付玉亮

（山東省臨沂市蘭陵縣動物疫病預防控制中心，山東臨沂 277700）

奶牛布魯氏菌病是由布魯氏引起的一種人畜共患病，我國將其列為二類動物疫病。奶牛發(fā)病后會發(fā)生早流產、單產降低、繁殖疾病問題，給牧場帶來巨大經濟損失。布魯氏菌病流行非常廣泛，幾乎遍及全球。布魯氏菌在1887 年首次被發(fā)現(xiàn)，20 世紀初期布魯氏菌病已在多個國家流行。早期發(fā)達國家對布魯氏菌病防控較為重視，加拿大、澳大利亞等少數(shù)國家已經宣布要消滅布魯氏菌病，雖取得一定效果，但迄今為止還無法根除，參考這些國家布魯氏菌病防控經驗，防控策略均為先開展流行病學調查，發(fā)病率低時直接檢疫淘汰、撲殺陽性牛，當發(fā)病率高時使用疫苗免疫，當陽性率降至2%～3%時開展檢疫淘汰，撲殺陽性牛，陰性留養(yǎng)。近年來，奶牛布魯氏菌病感染嚴重，感染率不斷在上升。對于布魯氏菌病的預防，目前我國主要采取以疫苗接種為主，通過檢疫來撲殺陽性牛為輔的策略[1]。因布魯氏菌病可以傳染人，嚴重影響人體健康。因此，必須高度重視布魯氏菌病防控。

1 病原及流行特點

布魯氏桿菌是呈球形、球桿形或短桿狀的革蘭氏陰性菌，長為0.5～1.5μm，寬為0.5～0.7μm。布魯氏菌在牛、羊、豬最易發(fā)，分為牛型、羊型和豬型，其中羊型布魯氏病對人的危害最大。布魯氏菌離開宿主不能進行繁殖，故布魯氏菌離開牛體不能繁殖，只能存活。

研究發(fā)現(xiàn)，布魯氏菌病可以通過牛奶傳播，約80%的布魯氏菌感染牛發(fā)生乳腺慢性感染，乳腺感染導致間歇性排毒布魯氏菌到牛奶中，可能持續(xù)數(shù)年，在產奶初期，細菌含量很高，隨后慢慢降低，這對工人和消費者食用未經巴氏消毒的乳制品帶來了感染風險。在飼喂犢牛時一定要經過巴氏殺菌。流產或正常分娩的受感染奶牛的胎盤和體液是目前主要的感染源。

布魯氏菌對熱很敏感，當溫度達到60℃以上，持續(xù)15～30min 可全部殺死該菌。對消毒劑也很敏感，在0.1%新潔爾滅中可存活30s，在2%來蘇兒中能存活1～3min。布魯氏菌喜歡在寒冷和潮濕的環(huán)境生存。布魯氏菌在陽光下和干燥土壤中存活時間很短，在潮濕的土地中可存活66d，在寒冷的土壤里可存活2～3 月，在糞便中（受溫度的影響）可存活8d 到4 個月，在水中存活時間最長，能存活3～4 月，在死亡胎兒上（避免陽光直射）可存活180d。在干草中不適合生存。因此，干草作為畜群感染來源風險比較低。pH 小于4.5 時布魯氏菌不可能存活。在青貯飼料中pH 偏低，感染的風險很低。

2 癥狀

潛伏期一般2～3 周。感染后，主要損害牛生殖系統(tǒng)，具體表現(xiàn)為子宮、腹膜、關節(jié)、睪丸、淋巴結等炎癥，妊娠母牛發(fā)生流產或產死胎，奶牛出現(xiàn)不孕癥，部分奶牛陰道流出惡臭的分泌物。人若感染布魯氏菌病，反復發(fā)熱，產生波浪熱，持續(xù)2～3 周；病人表現(xiàn)全身無力，沒有食欲，有痰，關節(jié)、肌肉疼痛，主要損害人的生殖器官，具體表現(xiàn)為男性睪丸腫大，沒有生育能力。

部分病牛流產后仍能受孕和產犢，但犢牛通常特別虛弱，在出生后短期內有死亡現(xiàn)象。流產表現(xiàn)為精神不振、采食下降、時起時臥、陰唇腫脹和乳房腫脹等癥狀，生殖道會發(fā)炎，陰門流出黏液。

3 診斷

3.1 臨床診斷

當奶牛發(fā)生流產時應首先考慮布魯氏菌病，但應與螺旋體病、牛傳染性鼻氣管炎及其他多種真菌疾病相辨別。

3.2 實驗室診斷

規(guī)定免疫地區(qū)使用布魯氏菌病疫苗免疫接種過的牛只，在接種后18 個月進行血清學檢測，撲殺陽性牛只。非免疫地區(qū)直接檢疫，撲殺陽性牛只。診斷方法及對比特點見表1。

表1 布魯氏菌診斷方法

由表1 可知，與其他方法相比，琥紅平板凝集法價格便宜、方法簡單，是社會牧場開展布魯氏菌病的檢測的首選，牧場遇到如下情況可使用此法開展布魯氏菌病檢疫：新購牛時使用琥紅法開展檢測，禁止購買陽性牛；懷孕牛發(fā)生早流產時開展檢測，及時篩出陽性牛并處理；對配次高且無法懷孕的牛進行篩查，及時處理陽性牛。琥紅平板凝集法如下。

3.2.1 血液采集

采血者單手將牛尾舉至與水平線成45°角，做好消毒后，在離尾根10cm 左右凹點處垂直進針，采血針出現(xiàn)回血后，將另一端針頭插入真空采血管中，采集4～5mL 血液后撥出采血針，并對尾根部位進行再次消毒。同時做好采血記錄。將采好的血液呈45°角室溫（20～25℃）放置過夜，血清析出，將析出的血清裝入2mL 離心管中，做好記錄。短期（1～2d）4℃保存，長期將血清放入-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.2.2 樣品檢測

使用移液槍吸取30μl 琥紅試劑加到載玻片上，每張載玻片可加兩份琥紅試劑。用移液槍分別吸取30uL 血清對應加到琥紅試劑中。使用槍頭將琥紅試劑和血清混勻，保證一份待檢血清用一個槍頭。加樣后，輕晃載玻片，室溫下4min 后觀察結果，血清有肉眼可見凝集現(xiàn)象的判為陽性，均勻無變化的判為陰性。

4 治療

布魯氏菌病治療一般采用抗生素結合維生素的方法來治療，但為了消除傳染源，建議將陽性牛全部撲殺，并進行無害化處理。布魯氏菌病主要以預防為主，以下幾種治療藥物，可供參考：口服四環(huán)素，50mg/kg，2～3 次/d?？诜撩顾仄?，0.1g/kg，2 次/d。硫酸卡那霉素，5 萬單位/kg，2 次/d。硫酸慶大霉素，8000 單位/kg，2 次/d?？诜S生素C，10～15mg/kg，2次/d。

5 預防措施

5.1 科學防疫

接種疫苗是預防布魯氏桿菌病的有效措施。但國家明確規(guī)定一類地區(qū)可以開展布魯氏菌病免疫，但需要向政府進行免疫備案，二類地區(qū)禁止免疫。國內現(xiàn)在有3 種布魯氏菌病疫苗，分別為牛種A19 疫苗、豬種S2 疫苗、羊種M5 疫苗，均為活菌疫苗，奶牛場使用A19 和S2 疫苗較多[2]，M5 疫苗使用較少，具體如表2。

表2 疫苗的比較

A19 疫苗毒力較S2 疫苗強，因此，A19 疫苗不可用于懷孕牛，S2 疫苗可給孕畜免疫。

A19 疫苗免疫期遠高于S2 疫苗，S2 疫苗需要每年免疫1次，A19 疫苗6 年免疫1 次。

A19 疫苗為皮下注射免疫，S2 疫苗為口服免疫，S2 疫苗免疫過程中對環(huán)境污染大，同時容易感染免疫人員[3]。

布魯氏菌病免疫需做好人員防護，免疫前操作人員可穿戴3M 防護服、護目鏡、1 次性乳膠手套（雙層佩戴）、膠靴、口罩（內層普通醫(yī)用口罩、外層3M 防護口罩）。

抽取疫苗時建議打開門窗、保證通風，禁止在封閉環(huán)境中抽取疫苗；建議收集使用完的注射器，使用新潔爾滅消毒液浸泡后焚燒或深埋，疫苗瓶直接焚燒處理。

疫苗免疫保護率并非100%，調運、打牛及其他應激行為仍會造成免疫牛只發(fā)病。因此，奶牛場要重視日常管理工作，減少奶牛應激。

大型牧業(yè)均使用A19 疫苗開展免疫，免疫程序為3～6 月齡皮下注射600 億單位，9～11 月齡加強免疫60 億單位。發(fā)病牧場可以在懷孕牛產后1 個月皮下注射60 億單位，但禁止直接給懷孕牛開展布魯氏菌病免疫。

5.2 加強疫病凈化

養(yǎng)殖場每年春季和秋季對所有牛進行布魯氏菌病檢測，檢測出的陽性奶牛必須及時撲殺，將其做焚燒、深埋等無害化處理，防止感染其他健康奶牛，然后對其所在的牛舍和活動場所進行徹底消毒，保證牛群全部是陰性牛。

5.3 加強消毒工作

消毒是減少環(huán)境病原菌數(shù)量，阻止病原菌傳播的有效措施，為避免布魯氏菌病交叉?zhèn)鞑?，牧場發(fā)生流產后第一時間對流產物污染區(qū)域拋灑生石灰、漂白粉、新潔爾滅、2%火堿液等消毒，流產胎兒和胎衣消毒后收集至填埋井內，同時采集流產牛只血液進行布魯氏菌病檢測，陽性牛只第一時間隔離后進行無害化處理。牧場要安排人員每天對產房、新產牛舍開展一次消毒，保證墊草干燥。

6 加強飼養(yǎng)管理

引進患病奶牛是感染該病的潛在威脅，應嚴格加強奶牛的引種管理。原則上建議各奶牛場實行自繁自養(yǎng)，盡量減少從外部引進種牛。

感染布魯氏菌病的牛只可以將自身攜帶的病原菌排入常乳或初乳中，直接飼喂犢牛會導致犢牛感染。因此，必須對初乳和常乳進行滅菌，而巴氏滅菌可以在不損失牛奶中營養(yǎng)物質、不改變風味的前提下殺滅奶中細菌（滅菌率97%～99%），可以從源頭控制布魯氏菌病，降低犢牛感染布魯氏菌病風險。因此，建議牧場對初乳和常乳進行60℃30min 的巴氏滅菌后再飼喂犢牛[3]。

7 加強人員管理

布魯氏菌病是人畜共患病，可以通過動物感染人，為確保從業(yè)者健康，必須從根本上進行引導，認識到布魯氏菌病的危害。政府和企業(yè)對從業(yè)人員進行培訓，掌握相關專業(yè)知識，并定期進行體檢。在疫苗免疫時，因活疫苗有不同程度的殘余毒力，必須做好自身防護。不允許在養(yǎng)殖場內屠宰動物，加工動物產品；禁止外來人員隨意出入養(yǎng)殖場。