張海雷， 安 敏， 楊開倫*， 劉志強(qiáng)， 汪建國(guó)， 張亞倩， 馬 艷

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052；2.新疆上品美羊科技有限公司，新疆昌吉 831100）

羔羊是養(yǎng)羊業(yè)的基礎(chǔ)，羔羊培育是肉羊生產(chǎn)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其培育的優(yōu)劣直接影響到成年后的生產(chǎn)性能。因此，如何保證哺乳期羔羊健康、快速生長(zhǎng)一直是肉羊養(yǎng)殖業(yè)亟待解決的問(wèn)題。D-絲氨酸可以通過(guò)提高N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受體的活性來(lái)促進(jìn)生長(zhǎng)激素的釋放（李奎等，2004）。谷氨酰胺可以為腸道細(xì)胞供能并促進(jìn)腸道黏膜細(xì)胞成熟分裂 （肖英平等，2012）。瓜氨酸可以在動(dòng)物體內(nèi)合成精氨酸和一氧化氮，抑制下丘腦生長(zhǎng)激素抑制激素的釋放并促進(jìn)生長(zhǎng)激素的釋放（孫召君，2012）。胍基乙酸可以在動(dòng)物體內(nèi)合成肌酸及磷酸肌酸參與機(jī)體供能（江濤等，2012）?；谏鲜?種氨基酸生物學(xué)功能的研究及在其他幼齡動(dòng)物上飼喂的結(jié)果，本試驗(yàn)給哺乳期羔羊補(bǔ)喂這4種氨基酸，探究其對(duì)羔羊生長(zhǎng)、代謝和免疫機(jī)能的影響，為這4種氨基酸在哺乳期羔羊飼養(yǎng)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)于2021年6月～11月在新疆昌吉高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)園新疆上品美羊科技有限公司進(jìn)行。試驗(yàn)選取健康且體重接近的湖羊公羔50只，平均體重為（4.02±0.49）kg，隨機(jī)分為5組，每組10只。對(duì)照組羔羊不補(bǔ)喂，試驗(yàn)組羔羊從4日齡開始，分別補(bǔ)喂2 g/kg D-絲氨酸、2 g/kg谷氨酰胺、2 g/kg瓜氨酸、0.5 g/kg胍基乙酸，試驗(yàn)進(jìn)行28 d。

1.2 飼養(yǎng)管理及日糧組成 所有羔羊隨母羊飼養(yǎng)于同一高床圈舍中，羔羊出生后1～3 d正常隨母吮乳，第3天用奶瓶裝生理鹽水對(duì)羔羊進(jìn)行誘導(dǎo)采食，第4天時(shí)試驗(yàn)正式開始。飼喂前稱取氨基酸置于奶瓶中，將50 mL生理鹽水煮沸后冷卻至50℃后，加入奶瓶中與氨基酸充分混勻。飼喂前用手固定好羊頭，補(bǔ)喂時(shí)將奶嘴從羔羊嘴角插入至舌根位置，緩慢擠壓奶瓶，每擠4下后便取出奶瓶，防止造成羔羊窒息，重復(fù)上述過(guò)程直至補(bǔ)喂完成。每天飼喂2次，補(bǔ)喂時(shí)間為每日8:00和19:00，羔羊15日齡時(shí)補(bǔ)飼開食料，開食料的營(yíng)養(yǎng)水平 （干物質(zhì)基礎(chǔ)）：粗蛋白質(zhì)20.21%、粗脂肪2.19%、中性洗滌纖維12.44%、酸性洗滌纖維5.55%、鈣1.41%、磷0.41%。羔羊自由采食、飲水。

1.3 樣品采集與處理 羔羊18、32日齡時(shí)，每組挑選健康且體重接近的7只羔羊，于早上8:00準(zhǔn)時(shí)補(bǔ)喂氨基酸，補(bǔ)喂2 h后頸靜脈采血5 mL。用含有肝素鈉的5 mL抗凝管收集后，用低速離心機(jī)3000 r/min離心15 min后收集血漿，平均分裝于2只1.5 mL的凍存管中，-20℃冷凍保存，用以測(cè)定血漿生化指標(biāo)。

羔羊25日齡時(shí)，每組挑選健康且體重接近的6只羔羊，于前一天晚上20:00與母羊隔離，期間斷水?dāng)嗍?，早?:00準(zhǔn)時(shí)補(bǔ)喂氨基酸，補(bǔ)喂1 h后頸靜脈采血5 mL。用含有肝素鈉的5 mL抗凝管收集后，用低速離心機(jī)3000 r/min離心15 min后收集血漿，平均分裝于2只1.5 mL的凍存管中，-20℃冷凍保存，用以測(cè)定血漿氨基酸含量。

1.4 試驗(yàn)指標(biāo)的測(cè)定

1.4.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定 記錄羔羊4日齡的體重記為初始體重，試驗(yàn)每7 d進(jìn)行一次稱重，計(jì)算平均日增重，每次稱重于早上飼喂前進(jìn)行。

平均日增重/（g/d）＝（末重-初重）/試驗(yàn)天數(shù)。

1.4.2 血漿中氨基酸含量的測(cè)定 血漿中氨基酸含量均送由北京普瑞華盛公司采用液質(zhì)聯(lián)用法進(jìn)行測(cè)定。

1.4.3 血液生化指標(biāo)的測(cè)定 血漿生化指標(biāo)均送由北京華英生物技術(shù)研究所進(jìn)行檢測(cè)?？偟鞍?、白蛋白、葡萄糖、氨、尿素采用比色法測(cè)定，生長(zhǎng)激素、胰島素采用反射免疫分析法測(cè)定，IgA、IgG采用雙抗夾心法測(cè)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件的單因素方差分析，用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以P＜0.05為差異顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)羔羊生長(zhǎng)的影響 由表1可知，D-絲氨酸組18、25、32日齡的體重與平均日增重較對(duì)照組分別提高了22.31%、19.06%、19.61%和35.30%（P＜0.05）；谷氨酰胺組11、18、25、32日齡的體重與平均日增重較對(duì)照組分別提高了20.28%、20.20%、14.09%、16.82%和23.53%（P＜0.05）；瓜氨酸組11和32日齡的體重較對(duì)照組分別提高了12.33%和12.30%（P＜0.05）。

表1 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)羔羊生長(zhǎng)的影響（n=10） kg

2.2 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)羔羊血漿氨基酸含量的影響 由表2可知，D-絲氨酸組絲氨酸、半胱氨酸和賴氨酸的含量較對(duì)照組分別提高了730.48%、51.60%和32.98%，蘇氨酸的含量降低了26.09%（P＜0.05）；谷氨酰胺組甘氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸的含量較對(duì)照組分別提高了81.96%、238.57%和229.48%，脯氨酸和蘇氨酸的含量分別降低了30.24%和36.02%（P＜0.05）；瓜氨酸組甘氨酸和谷氨酸的含量較對(duì)照組分別提高了73.31%和61.73%，脯氨酸、蘇氨酸和半胱氨酸的含量分別降低了34.06%、36.87%和94.90%（P＜0.05）；胍基乙酸組半胱氨酸的含量較對(duì)照組提高了118.47%，蘇氨酸和賴氨酸的含量分別降低了21.80%和28.20%（P＜0.05）。

表2 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)羔羊血漿氨基酸含量的影響（n=6） μmol/L

2.3 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)羔羊血漿GH和IGF-I的影響 由表3可知，羔羊18日齡時(shí)，D-絲氨酸組生長(zhǎng)激素和IGF-I的含量較對(duì)照組分別提高了21.39%和34.07%（P＜0.05）；谷氨酰胺組生長(zhǎng)激素的含量較對(duì)照組降低了13.14%（P＜0.05）；胍基乙酸組生長(zhǎng)激素和IGF-I的含量較對(duì)照組分別提高了39.43%和39.96%（P＜0.05）。

表3 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)羔羊血漿GH和IGF-1的影響（n=7） ng/mL

羔羊32日齡時(shí)，D-絲氨酸組生長(zhǎng)激素和IGF-I的含量較對(duì)照組分別降低了32.73%和23.34%（P＜0.05）；谷氨酰胺組生長(zhǎng)激素和IGF-I的含量較對(duì)照組分別降低了43.84%和38.82%（P＜0.05）；瓜氨酸組生長(zhǎng)激素和IGF-I的含量較對(duì)照組分別降低了40.61%和36.68%（P＜0.05）。

2.4 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)湖羊羔羊血漿生化指標(biāo)的影響 由表4可知，羔羊18日齡時(shí)，D-絲氨酸組總蛋白、白蛋白、尿素的含量較對(duì)照組分別提高了29.55%、34.72%%、34.83%（P＜0.05）； 谷氨酰胺組尿素的含量較對(duì)照組提高了28.67%（P＜0.05）；瓜氨酸組總蛋白、白蛋白、球蛋白和尿素的含量較對(duì)照組分別提高了38.38%、33.06%、42.26%和39.57%（P＜0.05）；胍基乙酸組總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素的含量較對(duì)照組分別提高了46.39%、34.05%、55.40%、26.07%（P＜0.05），氨的含量下降了9.2%（P＜0.05）。

表4 補(bǔ)喂4種氨基酸對(duì)羔羊血液生化指標(biāo)的影響（n=7）

羔羊32日齡時(shí)，D-絲氨酸組總蛋白、白蛋白、球蛋白和氨的含量較對(duì)照組分別降低了40.90%、45.22%、42.60%、7.58%（P＜0.05）； 谷氨酰胺組白蛋白和氨的含量較對(duì)照組分別降低了12.52%和8.89%（P＜0.05）；胍基乙酸組總蛋白、白蛋白、球蛋白和氨的含量較對(duì)照組分別下降了34.65%、46.25%、39.27%和6.35%（P＜0.05）。

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，補(bǔ)喂D-絲氨酸顯著提高了羔羊的生長(zhǎng)性能。這表明D-絲氨酸對(duì)哺乳期羔羊具有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。D-絲氨酸是一種功能性氨基酸，動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的D-絲氨酸主要由絲氨酸酶將L-絲氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái)。本試驗(yàn)中補(bǔ)喂D-絲氨酸提高了羔羊血漿中絲氨酸、半胱氨酸和賴氨酸的含量，降低了蘇氨酸含量。D-絲氨酸促進(jìn)羔羊生長(zhǎng)可能與其提高N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受體的活性有關(guān) （Kartvelishvily等，2006），NMDA可以顯著提高生長(zhǎng)激素（GH）的分泌，提高血漿中GH的水平（Estienne等，1996）。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂D-絲氨酸顯著提高了18日齡羔羊血漿中GH和IGF-I的含量，這表明D-絲氨酸可以促進(jìn)GH和IGF-I的釋放。而32日齡時(shí)GH和IGF-I含量的下降原因還有待進(jìn)一步探究。D-絲氨酸一直被認(rèn)為僅在動(dòng)物的中樞神經(jīng)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，對(duì)蛋白質(zhì)合成代謝影響的報(bào)道較少。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂D-絲氨酸顯著提高了羔羊18日齡時(shí)血漿中總蛋白、白蛋白和尿素的含量，這表明短期補(bǔ)喂高劑量D-絲氨酸可以促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)的合成代謝，而32日齡時(shí)總蛋白、白蛋白、球蛋白和氨的含量顯著下降。D-絲氨酸促進(jìn)羔羊生長(zhǎng)代謝的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步的探究。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，補(bǔ)喂谷氨酰胺顯著提高了羔羊的生長(zhǎng)性能，與蔣宗勇等（2010）研究結(jié)果在斷奶仔豬代乳料中添加谷氨酰胺對(duì)仔豬生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用一致，這表明谷氨酰胺對(duì)羔羊的生長(zhǎng)具有一定的促生長(zhǎng)作用。谷氨酰胺是哺乳動(dòng)物細(xì)胞快速分裂的必需氨基酸和主要能量底物，以及合成谷胱甘肽、嘧啶和嘌呤的前體，在腸道健康中起關(guān)鍵作用。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂谷氨酰胺提高了哺乳羔羊血漿中甘氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸的含量，降低了脯氨酸和蘇氨酸的含量。這與趙廣民等（2020）的研究結(jié)果相似。其原因可能是母乳中氨基酸的含量下降，羔羊尚不能從從飼糧中獲取所需的氨基酸，導(dǎo)致血漿中氨基酸含量下降。血尿素可以較準(zhǔn)確地反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況，氨基酸平衡時(shí)血清尿素氮濃度下降。本試驗(yàn)中補(bǔ)喂谷氨酰胺提高了羔羊18日齡時(shí)血漿中尿素的含量，這與李寧寧等（2012）的研究結(jié)果相似。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，補(bǔ)喂瓜氨酸顯著提高了羔羊的生長(zhǎng)性能，與孫召君等（2012）研究結(jié)果補(bǔ)喂瓜氨酸可以提高哺乳仔豬的生長(zhǎng)性能相似，這表明瓜氨酸對(duì)哺乳期羔羊具有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。瓜氨酸是一種非必需氨基酸。動(dòng)物體內(nèi)的瓜氨酸主要來(lái)自鳥氨酸循環(huán)過(guò)程，主要參與機(jī)體的氮平衡和新陳代謝的調(diào)控。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂瓜氨酸提高了羔羊血漿中甘氨酸和谷氨酸的水平，降低了脯氨酸、蘇氨酸和半胱氨酸的水平。分析原因，可能也是由于羔羊無(wú)法獲得足夠的氨基酸，從而導(dǎo)致血漿中氨基酸含量下降。瓜氨酸被機(jī)體吸收后可以在腎臟等組織中轉(zhuǎn)化為精氨酸和一氧化氮（NO），NO可以通過(guò)調(diào)節(jié)下丘腦和垂體細(xì)胞的活性來(lái)促進(jìn)生長(zhǎng)激素的分泌。精氨酸則可以通過(guò)抑制下丘腦生長(zhǎng)激素抑素（SS）的釋放來(lái)促進(jìn)生長(zhǎng)激素的釋放，除此之外，瓜氨酸也可在大腦中通過(guò)鳥氨酸循環(huán)合成谷氨酸來(lái)促進(jìn)生長(zhǎng)激素釋放 （Sureda等，2010；Varga等，2004）。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂瓜氨酸降低了32日齡羔羊血漿中GH和IGF-I的含量，其原因尚待進(jìn)一步探究。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂瓜氨酸使羔羊18日齡時(shí)血漿中總蛋白、白蛋白、球蛋白和尿素的含量顯著升高，趙國(guó)棟等（2020）研究表明，在小鼠飲水中補(bǔ)充瓜氨酸使血清中總蛋白和白蛋白水平呈升高趨勢(shì)。表明瓜氨酸可能對(duì)機(jī)體的蛋白質(zhì)合成有一定的促進(jìn)作用，瓜氨酸對(duì)哺乳期羔羊生長(zhǎng)代謝的作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，補(bǔ)喂胍基乙酸促進(jìn)了哺乳期羔羊的生長(zhǎng)，與李潔蕾等（2017）研究結(jié)果哺乳仔豬日糧中添加胍基乙酸可以提高仔豬的生長(zhǎng)性能相似，表明胍基乙酸對(duì)哺乳期羔羊有一定的促生長(zhǎng)作用。血漿中游離氨基酸的含量在一定程度上可以反映動(dòng)物體內(nèi)氨基酸代謝的狀況。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂胍基乙酸顯著提高了羔羊血漿中半胱氨酸的含量，降低了蘇氨酸和賴氨酸的含量。母乳是哺乳期羔羊氨基酸的主要來(lái)源，隨著羔羊的生長(zhǎng)，母乳中蛋白質(zhì)含量逐漸下降導(dǎo)致提供的實(shí)收氨基酸的含量逐漸下降，而此時(shí)的羔羊?qū)︼暳现邪被岬南漳芰ι胁煌晟?，從而?dǎo)致血漿中氨基酸含量的下降。GH、IGF-I均對(duì)幼齡動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。Ibrahim等（2019）研究顯示，GAA可以增強(qiáng)肝臟IGF-I和GH基因的表達(dá)。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂胍基乙酸提高了羔羊18日齡時(shí)血漿中GH和IGF-I的含量。這與Lu等（2020）的研究結(jié)果相似，這表明胍基乙酸可以提高血漿中GH和IGF-I的水平。血漿中蛋白的含量反映了機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝的狀況。本試驗(yàn)中，補(bǔ)喂胍基乙酸顯著提高了18日齡羔羊血漿中總蛋白、白蛋白、球蛋白和血尿素的含量，降低了血氨的含量，這與Ostojic等（2015）的研究結(jié)果相似，這表明日糧中添加胍基乙酸可以促進(jìn)羔羊蛋白質(zhì)的合成和代謝。

4 結(jié)論

補(bǔ)喂胍基乙酸、瓜氨酸、谷氨酰胺和D-絲氨酸均可提高哺乳期羔羊生長(zhǎng)代謝，其中D-絲氨酸、谷氨酰胺的作用效果最好，瓜氨酸、胍基乙酸次之。