陳玉英 郭玲

阿爾茨海默病起病隱匿，可導(dǎo)致患者出現(xiàn)記憶障礙、認(rèn)知下降、精神癥狀、行為障礙等多方面的異常，對(duì)患者的生存質(zhì)量造成極大危害[1-2]。與本病相關(guān)的研究眾多，而關(guān)于病因的研究是重點(diǎn)。近年來(lái)關(guān)于菌群失調(diào)與本病關(guān)系的研究多見(jiàn)，較多關(guān)于腸道菌群失調(diào)與阿爾茨海默病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系研究，而關(guān)于口腔微生物方面的研究不斷增多，且現(xiàn)存研究結(jié)果的差異較為突出。同時(shí)，口腔局部及腦脊液炎癥因子在本類患者中的表達(dá)結(jié)果研究也存在較大差異[3-4]，且其與口腔微生物方面的關(guān)系研究不足，因此對(duì)于口腔微生物與局部炎癥因子表達(dá)變化的研究空間較大。本研究分析了阿爾茨海默病患者口腔微生物及局部炎癥因子表達(dá)的研究意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年3 月-2021 年2 月福建省立醫(yī)院南院收治的90 例阿爾茨海默病患者為觀察組，選取同時(shí)期的90 例非神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者為對(duì)照組。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：腦脊液及其他檢查為非神經(jīng)系統(tǒng)疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并高血壓、糖尿病、慢阻肺或其他慢性基礎(chǔ)疾??；（2）1 個(gè)月內(nèi)發(fā)生創(chuàng)傷或進(jìn)行手術(shù)治療；（3）存在心肝腎肺等器官功能不全。觀察組納入標(biāo)準(zhǔn)：符合阿爾茨海默病診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并高血壓、糖尿病、慢阻肺或其他慢性基礎(chǔ)疾??；（2）合并其他神經(jīng)系統(tǒng)疾??；（3）1 個(gè)月內(nèi)發(fā)生創(chuàng)傷或進(jìn)行手術(shù)治療；（4）存在心肝腎肺等器官功能不全。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，家屬對(duì)本研究知情同意。

1.2 方法 采集兩組齦溝液及腦脊液標(biāo)本，其中齦溝液采集部位為非齲齒及修復(fù)體部位，漱口后采用濾紙條輕輕插入牙周袋，30 s 后取出，加入去離子水；腦脊液采用診斷性腰椎穿刺獲得，標(biāo)本采集量為2.0 mL，將齦溝液及腦脊液標(biāo)本采用高溫低速離心機(jī)進(jìn)行離心，齦溝液標(biāo)本（離心半徑、時(shí)間及速度分別為15 cm、15 min 及13 000 r/min），取離心后的上清液，以酶聯(lián)免疫法（ELISA 法）檢測(cè)白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）水平。另將齦溝液濾紙條沉淀物進(jìn)行微生物檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率，并以PCR 法檢測(cè)其Ct 值。比較兩組及觀察組中不同嚴(yán)重程度患者的上述指標(biāo)，采用Pearson 相關(guān)性分析觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體者的Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子的關(guān)系，采用Spearman 秩相關(guān)分析觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體者的Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子與阿爾茨海默病嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)檢驗(yàn)選用SPSS 23.0 軟件包，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用（）表示，兩組比較采用t 檢驗(yàn)，重復(fù)測(cè)量的計(jì)量資料為方差分析，關(guān)系分析為Pearson相關(guān)性分析及Spearman 秩相關(guān)分析。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對(duì)照組男41 例，女49 例；年齡56～82 歲，平均（69.0±7.1）歲。觀察組男40 例，女50 例；年齡55～83 歲，平均（69.1±7.0）歲；嚴(yán)重程度[臨床癡呆評(píng)定量表（CDR 評(píng)分）]：輕度（1 分）30 例，中度（2 分）35 例，重度（3 分）25 例。兩組一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。觀察組輕度男13 例，女17 例；年齡55～83 歲，平均（68.9±6.9）歲。中度男15 例，女20 例，年齡55～82 歲，平均（69.2±7.2）歲。重度男12 例，女13 例；年齡56～83 歲，平均（69.1±7.1）歲。輕度、中度及重度患者一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率及Ct 值比較 觀察組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體檢出率及Ct 值均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。對(duì)照組牙齦卟啉單胞菌Ct 值為（0.02±0.01），低于觀察組的（0.05±0.02），對(duì)照組齒垢密螺旋體Ct 值為（0.02±0.01），低于觀察組的（0.06±0.02），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.307、4.817，P<0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率比較[例（%）]

2.3 觀察組中不同嚴(yán)重程度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率及Ct 值比較 觀察組重度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率均高于輕度和中度患者，且中度患者均高于輕度患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。觀察組輕度患者牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體Ct 值分別為（0.03±0.01）、（0.03±0.01），中度患者為（0.05±0.02）、（0.06±0.02），重度患者為（0.06±0.02）、（0.09±0.03）。觀察組重度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的Ct 值均高于輕度和中度患者，且中度患者均高于輕度患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t牙齦卟啉單胞菌=8.998、5.404、3.616，t齒垢密螺旋體=6.972、4.160、5.065，P<0.05）。的檢出率比較[例（%）]

表2 觀察組中不同嚴(yán)重程度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體

2.4 兩組腦脊液及齦溝液炎癥因子比較 觀察組腦脊液及齦溝液的IL-1β 和IL-6 均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較[pg/mL，（）]

表3 兩組的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較[pg/mL，（）]

2.5 觀察組中不同嚴(yán)重程度患者的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較 觀察組重度患者腦脊液和齦溝液中的IL-1β 和IL-6 均高于輕度和中度患者，且中度患者均高于輕度患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表4。

表4 觀察組中不同嚴(yán)重程度患者的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較

2.6 觀察組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子的關(guān)系分析 Pearson 相關(guān)性分析顯示，觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子均呈正相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表5。[pg/mL，（）]關(guān)系分析

表5 牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體與腦脊液及齦溝液炎癥因子的

2.7 觀察組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子與阿爾茨海默病嚴(yán)重程度的關(guān)系分析 Spearman 秩相關(guān)分析顯示，觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子均與阿爾茨海默病嚴(yán)重程度均呈正相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表6。

表6 牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體、腦脊液及齦溝液炎癥因子與阿爾茨海默病嚴(yán)重程度的關(guān)系分析

3 討論

阿爾茨海默病作為神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，其對(duì)患者的認(rèn)知、行為、人格等多方面均有較大的改變，給患者、家屬及社會(huì)均造成較大的負(fù)擔(dān)，因此對(duì)本類患者進(jìn)行診治與防控的研究多見(jiàn)。與阿爾茨海默病相關(guān)的病因研究中，感染及炎癥假說(shuō)是研究較多及較熱的方面，而較多研究認(rèn)為，導(dǎo)致阿爾茨海默病相關(guān)的β-淀粉樣蛋白沉積的發(fā)生，可能與炎癥的持續(xù)存在有關(guān)，因此認(rèn)為炎癥網(wǎng)絡(luò)的存在可能與阿爾茨海默病的發(fā)生發(fā)展有一定的關(guān)系[5-7]。另外，菌群異常作為近年來(lái)在阿爾茨海默病患者中研究較多的方面，而牙齦卟啉單胞菌及齒垢密螺旋體是研究較多的菌群類型，研究普遍認(rèn)為，上述病原菌的感染導(dǎo)致機(jī)體處于炎癥反應(yīng)狀態(tài)，進(jìn)而通過(guò)炎癥反應(yīng)導(dǎo)致阿爾茨海默病的發(fā)生發(fā)展[8-10]。與阿爾茨海默病相關(guān)的炎癥因子中，IL-1β 及IL-6 是研究較多的指標(biāo)，有研究認(rèn)為其在本類患者的腦脊液中呈現(xiàn)較高表達(dá)的狀態(tài)，是導(dǎo)致局部組織損傷的重要原因[11-13]。同時(shí)牙齦卟啉單胞菌及齒垢密螺旋體的感染可能影響到機(jī)體的免疫代謝，進(jìn)而影響阿爾茨海默病的發(fā)生發(fā)展。但是現(xiàn)存的上述方面的研究仍存在一定差異，導(dǎo)致上述指標(biāo)與疾病的關(guān)系研究仍有待進(jìn)一步研究，以為疾病的診斷與防控提供確切的參考依據(jù)[14-16]。

本研究經(jīng)細(xì)致探究的結(jié)果顯示，阿爾茨海默病患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率及Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子均相對(duì)較高，而阿爾茨海默病嚴(yán)重程度的差異也導(dǎo)致上述方面檢測(cè)結(jié)果的差異顯著，Pearson 相關(guān)性分析顯示，觀察組檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子均呈正相關(guān)（P<0.05），Spearman 秩相關(guān)分析顯示，觀察組檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子均與阿爾茨海默病嚴(yán)重程度均呈正相關(guān)（P<0.05），因此對(duì)阿爾茨海默病患者進(jìn)行口腔微生態(tài)的改善及炎癥反應(yīng)的控制需求較高，同時(shí)也提示微生物失調(diào)及炎癥反應(yīng)可能與本病有密切的關(guān)系，應(yīng)重視對(duì)阿爾茨海默病高危人群上述方面的監(jiān)測(cè)與調(diào)控[17-20]。

綜上所述，阿爾茨海默病患者口腔微生物及局部炎癥因子表達(dá)顯著異常，且與阿爾茨海默病嚴(yán)重程度有密切的關(guān)系，在阿爾茨海默病的診治與防控中具有較高的檢測(cè)意義。