朱兆曾， 楊露露， 趙偉芳， 徐歆歆， 盧榮華＊

（河南師范大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院， 河南新鄉(xiāng) 453007）

鯉（Cyprinus carpio）是我國主要的淡水養(yǎng)殖品種，2021年全國鯉的產(chǎn)量為283.18萬噸[1]。 鯉的肉質(zhì)細(xì)嫩且體型優(yōu)美，也是河南省重要的魚類資源。 大豆油作為其配合飼料中常用的植物油源，能夠?yàn)闄C(jī)體提供必需的不飽和脂肪酸， 如亞油酸（linoleic acid，LA, C18:2n-6）等[2]，但考慮其價(jià)格上漲及資源量降低等問題[3]，亟需進(jìn)一步開發(fā)利用地方植物油源。

紅花在中國的年種植面積3～4萬hm2， 河南省已有2000多年的種植歷史，主要分布于新鄉(xiāng)、安陽、商丘、南陽等地區(qū)。 紅花籽油是從紅花籽中提取、且富含多不飽和脂肪酸 （Polyunsaturated fatty acids，PUFA），其中LA含量在78.54%～82.45%之間[4]；河南也是油用牡丹主要產(chǎn)地之一， 牡丹籽油同樣富含不飽和脂肪酸，且以α -亞麻酸（α-Linolenic acid，LNA，C18:3n-3）為主，LNA的含量在40%左右[5]。 研究發(fā)現(xiàn)，紅花籽油與牡丹籽油均具有抗炎、抗氧化及降血脂等作用[4,5]，但不同比例的紅花籽油及牡丹籽油作為鯉配合飼料中的脂肪源， 對其生長性能及脂肪酸組成的影響尚不明晰。 因此本試驗(yàn)設(shè)計(jì)了不同脂肪源的飼料配方， 以期為鯉飼料中脂肪源的選擇提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼料制備

本試驗(yàn)以大豆油為基礎(chǔ)脂肪源， 并和紅花籽油（衛(wèi)輝市鑫福林衛(wèi)紅花種植專業(yè)合作社，河南新鄉(xiāng)）、牡丹籽油（山東悅?cè)甾r(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，山東菏澤）單獨(dú)或聯(lián)合配制7種不同脂肪源的等氮等脂（蛋白含量38%， 脂肪含量8.5%左右） 飼料， 分別為豆油組（D1）、豆油:紅花籽油=1:1（D2）、紅花籽油（D3）、豆油:牡丹籽油=1:1（D4）、牡丹籽油（D5）、紅花籽油:牡丹籽油=1:1（D6）、豆油:紅花籽油:牡丹籽油=2:1:1（D7），飼料配方及營養(yǎng)成分詳表略。 將配方中所需飼料原料粉碎過篩后，按照配方準(zhǔn)確稱取各原料，加適量水混勻后制成直徑2.0 mm的顆粒飼料。 在陰涼通風(fēng)處晾干，裝入密封袋-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 鯉配合飼料中的主要脂肪酸組成

1.2 試驗(yàn)用魚與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)鯉購自衛(wèi)輝漁場， 暫養(yǎng)于河南師范大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖基地（中國，新鄉(xiāng)）。 開始正式試驗(yàn)前，用D1組飼料于每天的8:30、12:30、17:30飽食投喂3次，進(jìn)行為期2 w的馴化，使其適應(yīng)試驗(yàn)養(yǎng)殖環(huán)境。 正式試驗(yàn)時(shí)，挑選初體重為（28.39 ± 2.63 g）的鯉隨機(jī)分為7組，每組45尾，在河南師范大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖基地的玻璃缸（長150 cm，寬40 cm，高60 cm）中進(jìn)行為期42 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)。 養(yǎng)殖環(huán)境水溫為18 ± 1℃，溶解氧＞5 mg/L，氨基氮＜0.01 mg/L。 試驗(yàn)期間，每天通過對玻璃缸的過濾水槽和過濾棉進(jìn)行清洗和換水， 保證養(yǎng)殖環(huán)境一致。

1.3 樣品采集和處理

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，饑餓24 h用MS-222（100 mg/L）麻醉魚后，對所有的試驗(yàn)魚進(jìn)行稱重計(jì)數(shù)，計(jì)算魚體增重率（WGR）和特定生長率（SGR），并進(jìn)行尾靜脈 采 血， 常 溫 靜 置4 h 后 離 心 (4℃，3000 r/min，10 min)，取上清液，-80℃保存，用于血清中甘油三酯（Triglyceride，TG）含量的測定。 試驗(yàn)魚采完血后立即解剖， 分離內(nèi)臟團(tuán)和肝胰臟并稱重， 計(jì)算臟體比(Viscerosomatic index，VSI ) 和肝體比(Hepatosomatic index, HSI )，然后收集肝胰臟和脂肪組織于-20℃保存，用于脂肪酸成分的測定。

1.4 測定指標(biāo)與方法

生長性能和形體指標(biāo)依照以下公式進(jìn)行計(jì)算：增重率（WGR, %）=（末體重-初體重）×100/初體重

特定生長率 （SGR, %/day）=（ln末體重-ln初體重）×100/飼喂天數(shù)

臟體比（VSI, %）=內(nèi)臟重×100/全魚重量

肝體比（HSI, %）=肝臟重×100/全魚重量

飼料和肌肉水分含量測定采用國標(biāo)（GB/T 6435-2014）105℃烘干恒重法，粗脂肪含量測定采用國標(biāo)（GB/T 6433-2006）索氏抽提法，粗蛋白含量測定采用國標(biāo)（GB/T 6432-2018）凱氏定N法測定，粗灰分含量測定采用國標(biāo) （GB/T 6438-2007）550℃馬弗爐灼燒法。

飼料和肝胰臟的冷凍干燥樣品各稱取0.2～0.3 g，每組做4個(gè)重復(fù)。用氯仿/甲醇(2:1,v/v)溶液萃取樣品中脂質(zhì)，使用氣相測譜儀（Agilent 7890B，美國）測定飼料和肝胰臟的脂肪酸成分。

血清中TG含量采用試劑盒（南京建成生物科技有限公司，南京）進(jìn)行測定，測定方法嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），并用Duncan檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較，P＜0.05時(shí)表示差異顯著，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”（Mean ± SD）表示。

2 結(jié)果

2.1 紅花籽油和牡丹籽油對鯉生長性能的影響

不同比例的豆油、 紅花籽油和牡丹籽油對鯉生長性能的影響如表2所示。 與D1組相比，D3組和D4組WGR和SGR顯著升高（P＜0.05）；此外，各組的HSI和VSI均無顯著性差異（P＞0.05）。

表2 飼料中紅花籽油和牡丹籽油對鯉生長性能的影響

2.2 紅花籽油和牡丹籽油對鯉肌肉常規(guī)組分的影響

不同比例的豆油、 紅花籽油和牡丹籽油對鯉肌肉常規(guī)組分的影響如表3所示。 各組的肌肉組織中粗蛋白含量差異不顯著（P＞0.05）；但與D1組相比，其余各組的肌肉組織中粗脂肪含量均顯著降低 （P＜0.05）；此外，除D2組外其余各組的肌肉組織中粗灰分含量較D1組顯著下調(diào)（P＜0.05）。

表3 飼料中紅花籽油和牡丹籽油對鯉肌肉常規(guī)組分的影響

2.3 紅花籽油和牡丹籽油對鯉血清TG含量的影響

不同比例的豆油、 紅花籽油和牡丹籽油對鯉血清TG含量的影響如圖1所示。 與D1組相比，D2、D5、D6和D7組TG水平均顯著降低（P＜0.05），但D3和D4組TG 含量沒有顯著性變化（P＞0.05）。

圖1 鯉血清TG含量

2.4 紅花籽油和牡丹籽油對鯉肝胰臟脂肪酸組成的影響

不同比例的豆油、 紅花籽油籽和牡丹籽油對鯉肝胰臟脂肪酸組分的影響如表4所示。 與D1組相比，D4組、D5組和D6組的DHA和LNA含量均顯著升高（P＜0.05）， 且D4組、D5組和D7組的∑n6/n3-PUFA顯著降低（P＜0.05）。 鯉脂肪組織的LNA成分變化規(guī)律和肝胰臟的類似（具體結(jié)果未呈現(xiàn)）。

表4 飼料中紅花籽油和牡丹籽油對鯉肝胰臟中主要脂肪酸組成的影響

3 討論

脂肪作為飼料中的營養(yǎng)成分， 對魚體組成有重要作用。飼料中脂肪源不同，其脂肪酸組分及含量也存在一定差異。 有研究發(fā)現(xiàn)，飼料中適宜水平的LNA可提高團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)的SGR[6]；與魚油相比， 紅花籽油能夠顯著提高大菱鲆（Psetta maxima）的WGR[7]，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)相對于D1組，D3組、D4組鯉的WGR及SGR都顯著升高， 這說明適宜比例的紅花籽油與牡丹籽油可以作為鯉配合飼料中的脂肪源。有研究表明，紅花籽油與牡丹籽油具有降脂作用[5]，在尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）的研究中發(fā)現(xiàn)， 飼喂富含LNA飼料的魚體粗脂肪較豆油組有所降低[8]，本研究也發(fā)現(xiàn)，與D1組相比，其余各組的肌肉組織中粗脂肪含量均顯著降低， 與上述降脂作用類似。

血清中TG含量是檢測機(jī)體脂質(zhì)代謝的常用指標(biāo)。 本研究發(fā)現(xiàn)，除D3組和D4組外，其余各組的血清TG含量均較D1組顯著降低，說明飼料中添加適宜比例的紅花籽油與牡丹籽油可能起到一定的降血脂效果[5,9]，在小鼠及人的研究中也發(fā)現(xiàn)兩種油脂均能降低血清TG含量[10,11]。

肝胰臟是鯉脂質(zhì)代謝的重要場所。 本研究結(jié)果顯示各組的肝胰臟脂肪酸成分具有一定差異性，這與飼料配方中脂肪酸組成的差異性有關(guān)[12]。 肝胰臟脂肪酸檢測結(jié)果顯示， 含牡丹籽油的各組中其LNA比例顯著高于D1組， 這和牡丹籽油中富含LNA相一致。 其中D4組和D5組的n3-PUFA比例顯著高于D1組， 這 與 在 雜 交 鱘 （Acipenser baeri Brandt♀×Acipenser schrenckii Brandt♂）和尼羅羅非魚中飼喂富含亞麻籽油的飼料效果一致[13]，說明飼料中LNA的含量可以改善魚體PUFA的營養(yǎng)價(jià)值及n3-PUFA的水平[14]；D2組、D4組、D5組和D6組的肝胰臟DHA比例均顯著高于D1組， 且D5組DHA的比例上調(diào)最顯著，有研究發(fā)現(xiàn)淡水物種可以將LA、LNA轉(zhuǎn)化為LC-PUFA如DHA[15]，富含LA和LNA的飼料飼喂羅非魚也有類似作用[16]，因此鯉的肝胰臟DHA含量顯著升高可能是由飼料中較高比例的LNA轉(zhuǎn)化引起的。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明， 牡丹籽油和豆油的混合比例為1：1時(shí)能顯著改善鯉的生長性能及脂肪酸組成；紅花籽油與牡丹籽油或豆油的比例為1：1時(shí)能夠降低血清TG水平及改變肝胰臟及脂肪組織脂肪酸組成，但進(jìn)一步的研究仍需要深化。