牟三旦

（青海省海東市農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測中心，青海 海東 810699）

0 引言

當(dāng)前牲畜口蹄疫沒有針對性的治療藥物，臨床上主要采用綜合措施進(jìn)行防控，其中疫苗免疫接種是防范口蹄疫疾病發(fā)生流行的最主要的措施。當(dāng)前為了更好的防范家畜口蹄疫疾病的發(fā)生流行，我國實(shí)施了強(qiáng)制性免疫接種政策，要求每年春秋兩季必須對豬、牛、羊等家畜進(jìn)行免疫接種，保守免疫接種密度達(dá)到100%，動(dòng)物的抗體水平達(dá)到70%以上。為了進(jìn)一步掌握家畜口蹄疫疫病的免疫接種效果為今后疫病防控奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，分別于2018、2019和2020年，開展了家畜口蹄疫苗免疫抗體監(jiān)測，進(jìn)一步評估免疫效果。

1 材料與方法

1.1 定點(diǎn)免疫

一般情況下牲畜口蹄疫疫苗免疫接種主要在40～60日齡進(jìn)行首次免疫接種，每頭牛使用2 mL，豬、羊每頭使用1 mL，首次免疫接種30 d之后進(jìn)行第2次強(qiáng)化免疫接種，每頭牲畜使用2 mL。本次研究分別于2018年2019年和2020年采集了青海省海東市集約化規(guī)?；B(yǎng)殖場和散養(yǎng)養(yǎng)殖戶的豬、牛、羊新鮮血清各220份。血清采集一般在豬、牛、羊免疫接種3個(gè)月之后進(jìn)行。采集到的血液常規(guī)方法份離得到血清，--20 ℃保存等待檢測[1]。

1.2 檢測方法

本次研究主要選擇使用由韓國Jeno Biotech Inc生產(chǎn)的口體與O型抗體檢測試劑盒和亞洲一型抗體檢測試劑盒。并且在檢測過程中配置了酶標(biāo)儀，多道移液器和單道移液器。在檢測過程中，先將80 μL的樣本稀釋后加入到各個(gè)樣品孔中，然后再加入2 μL的血清樣本，設(shè)置陰性對照組和陽性對照組，蓋上酶標(biāo)板后，在室溫環(huán)境下孵育1 h。用沖洗液對其進(jìn)行3次沖洗，用吸水紙進(jìn)行拍干處理，然后再向各個(gè)孔當(dāng)中加入100 μL的酶標(biāo)復(fù)合物蓋，住酶標(biāo)板，室溫環(huán)境下繼續(xù)孵育1 h。按照上述方法再進(jìn)行3次的清洗，用吸水紙拍干之后，向各個(gè)孔當(dāng)中加入100 μL的發(fā)色劑，蓋住酶標(biāo)板之后，室溫環(huán)境下孵育15 min，然后向各個(gè)孔當(dāng)中加入50 μL的反應(yīng)終止液，終止反應(yīng)之后讀取450 nm的吸光值，根據(jù)吸光值來判定抗體水平[2]。樣品的吸光值和陰性對照組的吸光值相比大于0.6表示為陰性，小于等于0.6表示為陽性。

2 結(jié)果

2.1 豬口蹄疫抗體監(jiān)測結(jié)果

本次研究過程中，從集約化規(guī)?；B(yǎng)殖場和中小規(guī)模養(yǎng)殖戶當(dāng)中共采集了血清220份，其中集約化規(guī)?；B(yǎng)殖場血清108份，散養(yǎng)養(yǎng)殖戶血清112份。檢測結(jié)果能夠看出不同規(guī)模養(yǎng)殖模式之下，豬口蹄疫抗體合格率存在一定差異性，其中以集約化規(guī)?；目贵w合格率最高108份，血清當(dāng)中有 O型口蹄疫101份合格，亞洲一型口蹄疫97合格，合格率分別為93.52%、89.81%。而散養(yǎng)養(yǎng)殖群體112份血清當(dāng)中 O型口蹄疫有81份合格，亞洲一型口蹄疫83份，合格率分別為72.32%、74.11%，總的合格率為82.73%、81.82%，見表1。

表1 豬口蹄疫抗體監(jiān)測結(jié)果

2.2 牛口蹄疫抗體監(jiān)測結(jié)果

本次研究過程中，從集約化規(guī)?；ｐB(yǎng)殖場和中小規(guī)模養(yǎng)殖戶當(dāng)中共采集了血清220份，其中集約化規(guī)?；ｐB(yǎng)殖場血清106份，散養(yǎng)養(yǎng)殖戶血清114份。檢測結(jié)果能夠看出不同規(guī)模養(yǎng)殖模式之下，牛口蹄疫抗體合格率存在一定差異性，其中以集約化規(guī)?；目贵w合格率最高，106份血清當(dāng)中牛 O型口蹄疫100份合格，亞洲一型口蹄疫93合格，合格率分別為94.34%、87.74%。而散養(yǎng)養(yǎng)殖群體114份血清當(dāng)中O型口蹄疫有80份合格，亞洲一型口蹄疫81份，合格率分別為70.18%、71.05%，總的合格率為81.82%、79.09%，見表2。

表2 ?？谔阋呖贵w監(jiān)測結(jié)果

2.3 羊口蹄疫抗體監(jiān)測結(jié)果

本次研究過程中，從集約化規(guī)?；蝠B(yǎng)殖場和中小規(guī)模養(yǎng)殖戶當(dāng)中共采集了血清220份，其中集約化規(guī)?；ｐB(yǎng)殖場血清108份，散養(yǎng)養(yǎng)殖戶血清112份。檢測結(jié)果能夠看出不同規(guī)模養(yǎng)殖模式之下，?？谔阋呖贵w合格率存在一定差異性，其中以集約化規(guī)模化的抗體合格率最高，108份血清當(dāng)中牛 O型口蹄疫103份合格，亞洲一型口蹄疫101合格，合格率分別為95.37%、93.52%。而散養(yǎng)養(yǎng)殖群體112份血清當(dāng)中羊O型口蹄疫有86份合格，亞洲一型口蹄疫83份，合格率分別為76.79%、74.11%，總的合格率為85.91%、83.64%，見表3。

表3 羊口蹄疫抗體監(jiān)測結(jié)果

3 討論

口蹄疫對很多偶蹄類家畜造成的威脅相對較為嚴(yán)重，屬于重大傳染性疾病。通過實(shí)施嚴(yán)格的疫苗免疫接種，對防控該種疾病的發(fā)生流行有很大幫助，當(dāng)前我國將口蹄疫納入到了重大傳染性疾病集中免疫接種的體系中[3]，要求每年春秋兩季必須實(shí)施重大傳染性疾病免疫接種，并且要實(shí)施兩次以上的免疫接種，如此才能夠提高接種質(zhì)量和接種效率。從本次的研究情況來看，O型口蹄疫和亞洲一型口蹄疫的合格率份別在70%以上都達(dá)到了國家的相關(guān)要求，但是不同養(yǎng)殖模式下的口蹄疫合格率存在一定差異性，其中規(guī)?；B(yǎng)殖場口蹄疫的接種質(zhì)量相對較好，養(yǎng)殖場口蹄疫的抗體合格率分別在80%以上，而散養(yǎng)養(yǎng)殖戶的家畜抗體合格率在70%～80%，有待進(jìn)一步提升。在繼續(xù)做好集約化規(guī)?；B(yǎng)殖場牲畜口蹄疫集中免疫接種的基礎(chǔ)上，要將工作重點(diǎn)落實(shí)到散養(yǎng)養(yǎng)殖群體中，要下大力氣加強(qiáng)人力資源配置，保證接種密度達(dá)標(biāo)，提升散養(yǎng)養(yǎng)殖群體口蹄疫的抗體水平，防范口蹄疫這類重大傳染性疾病在養(yǎng)殖群體中的發(fā)生流行。