張椿翊，黃小蘭，黃文平，李金金，王森，張曉淵，周濃*

1(重慶三峽學(xué)院 生物與食品工程學(xué)院，重慶，404120)2(重慶市萬(wàn)州食品藥品檢驗(yàn)所，重慶，404120)3(遵義醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，貴州 遵義，563000)4(重慶三峽學(xué)院 教師教育學(xué)院，重慶，404120)

?？浦参锷orusalbaL.是常用的藥食兩用的植物，桑枝為桑的干燥嫩枝，味微苦，性平，歸肝經(jīng)[1]。桑枝是常用的中藥材，常在春末夏初采收，去葉，曬干，或趁鮮切片后曬干。桑枝始載于《本草圖經(jīng)》，其中描述桑枝為“桑枝療遍體風(fēng)癢干燥，兼療口干”；我國(guó)古代的其他本草著作中也有許多關(guān)于桑枝藥用的典籍，如在《本草再新》中則記載桑枝“壯肺氣，燥濕，滋腎水，通經(jīng)”；在《本草備要》中記述桑枝“利關(guān)節(jié)，養(yǎng)津液，行水祛風(fēng)”[2]。桑枝中含有豐富的生物活性物質(zhì)，如生物堿類、黃酮類、核苷類，多糖類、揮發(fā)油類、氨基酸類[3-5]等。

眾所周知，氨基酸是蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單元，是維持人體生命活動(dòng)的重要營(yíng)養(yǎng)成分，在人體生理病理過程中起到至關(guān)重要的作用，在人體激素以及酶類物質(zhì)的合成過程中作為原料參與[6]。目前，對(duì)于桑枝的研究主要集中在黃酮類以及生物堿類等有效成分上，對(duì)于桑枝中氨基酸的研究鮮見報(bào)道。目前，氨基酸含量的檢測(cè)方法有很多，主要有分光光度計(jì)法[7]、氨基酸自動(dòng)分析儀法[8-10]、液相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)法[11-13]、氣相色譜法[14]以及高效液相色譜法[15]，分光光度計(jì)法雖然操作簡(jiǎn)單方便，但是檢測(cè)的氨基酸種類單一，只能檢測(cè)單個(gè)類別的氨基酸，無(wú)法對(duì)氨基酸進(jìn)行分離，具有一定的局限性[7]。氨基酸自動(dòng)分析儀對(duì)氨基酸的測(cè)定具有專一性，但是分析時(shí)間長(zhǎng)，價(jià)格昂貴，普及度不高。高效液相色譜法在幾種測(cè)定方法中因具有高效、測(cè)定時(shí)間短、操作簡(jiǎn)單易上手、檢測(cè)成本較低等特點(diǎn)，在實(shí)驗(yàn)室氨基酸檢測(cè)中應(yīng)用較為普遍。由于氨基酸本身沒有發(fā)色基團(tuán)，沒有紫外吸收和熒光反應(yīng)，需要對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行衍生化處理將其轉(zhuǎn)化為具有紫外吸收和發(fā)射熒光的物質(zhì)才能被儀器所檢測(cè)到[16]。衍生化又分為柱前衍生和柱后衍生兩種，柱前衍生是將樣品在上機(jī)測(cè)定前進(jìn)行衍生化，將氨基酸衍生化成適合超高效液相色譜所能檢測(cè)的物質(zhì)。柱后衍生是樣品經(jīng)過離子交換柱后分離，將分離后的氨基酸經(jīng)過衍生化處理以便被儀器檢測(cè)。目前柱前衍生以其方便快捷的優(yōu)勢(shì)被普遍使用，常用的衍生試劑有鄰苯二甲醛、丹黃酰氯和異硫氰酸苯酯等[16-17]。

本研究以采自重慶不同區(qū)縣的9個(gè)采樣點(diǎn)、3個(gè)品種共計(jì)18批次的桑枝作為樣本，參照黃小蘭等[16]的實(shí)驗(yàn)方法，即異硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)柱前衍生，超高效液相色譜(ultra-high performance liquid chromatography，UPLC)法對(duì)這18批桑枝中17種氨基酸進(jìn)行測(cè)定，并利用WPS、SPSS 26.0等軟件進(jìn)行氨基酸含量計(jì)算和主成分分析，以此比較出9個(gè)采樣點(diǎn)、3個(gè)品種共計(jì)18批桑枝中氨基酸含量的差異，為桑枝的后期研究及利用提供理論數(shù)據(jù)依據(jù)及參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

桑枝分別采自重慶市不同區(qū)縣的9個(gè)采樣點(diǎn)、3個(gè)品種共計(jì)18批次，具體信息見表1。經(jīng)重慶三峽學(xué)院生物與食品工程學(xué)院周濃教授鑒定為桑科植物。將采摘的新鮮桑枝洗凈后切段，置于恒溫鼓風(fēng)干燥箱中45 ℃烘干至恒重，粉碎后過三號(hào)篩，備用。

表1 桑枝采樣地點(diǎn)及品種信息Table 1 Mulberry branch sampling location and variety information

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

鹽酸、苯酚、冰醋酸(均為分析純)，成都科龍化工試劑廠；三乙胺(優(yōu)級(jí)純)，成都科龍化工試劑廠；乙酸鈉(分析純)，天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司；正己烷(色譜純)，天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司；PITC(純度≥99%，蛋白測(cè)序級(jí))，上海麥克林生化科技有限公司；乙腈(色譜純)，德國(guó)麥克公司；實(shí)驗(yàn)用水，去離子超純水。

氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品為17種氨基酸混標(biāo)，購(gòu)于壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司，具體信息如下：天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、絲氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、組氨酸(His)、精氨酸(Arg)、蘇氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、纈氨酸(Val)、甲硫氨酸(Met)、半胱氨酸(Cys)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、賴氨酸(Lys) (批號(hào)：BWT30 103-1-C-1，濃度：1.000 mmol/L)。

1.3 儀器與設(shè)備

BPG-9240A精密鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；3-30KS高速離心機(jī)，德國(guó)Sigma；MS 3 BS025渦旋混合器，德國(guó)IKA；Biotage Turbovap LV氮吹儀，瑞典Biotage；ME204T/02萬(wàn)分之一電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；Waters UPLC ACQUITY CLASS UPLC超高效液相色譜儀，美國(guó)waters；Milli-Q Advantage A10超純水機(jī)，美國(guó)Millipore。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 桑枝樣品溶液的配制

1.4.1.1 桑枝樣品的水解

本研究參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.124—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中氨基酸的測(cè)定方法》中的測(cè)定方法，準(zhǔn)確稱取制備好的桑枝樣品粉末0.5 g(精確至0.000 1 g)于水解管中，加入6 mol/L鹽酸溶液10 mL，向水解管中加入苯酚4滴并立即密封。將水解管放入110 ℃的電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱內(nèi)水解22 h后，取出，冷卻至室溫。打開水解管后，用純水少量多次的沖洗殘?jiān)⑥D(zhuǎn)移至20 mL容量瓶中,加純水定容，搖勻，離心后取上層桑枝水解液0.4 mL于氮吹管中，并于50 ℃水浴條件下氮吹至近干，加0.4 mL純水復(fù)溶，備用。

1.4.1.2 氨基酸的衍生化處理

將1.4.1.1節(jié)復(fù)溶后的水解液全部轉(zhuǎn)移至10 mL 離心管中，分別加入0.1 mol/L PITC-乙腈溶液和1.0 mol/L 三乙胺-乙腈溶液各0.2 mL，搖勻，于室溫條件下靜置1 h后，加入正己烷1 mL，渦旋振蕩60 s，6 000 r/min冷凍離心5 min，萃取反應(yīng)過剩的PITC，棄去上層正己烷，將下層溶液轉(zhuǎn)移至2 mL容量瓶中，用純水定容至刻度，經(jīng)0.22 μm微孔水相濾膜過濾，待上機(jī)測(cè)定。

1.4.1.3 空白溶液的制備

取鹽酸溶液(0.1 mol/L)0.4 mL置于10 mL離心管中，自“分別加入0.1 mol/L PITC-乙腈溶液和1.0 mol/L三乙胺-乙腈溶液各0.2 mL”起按照“1.4.1.2”進(jìn)行衍生化處理，即得空白溶液。

1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

取17種混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液適量于10 mL離心管中，補(bǔ)充0.1 mol/L的鹽酸至0.4 mL,與樣品同法進(jìn)行衍生化處理。

1.4.3 儀器方法

色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C 18色譜柱(2.1 mm×150 mm，1.7 μm)；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：1 μL；流速：0.2 mL/min；流動(dòng)相：A為0.05 mol/L乙酸鈉-乙腈(體積比為97∶3)溶液(冰醋酸調(diào)pH 6.5)，B為80%的乙腈溶液，梯度洗脫，流動(dòng)相梯度洗脫比例詳見表2。

表2 梯度洗脫程序表Table 2 Gradient elution program table

1.5 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 系統(tǒng)適用性

取衍生化后的標(biāo)準(zhǔn)品工作液和樣品液，按照“1.4.3”中的儀器方法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，衍生化后的17種混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的色譜峰峰形尖銳，分離度良好，如圖1所示?？捎糜谏Ｖ悠分邪被岷康臏y(cè)定。

1-天冬氨酸(Asp)；2-谷氨酸(Glu)；3-絲氨酸(Ser)；4-甘氨酸(Gly)；5-組氨酸(His)；6-精氨酸(Arg)；7-蘇氨酸(Thr)；8-丙氨酸(Ala)；9-脯氨酸(Pro)；10-酪氨酸(Tyr)；11-纈氨酸(Val)；12-甲硫氨酸(Mct)；13-半胱氨酸(Cys)；14-異亮氨酸(Ile)；15-亮氨酸(Leu)；16-苯丙氨酸(Phe)；17-賴氨酸(Lys)a-氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品UPLC圖譜；b-華桑(S1)UPLC圖譜圖1 氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品和華桑(S1)UPLC圖譜Fig.1 UPLC Chromatograms of amino acid standard and Warmulberry (S1)

2.2 氨基酸線性關(guān)系

取“1.4.2”中衍生化處理后的標(biāo)準(zhǔn)品系列工作液，過0.22 μm水相濾膜后按照“1.4.3”中的儀器方法進(jìn)行含量的測(cè)定。以各個(gè)氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品工作液的質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程，17種氨基酸的相關(guān)系數(shù)為0.997 9～0.999 9，結(jié)果表明，17種氨基酸在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，結(jié)果詳見表3。

表3 17種氨基酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、儀器精密度和方法重復(fù)性Table 3 Calibration curves,linear ranges,correlation coefficients,instrument precision and method repeatability for amino acids detected by UPLC

2.3 精密度實(shí)驗(yàn)

取同一濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品衍生液，按照“1.4.3”的儀器方法平行測(cè)定6次，記錄17種氨基酸的峰面積，結(jié)果顯示17種氨基酸峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD在0.06%～1.49%，均<2.00 %，表明儀器精密度良好，可用于本實(shí)驗(yàn)分析。

2.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

平行稱取6份同一桑枝樣品粉末(S2)0.5 g，按照“1.4.1”進(jìn)行樣品測(cè)試液的制備，制成6份樣品測(cè)試液，按照“1.4.3”的儀器方法進(jìn)行測(cè)定，記錄17種氨基酸的峰面積，結(jié)果顯示17種氨基酸峰面積對(duì)應(yīng)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.63%～2.75%，表明該方法的重復(fù)性較好，可用于桑枝樣品中氨基酸的含量測(cè)定。

2.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取同一濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品衍生液，按照“1.4.3”的儀器方法每隔3 h測(cè)定1次，結(jié)果表明,17種氨基酸在24 h內(nèi)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.82 %～4.74 %，氨基酸衍生物在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好，超過24 h后，個(gè)別氨基酸相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差超過5.00 %，其中半胱氨酸降解較快,由此表明氨基酸的衍生物會(huì)隨著時(shí)間的推移而發(fā)生降解，導(dǎo)致濃度下降。所以為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，建議桑枝樣品在完成衍生化后的24 h內(nèi)測(cè)定完畢。

2.6 桑枝中的17種氨基酸的含量測(cè)定

將18批桑枝樣品按照“1.4.1”樣品溶液的配制，每批樣品平行3份，按照“1.4.3”中的儀器條件進(jìn)行氨基酸含量測(cè)定，結(jié)果見表4。

表4 不同品種桑枝中的氨基酸含量(n=3) 單位：mg/gTable 4 Amino acid content in mulberry branches of different varieties(n=3)

2.6.1 桑枝樣品中氨基酸含量分析

對(duì)9個(gè)采樣點(diǎn)、3個(gè)品種的18批桑枝進(jìn)行氨基酸含量的檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，在這18批桑枝樣品中均檢測(cè)出17種氨基酸，檢測(cè)結(jié)果詳見表4，由表得知，桑枝樣品中氨基酸總量(total amino acid,TAA)為41.09～111.70 mg/g，平均含量為64.48 mg/g，18批桑枝樣品在氨基酸總量上存在顯著差異，其中氨基酸總量最多的為巴南區(qū)波瀾鎮(zhèn)的雞桑，為111.70 mg/g，其次為萬(wàn)州區(qū)分水鎮(zhèn)的桑，為88.96 mg/g，南岸區(qū)黃桷埡鎮(zhèn)的雞桑和奉節(jié)柏樹村的雞桑在氨基酸總量上結(jié)果相似，分別為74.67 mg/g和74.39 mg/g，氨基酸總量最低的為萬(wàn)州分水鎮(zhèn)的雞桑，只有41.09 mg/g。桑枝中測(cè)得的17種氨基酸中含量最高的為脯氨酸，為5.04～22.38 mg/g，平均含量為10.49 mg/g，占氨基酸總量的16.27%。其次為谷氨酸，含量為4.35～9.68 mg/g，平均含量為6.37 mg/g，占總氨基酸含量的9.88%；17種氨基酸中含量較低的氨基酸為半胱氨酸，含量為0.43～0.47 mg/g，平均含量為0.45 mg/g，僅占總氨基酸含量的0.70%。

桑枝中檢測(cè)出7種人體必需氨基酸(essential amino-acid,EAA)，必需氨基酸的總含量在16.88～35.45 mg/g，平均含量為23.53 mg/g。必需氨基酸含量由高到低為亮氨酸>纈氨酸>賴氨酸>異亮氨酸>苯丙氨酸>蘇氨酸>甲硫氨酸，其中最高的亮氨酸平均含量為5.94 mg/g，占必需氨基酸總量高達(dá)25.24%，占氨基酸總量9.21%，在17種氨基酸中排第四。最低的甲硫氨酸含量為0.39 mg/g。占必需氨基酸總量的1.66 %，僅占氨基酸總量的0.60%。18批桑枝按必需氨基酸總量由高到低排序?yàn)镾4、S7、S8、S10、S14、S17、S3、S9、S11、S18、S2、S5、S1、S13、S12、S15、S16、S6。18批桑枝樣品中必需氨基酸總量占氨基酸總量(EAA/TAA)的31.74%～41.07%，平均值為36.92%。必需氨基酸總量與非必需氨基酸總量(EAA/NEAA)的百分比為46.50%～69.69%，平均值為58.70 %。與聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)中氨基酸理想模式的規(guī)定必需氨基酸與氨基酸總量比值為 40%和必需氨基酸與非必需氨基酸比值為60%[18]相差不大，結(jié)果表明桑枝中的氨基酸營(yíng)養(yǎng)成分分布比較均勻。

18批桑枝中桑有4批，總氨基酸平均含量為63.15 mg/g，其中萬(wàn)州區(qū)分水鎮(zhèn)的最高，為88.96 mg/g，奉節(jié)柏樹村的最低，為48.70 mg/g；華桑有5批，總氨基酸平均含量為59.52 mg/g，其中云陽(yáng)縣雙河鎮(zhèn)的最高，為67.27 mg/g，奉節(jié)柏樹村的最低，為50.37 mg/g；雞桑有9批，總氨基酸平均含量為67.84 mg/g，其中巴南區(qū)波瀾鎮(zhèn)的最高，為111.70 mg/g，萬(wàn)州分水鎮(zhèn)的最低，為41.09 mg/g。如表5所示，在這18批桑枝中，桑、雞桑、華桑在17種氨基酸中，精氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸這三種氨基酸之間含量存在較大差異，其余氨基酸差異不明顯。結(jié)果顯示三種品種桑枝雖然在總氨基酸含量上差別不大，均在60 mg/g左右，但是同一品種間根據(jù)采摘的地方不同而有較大的差異，這可能與采摘地的氣候，土壤等有較大關(guān)系。

表5 不同品種桑枝氨基酸含量 單位：mg/gTable 5 Amino acid content of mulberry branches of different varieties

桑枝中藥用氨基酸種類豐富，有天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、精氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和賴氨酸，總共9種。藥用氨基酸總量在22.98～59.99 mg/g，平均含量為35.58 mg/g，占氨基酸總量的52.09%～61.94%，平均占比為55.21%，桑枝的藥用氨基酸平均值與地參[16]一致。其中谷氨酸和精氨酸是桑枝中的主要藥用氨基酸，分別占藥用氨基酸總量的17.90%和16.81%。其中谷氨酸在人體內(nèi)可與血氨作用解除人體內(nèi)的氨毒，能起到保護(hù)肝臟的作用[19]。與此同時(shí)，谷氨酸在中樞神經(jīng)中可以作為興奮性的神經(jīng)遞質(zhì)來(lái)介導(dǎo)神經(jīng)信號(hào)的傳導(dǎo)，能改善記憶和學(xué)習(xí)功能[20]。精氨酸能增加胰島素的分泌，促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，使人體的免疫調(diào)節(jié)功能間接發(fā)揮作用，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能[21]。所以，桑枝可作為藥用氨基酸的補(bǔ)充劑，也可作為藥用氨基酸提取的原料，增加了氨基酸提取原料的選擇性。

2.6.2 主成分分析

采用SPSS 26.0 軟件對(duì)18批桑枝中氨基酸組分進(jìn)行主成分分析，特征值>1作為提取主成分的標(biāo)準(zhǔn)，從17種氨基酸組分中提取了3個(gè)主成分，特征值分別為13.496、1.211、1.097，方差貢獻(xiàn)率為79.388%、7.124%、6.452%,累計(jì)貢獻(xiàn)率為79.388%、86.512%、92.964%。結(jié)果詳見表6。

表6 主成分分析Table 6 Principal component analysis

將17種氨基酸的含量值標(biāo)準(zhǔn)化后所得到各個(gè)主成分的特征值進(jìn)行開根號(hào)，將開根號(hào)所得到的值與表7中的系數(shù)向量值相乘，根據(jù)每個(gè)主成分對(duì)應(yīng)的特征值占所提取主成分總特征值之和的比例作為權(quán)重得到主成分綜合得分表達(dá)式為F=0.795F1+0.071F2+0.067F3,結(jié)合方程進(jìn)行主成分綜合得分計(jì)算，結(jié)果如表8所示。

表7 主成分系數(shù)向量值Table 7 Vectors of principal components

表8 樣品主成分得分和綜合得分Table 8 Principal component scores and comprehensive scores

如表8所示，在第一主成分中，S4的得分最高；在第二主成分中，S13得分最高；在第三主成分中，S5得分最高。綜合得分排序?yàn)镾4>S7>S8>S14>S10>S17>S9>S11>S3>S2>S18>S5>S13>S1>S12>S15>S16>S6,其中最高的是巴南區(qū)波瀾鎮(zhèn)，綜合得分有8.57，最低的為萬(wàn)州分水鎮(zhèn)，綜合得分為-4.58。表7中的F值表明，這18批桑枝中的氨基酸含量差異明顯。

采用主成分分析法可用于區(qū)分不同品種桑枝氨基酸組分含量差異,可為桑枝中氨基酸評(píng)價(jià)及其開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

3 結(jié)論與討論

氨基酸作為蛋白質(zhì)的基本組成單元，在人體中起著十分重要的作用，參與了多個(gè)代謝過程以及酶類物質(zhì)的合成[6]。本試驗(yàn)采用超高效液相色譜儀法對(duì)采自重慶不同區(qū)縣的3個(gè)品種、18批次桑枝的17種氨基酸含量進(jìn)行測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果顯示，18批桑枝樣品中均檢出17種氨基酸，總氨基酸平均含量為64.48 mg/g，表明桑枝中氨基酸含量較高。試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，桑枝中藥用氨基酸種類豐富，共含有9種藥用氨基酸，平均總含量在35.58 mg/g，占氨基酸總量的52.09%～61.94%，平均占比55.21%，可用于制作氨基酸類藥物。18批桑枝樣品中必需氨基酸含量占氨基酸總含量的31.74%～41.07%，平均值為36.92%。必需氨基酸總量與非必需氨基酸總量的比值為46.50%～69.69%，平均值為58.70%，與聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)中氨基酸理想模式的規(guī)定必需氨基酸占氨基酸總量百分比40%和必需氨基酸與非必需氨基酸百分比60%[19]相差不大，表明桑枝中氨基酸成分分布比較均勻。對(duì)3個(gè)不同品種桑枝進(jìn)行分析，結(jié)果顯示3種品種桑枝雖然在總氨基酸含量上差別不大，均在60 mg/g左右，但同一品種間根據(jù)采樣的地域不同而有較大的差異。在這18批桑枝中，桑、雞桑、華桑3個(gè)品種中，精氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸3種氨基酸含量存在較大差異，其余氨基酸差異不明顯。桑樹在三峽庫(kù)區(qū)種植面積廣泛，原料獲取成本低。根據(jù)藥用氨基酸的不同用量需求，提取氨基酸可選擇不同品種的桑枝原料。