許崇友 韓勇

(1.山東省日照市東港區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山東日照 276800；2.山東省日照市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山東日照 276800）

雞白痢是由雞白痢沙門氏菌引起的雞細(xì)菌性疫病，在雞群中廣泛存在[1-2]。雞白痢沙門氏菌感染可造成雛雞嚴(yán)重白痢，有的呈急性敗血癥，發(fā)病率和死亡率較高。成年雞感染后多呈慢性或隱性感染，可長期帶菌[3]。雞白痢既可水平傳播，也可垂直傳播，不僅給家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重危害和經(jīng)濟(jì)損失[4-5]，而且威脅到畜產(chǎn)品質(zhì)量安全和公共衛(wèi)生安全[6]。目前，國內(nèi)規(guī)模雞場雞白痢感染水平較高，2017—2019 年李照偉等選取31個(gè)規(guī)模化雞場抽檢1340 份雞血清樣品，采用雞白痢抗體平板凝集試驗(yàn)，結(jié)合雞場生物安全措施及凈化情況，開展了雞白痢血清學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示，雞白痢平均場群陽性率為83.87%，個(gè)體陽性率為13.43%[7]，感染情況嚴(yán)重。

日照市家禽種業(yè)豐富，既有日照麻雞優(yōu)良地方品種，又有白羽肉雞等引進(jìn)品種，雞白痢凈化難度較大。為了解日照市日照麻雞和白羽肉雞的雞白痢流行狀況，為凈化提供技術(shù)支撐。本研究對全市種雞場和規(guī)模場開展了基礎(chǔ)調(diào)查，建立了全市抽樣框。對雞場分類建立檔案，每個(gè)場建立凈化方案，推進(jìn)雞白痢凈化工作。自2017—2021 年連續(xù)開展雞白痢流行病學(xué)調(diào)查，采用流行病學(xué)采樣方式，對全市的原種雞場、祖代場、父母代和規(guī)模場進(jìn)行抽樣檢測，掌握了雞白痢的流行狀況。

1 材料與方法

1.1 抽樣框的建立

依托膠東半島和山東省高致病禽流感無疫區(qū)建設(shè)，對全市禽場進(jìn)行摸底調(diào)查，對種雞場、規(guī)模雞場和養(yǎng)雞戶建立抽樣框。

1.2 樣品及抽檢方法

根據(jù)建立的抽樣框，將全市雞場按照原種、祖代、父母代、商品代進(jìn)行建檔，原種和祖代場群全部抽樣，商品代場隨機(jī)抽樣。場群確定后群內(nèi)采用流行病學(xué)抽樣方式，由于采用實(shí)驗(yàn)室檢測，考慮檢測方法的敏感性，即檢測到陽性動(dòng)物，按照中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心設(shè)計(jì)的Epi Sampling Calculator 軟件，以估計(jì)流行率的抽樣方法進(jìn)行抽樣檢測，抽樣樣本量計(jì)算公式[8]為：

式中n 為抽樣個(gè)數(shù)，CL 為置信水平，D 為群中的陽性動(dòng)物數(shù)（等于群內(nèi)個(gè)體數(shù)與預(yù)定流行率的乘積），N 為群內(nèi)個(gè)體數(shù)，Se 為檢測方法的敏感性。

每個(gè)場點(diǎn)按照群內(nèi)陽性率10%，置信水平95%，每個(gè)場點(diǎn)隨機(jī)抽樣30 份。由于原種場陽性率較低，擴(kuò)大了抽樣數(shù)量，每個(gè)場隨機(jī)抽樣100 份。

2017—2021 年，在日照市采集20 個(gè)雞場樣品進(jìn)行檢測，其中包括原種雞場2 個(gè)、祖代/父母代場6 個(gè)、商品代場12 個(gè)，采樣情況見表1。

表1 日照市種雞場和規(guī)模場采樣情況

1.3 檢測試劑與儀器

平板凝集試驗(yàn)抗原及陽性、陰性血清購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司。生物安全柜購自新西蘭公司，超純水純化系統(tǒng)（Cascada）購自美國PALL 公司，移液器購自Eppendorf公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)室檢測方法

1.4.1 樣品采集用酒精棉球或碘酒進(jìn)行消毒后，用針頭刺破雞的肱靜脈、雞翅靜脈或冠尖，用移液器或針管取血適量進(jìn)行試驗(yàn)。

1.4.2 檢測方法

用移液器吸取抗原0.05mL，垂直滴于玻板上，然后取血0.05mL，與抗原混合均勻，并涂散至直徑2cm 的液面，2min內(nèi)判定結(jié)果。發(fā)生50%（++）以上凝集者為陽性，不發(fā)生凝集者為陰性，介于上述兩者之間者為可疑。同時(shí)設(shè)陽性、陰性血清對照，分別滴加抗原混勻，在2min 內(nèi)，陽性血清應(yīng)出現(xiàn)凝集，陰性血清應(yīng)不凝集。

2 結(jié)果與分析

2.1 監(jiān)測總體情況

2017—2021 年，連續(xù)對全市20 個(gè)種雞場開展監(jiān)測，其中日照麻雞場9 個(gè)，白羽肉雞11 個(gè)。結(jié)果顯示，經(jīng)過多年持續(xù)的凈化，雞白痢總體感染率呈明顯下降趨勢，但部分祖代和父母代雞場陽性率仍較高，仍需繼續(xù)堅(jiān)持凈化。

2.2 日照麻雞和白羽肉雞雞白痢檢測情況

2017—2021 年，對9 個(gè)日照麻雞場和11 個(gè)白羽肉雞場進(jìn)行監(jiān)測，雞白痢群體陽性率和個(gè)體陽性率呈明顯下降趨勢，凈化成效顯著。但日照麻雞的感染情況較白羽肉雞嚴(yán)重，提示應(yīng)需繼續(xù)加強(qiáng)凈化力度。

經(jīng)過多年的監(jiān)測凈化，日照麻雞原種場在2021 年未檢測出雞白痢，凈化成效明顯，但日照麻雞祖代/父母代、商品代場的陽性率仍較高，個(gè)體陽性率均超過5%，感染情況不容樂觀。白羽肉雞的雞白痢感染情況較日照麻雞輕，但商品代場的個(gè)體陽性率也接近5%，感染情況也較嚴(yán)重（見表2、表3）。

表2 2017—2021 年日照麻雞和白羽肉雞群體陽性率檢測情況

表3 2017—2021 年日照麻雞和白羽肉雞個(gè)體陽性率檢測情況

3 結(jié)論與討論

雞白痢既可水平傳播，也可垂直傳播，其中垂直傳播方式隨種群繁育會(huì)造成病原擴(kuò)散，造成危害擴(kuò)大的繼代效應(yīng)。因此，種禽場的凈化顯得尤為重要。日照市種禽場品種資源豐富，既有地方優(yōu)良品種日照麻雞，又有白羽肉雞等引進(jìn)品種，雞白痢凈化任務(wù)難度較大。為做好日照市雞白痢凈化工作，2017—2021 年課題組采用流行病學(xué)抽樣方式，考慮檢測方法的敏感性，以估計(jì)流行率的抽樣方法，抽檢20 個(gè)養(yǎng)禽場開展凈化監(jiān)測。結(jié)果表明，日照市雞白痢總體感染率呈明顯下降趨勢，表明凈化成效顯著。但部分祖代和父母代雞場陽性率仍較高，尤其是日照麻雞的祖代和父母代場陽性率較高，仍需繼續(xù)加大凈化力度。

日照麻雞是山東省地方優(yōu)良品種，抗病力強(qiáng)、耐粗飼、肉質(zhì)風(fēng)味好、產(chǎn)蛋多，屬肉蛋兼用型品種，深受廣大消費(fèi)者的歡迎。1978 年，被列為山東地方家禽良種，2009 年被山東省畜牧獸醫(yī)局列入《山東省畜禽遺傳資源保護(hù)名錄》[9]。日照市政府高度重視日照麻雞的保種和推廣工作，投入大量資金用于日照麻雞核心群的發(fā)展建設(shè)，目前日照麻雞存欄原種5000 余只，祖代雞3 萬套，年產(chǎn)父母代雞苗100 萬套，配套品種接近20 個(gè)。20 世紀(jì)八九十年代，由于外來品種的引進(jìn)和雜交改良，日照麻雞感染雞白痢的病例報(bào)道逐漸增多，凈化工作刻不容緩。本次監(jiān)測也發(fā)現(xiàn)日照麻雞的雞白痢感染率比白羽肉雞要高，尤其祖代/父母代、商品代場的個(gè)體陽性率均超過5%，在今后的凈化工作中要加強(qiáng)種源凈化，盡早解決雞白痢對日照麻雞這一優(yōu)良地方品種的威脅，達(dá)到國家凈化標(biāo)準(zhǔn)。

雞白痢不但可以垂直傳播，也可以水平傳播，因此，在做好種源凈化的基礎(chǔ)上，還應(yīng)在孵化期間減少種蛋在孵化過程中污染風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)在運(yùn)輸期間加強(qiáng)消毒滅源，在飼養(yǎng)環(huán)節(jié)中強(qiáng)化人員、物資、籠具、飲水、飼料的管理以及消毒滅源等風(fēng)險(xiǎn)環(huán)節(jié)的管控[10]。