZ620/43B型隧道烘箱的設(shè)計(jì)是否符合預(yù)定用途和《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》要求，功能要求（生產(chǎn)能力、電容量、微粒測(cè)試、空載熱分布、熱穿透、內(nèi)毒素減少等）設(shè)計(jì)是否符合用戶需求說(shuō)明（user requirment specification，URS）；檢查DQ方案是否已被審核、批準(zhǔn)；確認(rèn)外形圖、管道和儀表控制流程圖、材料清單、電氣原理圖、功能說(shuō)明、硬件設(shè)計(jì)說(shuō)明和軟件設(shè)計(jì)說(shuō)明等文件是否已完成。

1.2.2 安裝確認(rèn)（installation qualification，IQ）

IQ是證明設(shè)備的建造和安裝是否符合設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)，確認(rèn)設(shè)備安裝是否符合規(guī)定，是否能滿足生產(chǎn)的需要。檢查設(shè)備的資料（設(shè)計(jì)圖紙、使用說(shuō)明書、技術(shù)圖紙、材質(zhì)證明書、電氣原理及接線圖、材料清單、合格證等）是否齊全并存檔；確認(rèn)安裝是否符合設(shè)備要求，使其正常運(yùn)行；檢查并確認(rèn)儀器儀表的校驗(yàn)情況；確認(rèn)設(shè)備的維護(hù)計(jì)劃，檢查制造材料和產(chǎn)品接觸表面的材質(zhì)證明，檢查水電氣管路連接是否正確；對(duì)設(shè)備供應(yīng)商提供的配件進(jìn)行檢查并記錄。

1.2.3 運(yùn)行確認(rèn)（operational qualification，OQ）

OQ前需檢查IQ是否完成，設(shè)備儀表是否校驗(yàn)，設(shè)備操作、清潔和維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（standard operation procedure，SOP）是否起草完成，操作培訓(xùn)是否完成。OQ主要確認(rèn)安全設(shè)備、報(bào)警裝置、聯(lián)鎖裝置是否正常工作；進(jìn)行設(shè)備基本操作的確認(rèn)[6]，在空載情況下按照使用說(shuō)明書進(jìn)行開機(jī)啟動(dòng)，確認(rèn)各段溫度和壓差、高效過(guò)濾器的完整性、腔室內(nèi)塵埃粒子是否符合要求，報(bào)警信號(hào)是否正常，運(yùn)轉(zhuǎn)是否平穩(wěn)、無(wú)異常噪聲和振動(dòng)，電器的絕緣和耐壓是否符合GB 5226—2008規(guī)定。

1.2.4 性能確認(rèn)（performance qualification，PQ）

PQ前應(yīng)確認(rèn)IQ和OQ是否完成，如有偏差是否得到解決，檢查儀器儀表是否都校驗(yàn)。按照工藝過(guò)程和質(zhì)控要求，PQ分別從熱分布、熱穿透和細(xì)菌內(nèi)毒素挑戰(zhàn)3個(gè)方面對(duì)中硼硅玻璃輸液瓶干熱滅菌效果進(jìn)行驗(yàn)證[7]，確認(rèn)設(shè)備是否滿足生產(chǎn)工藝要求。

1.2.4 .1熱分布試驗(yàn)

設(shè)定滅菌溫度為320℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為110 mm/min，按隧道烘箱操作程序運(yùn)行設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后以隧道烘箱輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個(gè)溫度測(cè)試探頭（以下簡(jiǎn)稱“探頭”）依次均勻放置在網(wǎng)帶同一截面上，探頭隨網(wǎng)帶移動(dòng)進(jìn)入、移出烘箱滅菌段、冷卻段，用檢測(cè)儀直接測(cè)試各探頭的溫度，連續(xù)檢測(cè)3次。合格標(biāo)準(zhǔn)：滅菌過(guò)程中各探頭溫差小于5℃。

1.2.4 .2熱穿透試驗(yàn)

熱穿透試驗(yàn)時(shí)隧道烘箱保持滿載運(yùn)行，將已清洗的中硼硅玻璃輸液瓶瓶口朝上，將探頭插入并用耐高溫膠布固定在輸液瓶?jī)?nèi)。設(shè)置自動(dòng)溫度記錄儀每30 s記錄一次溫度值，設(shè)定滅菌溫度為320℃，網(wǎng)帶運(yùn)行速度為110 mm/min，按隧道烘箱操作程序運(yùn)行設(shè)備，當(dāng)溫度升至設(shè)定滅菌溫度后，以隧道烘箱輸送網(wǎng)帶為邊界，將10個(gè)探頭依次均勻放置在網(wǎng)帶同一截面上，探頭隨網(wǎng)帶移動(dòng)進(jìn)入、移出烘箱滅菌段、冷卻段，用檢測(cè)儀直接測(cè)試各探頭的溫度，連續(xù)檢測(cè)3次。合格標(biāo)準(zhǔn)：每個(gè)探頭的滅菌FH值（干熱滅菌的殺菌熱力強(qiáng)度）＞1 365[8]。

1.2.4 .3內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗(yàn)

干熱法能夠?qū)崿F(xiàn)滅菌、除熱原的雙重效果。在隧道烘箱滅菌、除熱原的效果評(píng)價(jià)中，內(nèi)毒素的衰減是重要的評(píng)價(jià)方式，其效果直接與環(huán)境溫度有關(guān)，一般采用≥300℃的溫度[9]。

在進(jìn)行隧道烘箱滿載熱穿透試驗(yàn)的同時(shí)，做細(xì)菌內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗(yàn)。根據(jù)指示劑應(yīng)放在裝載物內(nèi)的數(shù)個(gè)地方（包括除菌、除熱原效果最差的點(diǎn)位）的原則，在輸液瓶?jī)?nèi)放入1 250 EU的驗(yàn)證用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌內(nèi)毒素，將裝好標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌內(nèi)毒素的輸液瓶與插入溫度探頭的中硼硅玻璃輸液瓶放在一起，并對(duì)滅菌后的各內(nèi)毒素指示劑進(jìn)行檢驗(yàn)，同時(shí)做陽(yáng)性對(duì)照。合格標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)干燥滅菌后，用靈敏度為0.125 EU/mL的鱟試劑進(jìn)行測(cè)定，陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)為陽(yáng)性，樣品檢驗(yàn)應(yīng)為陰性，即內(nèi)毒素下降3個(gè)對(duì)數(shù)單位以上[10]。

1.2.5 試運(yùn)行試驗(yàn)

按照《無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌制劑）》對(duì)KSZ620/43B型隧道烘箱連續(xù)進(jìn)行3批培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)，并對(duì)合格瓶數(shù)、污染瓶數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，判定對(duì)中硼硅玻璃輸液瓶的干熱滅菌效果是否符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的要求。

1.2.6 不同生產(chǎn)規(guī)模下設(shè)備運(yùn)行情況

利用KSZ620/43B型隧道烘箱分別生產(chǎn)500、1 000、2 000瓶血液制品，通過(guò)無(wú)菌藥品的無(wú)菌和熱原檢查是否合格考察KSZ620/43B型隧道烘箱對(duì)中硼硅玻璃輸液瓶的干熱滅菌情況[11]。

2 結(jié)果

2.1 DQ結(jié)果

KSZ620/43B型隧道烘箱功能要求（生產(chǎn)能力、電容量、微粒測(cè)試、空載熱分布、熱穿透、內(nèi)毒素減少）設(shè)計(jì)符合URS，DQ方案已被審核、批準(zhǔn)；外形圖、管道和儀表控制流程圖、材料清單、電氣原理圖、功能說(shuō)明、硬件設(shè)計(jì)說(shuō)明和軟件設(shè)計(jì)說(shuō)明等文件已完成。

2.2 IQ結(jié)果

所有執(zhí)行確認(rèn)的人員均已得到培訓(xùn)；設(shè)備的設(shè)計(jì)圖紙、電氣原理及接線圖、材料清單等全部齊全，設(shè)備已按照設(shè)計(jì)圖紙安裝就位，安裝穩(wěn)固，線路連接完好，外觀完整無(wú)缺損，儀器儀表校驗(yàn)、維護(hù)計(jì)劃、潤(rùn)滑等均已完成。

2.3 OQ結(jié)果

IQ、設(shè)備操作、清潔和維護(hù)SOP的起草、操作培訓(xùn)已完成。設(shè)備報(bào)警裝置、聯(lián)鎖裝置正常工作，空載各段溫度、壓差、高效過(guò)濾器的完整性符合要求，腔室內(nèi)符合A級(jí)潔凈室要求，運(yùn)轉(zhuǎn)平穩(wěn)無(wú)異常，且電器的絕緣和耐壓符合GB 5226—2008規(guī)定。

2.4 PQ結(jié)果

確認(rèn)IQ和OQ已完成，無(wú)偏差，儀器儀表已校驗(yàn)。穩(wěn)定產(chǎn)能20瓶/min（50 mL/瓶），出瓶溫度≤25℃。熱分布試驗(yàn)腔體內(nèi)各探頭最大溫差小于5℃（見表1～3）；熱穿透試驗(yàn)各探頭溫度FH值均＞1 365（見表4～6）；內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗(yàn)所有內(nèi)毒素檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，陽(yáng)性對(duì)照檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性（見表7）。綜上表明PQ均符合要求。

表1 第1次熱分布試驗(yàn)結(jié)果單位：℃

表4 第1次熱穿透試驗(yàn)FH值

表7 內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗(yàn)結(jié)果

2.5 試運(yùn)行試驗(yàn)結(jié)果

按照《無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌制劑）》連續(xù)進(jìn)行的3批培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)合格率為100%，試驗(yàn)零污染（見表8），判定KSZ620/43B型隧道烘箱對(duì)中硼硅玻璃輸液瓶的干熱滅菌效果符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的要求。

表8 試運(yùn)行試驗(yàn)結(jié)果

2.6 不同生產(chǎn)規(guī)模下設(shè)備運(yùn)行結(jié)果

分別生產(chǎn)500、1 000、2 000瓶3種規(guī)模的血液制品，無(wú)菌檢查和熱原檢查結(jié)果顯示合格率為100%（見表9），判定KSZ620/43B型隧道烘箱對(duì)中硼硅玻璃輸液瓶的干熱滅菌效果符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的要求。

表9 不同生產(chǎn)規(guī)模下設(shè)備運(yùn)行效果

3 結(jié)語(yǔ)

血液制品為靜脈注射用無(wú)菌藥品，在生產(chǎn)時(shí)應(yīng)當(dāng)最大限度降低微生物、各種微粒和熱原的污染。而血液制品的容器中硼硅玻璃輸液瓶廣泛采用干熱法實(shí)現(xiàn)除菌、除熱原。本文按照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的要求，對(duì)KSZ620/43B型隧道烘箱進(jìn)行了確認(rèn)及試運(yùn)行工作，確認(rèn)了KSZ620/43B型隧道烘箱的設(shè)計(jì)、安裝和性能均符合藥品生產(chǎn)及工藝的要求，且對(duì)中硼硅玻璃輸液瓶的干熱滅菌效果符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的要求，能夠用于血液制品內(nèi)包材中硼硅玻璃輸液瓶的除菌、除熱原。

表2 第2次熱分布試驗(yàn)結(jié)果單位：℃

表3 第3次熱分布試驗(yàn)結(jié)果單位：℃

表5 第2次熱穿透試驗(yàn)FH值

表6 第3次熱穿透試驗(yàn)FH值