李 闖 黃 璇 張 旭 鄧 萍 戴求仲 蔣桂韜

(湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，長沙 410131)

硒是動物體必需的微量礦物元素之一，是一些重要抗氧化酶和含硒蛋白的必需組成部分，能夠清理動物體內(nèi)氧自由基，抑制過氧化脂質(zhì)的產(chǎn)生，具有抗氧化、抗應(yīng)激、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生物學(xué)功能[1]。目前國內(nèi)常見畜禽飼糧的補(bǔ)硒來源主要是無機(jī)硒(硒酸鹽、亞硒酸鹽)和有機(jī)硒(酵母硒、蛋氨酸硒)。諸多研究表明，有機(jī)硒能提高畜禽生長和抗氧化性能，改善免疫功能和蛋品質(zhì)[2-4]；且與無機(jī)硒相比，有機(jī)硒在增加畜禽機(jī)體臟器硒含量、蛋品質(zhì)保鮮儲存、蛋品質(zhì)和抗氧化能力等方面取得的效果更佳[5-6]，在生產(chǎn)實踐中應(yīng)用更為廣泛。Markovic等[7]研究表明，飼糧中添加酵母硒可以提高肉雞的抗氧化能力，改善生長性能、胴體性能和蛋品質(zhì)。張旭等[8]和鄧萍等[9]研究表明，飼糧中添加適宜水平的亞硒酸二葡萄糖酯能顯著提高蛋鴨的產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)和抗氧化能力。然而，目前關(guān)于亞硒酸二葡萄糖酯對肉鴨生長發(fā)育及健康安全性的研究還未見報道。因此，本試驗以臨武鴨為試驗對象，通過飼喂添加不同水平亞硒酸二葡萄糖酯的飼糧，研究其對7～35日齡臨武鴨生長性能、免疫器官指數(shù)、血清生化和抗氧化指標(biāo)的影響，為亞硒酸二葡萄糖酯在肉鴨飼料生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用亞硒酸二葡萄糖酯購買于湖南某生物科技有限公司，硒含量為2 000 mg/kg。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧

試驗選用300羽7日齡體況相近的臨武鴨，隨機(jī)分為5組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只鴨。對照組(Ⅰ組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，不額外補(bǔ)充硒源；試驗組(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組)分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.10、0.20、0.30和0.40 mg/kg的亞硒酸二葡萄糖酯(以硒計)?；A(chǔ)飼糧參照本研究室制定的地方標(biāo)準(zhǔn)《臨武鴨營養(yǎng)需要》配制，并根據(jù)《中國飼料成分及營養(yǎng)價值》(2019年第30版)表計算營養(yǎng)水平，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。各組飼糧實測硒含量見表2。試驗期28 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗于湖南省畜牧獸醫(yī)研究所水禽試驗場進(jìn)行。試驗前對鴨舍和器具進(jìn)行消毒，試驗鴨采用網(wǎng)上小間飼養(yǎng)，小間規(guī)格為1.80 m×1.00 m，各重復(fù)均勻分布于鴨舍，自由采食和飲水，每日觀察并記錄試驗鴨生長狀況和飼料消耗，其他飼養(yǎng)管理按照常規(guī)程序進(jìn)行。

1.4 測定指標(biāo)

1.4.1 生長性能

分別于試驗開始和結(jié)束前1天20:00斷料供水，次日08:00以重復(fù)為單位空腹稱重。試驗期間以重復(fù)為單位記錄試驗鴨每天的投料量和剩余料量，計算始重(IW)、末重(FW)、平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 血清生化和抗氧化指標(biāo)

試驗結(jié)束后，每個重復(fù)隨機(jī)選取體重相近、采食正常、無怪癖、健康的試驗鴨1只，禁食12 h后，采翅下靜脈血4 mL，靜置40 min后，3 500 r/min離心15 min，分離并收集血清，-20 ℃下保存?zhèn)溆?。利用全自動生化分析儀(URIT-8000，美國優(yōu)利特公司)檢測血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)和尿酸(UA)含量以及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和堿性磷酸酶(ALP)活性。采用比色法檢測血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)活性和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及總抗氧化能力(T-AOC)，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4.3 硒含量測定

按照GB 5009.93—2017[10]方法處理飼糧和血清樣品，采用氫化物原子熒光光譜法(TAS-990AFG原子吸收分光光度計，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)測定硒含量。

1.4.4 免疫器官指數(shù)

采血完畢后，頸部放血致死試驗鴨，分離出法氏囊、胸腺和脾臟，并記錄其重量，計算免疫器官指數(shù)：

免疫器官指數(shù)(g/kg)=免疫器官重(g)/宰前活重(kg)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，通過Duncan氏法進(jìn)行多重比較，顯著水平為P<0.05。各組試驗結(jié)果均用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨生長性能的影響

由表3可知，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨生長性能無顯著影響(P>0.05)。

表3 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨生長性能的影響

2.2 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨免疫器官指數(shù)的影響

由表4可知，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)。

表4 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨免疫器官指數(shù)的影響

2.3 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，Ⅴ組血清TG含量顯著低于Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ組(P<0.05)。血清硒含量隨飼糧亞硒酸二葡萄糖酯添加水平增加而升高，Ⅴ組血清硒含量最高，顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組(P<0.05)。飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨其他血清生化指標(biāo)無顯著影響(P>0.05)。

表5 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨血清生化指標(biāo)的影響

2.4 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，血清GSH-Px活性和GSH含量隨飼糧亞硒酸二葡萄糖酯添加水平增加而升高(P<0.05)，Ⅴ組血清GSH-Px活性和GSH含量最高，顯著高于Ⅰ和Ⅱ組(P<0.05)；Ⅳ組血清GSH-Px活性和GSH含量顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨血清SOD活性、MDA含量和T-AOC無顯著影響(P>0.05)。

表6 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨生長性能和免疫器官指數(shù)的影響

硒是畜禽生長發(fā)育所必需的一種微量元素，缺硒可以影響動物機(jī)體體內(nèi)生長激素合成，從而影響機(jī)體的生理代謝和生長發(fā)育[11]。隨著關(guān)于有機(jī)硒源開發(fā)和利用的研究增多，其對畜禽生長性能的結(jié)果存在很大差異。諸多研究表明，飼糧中添加適宜水平的有機(jī)硒對畜禽生長性能有明顯的改善作用[12-14]。范淳[15]在研究酵母硒對肉仔雞的添加效應(yīng)及生物學(xué)效價發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)飼糧(硒含量為0.04 mg/kg)中添加0.10～0.20 mg/kg的酵母硒能改善缺硒肉雞(試驗前2周飼喂缺硒飼糧)的生長性能。Ahmadi等[16]有關(guān)納米硒的研究結(jié)果與之相似。但宋清華等[17]和朱宏娟[18]報道，以蛋氨酸硒為硒源，基礎(chǔ)飼糧(硒含量為0.13 mg/kg)中添加0.15、0.30 mg/kg硒對良鳳花肉雞平均日增重和料重比均無顯著影響。Oliveira等[19]研究認(rèn)為，以酵母硒形式在飼糧中添加0.15、0.30、0.45、0.60 mg/kg硒對科寶肉雞生長性能無顯著影響，飼糧硒水平只要達(dá)到0.15 mg/kg就可以維持機(jī)體正常生長，與NRC(1994)[20]推薦量一致。本試驗條件下，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨生長性能未產(chǎn)生顯著影響，與上述研究的結(jié)論一致。

適量的硒能促進(jìn)免疫器官的生長發(fā)育，硒缺乏或過量均可對免疫器官的生長發(fā)育產(chǎn)生影響。崔保安等[21]和袁藝森[22]在研究硒對雛雞、雛鴨的免疫功能影響時發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加硒能顯著提高雛禽的免疫器官指數(shù)。王巧莉[23]在研究酵母硒對肉鵝的生物學(xué)效應(yīng)時發(fā)現(xiàn)，酵母硒添加水平為0.30 mg/kg時，能顯著提高3、6和9周齡肉鵝的免疫器官指數(shù)。李建柱等[24]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加不同硒源均能顯著提高1～9周齡淮南麻鴨的免疫器官指數(shù)。但Niu等[25]研究發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)飼糧(硒含量為0.10 mg/kg)中添加0.20、0.40 mg/kg蛋氨酸硒對肉雞胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)均未產(chǎn)生顯著影響。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨免疫器官指數(shù)未產(chǎn)生顯著影響，與田耀耀等[26]、Rao等[27]的研究結(jié)果一致。

有關(guān)有機(jī)硒對家禽生長性能和免疫器官指數(shù)影響的研究結(jié)論差異的原因可能主要是基礎(chǔ)飼糧的硒含量不同。當(dāng)飼糧缺硒較為明顯時，添加有機(jī)硒能改善家禽的生長發(fā)育，而當(dāng)基礎(chǔ)飼糧硒含量基本滿足機(jī)體所需后，額外添加硒對生長發(fā)育影響較小[15]。本試驗基礎(chǔ)飼糧中的硒含量(0.15 mg/kg)已能夠滿足試驗鴨生長和免疫器官發(fā)育對硒的需要。而試驗動物品種、生長階段和飼養(yǎng)環(huán)境等差異也會使研究結(jié)果不同。另據(jù)報道，種禽飼糧中添加硒能增加蛋中的硒含量，以使雛禽從卵黃囊中獲得較高的硒在體內(nèi)貯存[28-30]。本試驗試驗鴨7日齡開始添加有機(jī)硒，這也可能是造成補(bǔ)硒效果不明顯的原因。

3.2 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨血清生化指標(biāo)的影響

畜禽血清生化指標(biāo)能反映其機(jī)體健康及代謝狀況，其中血清TC和TG含量的高低可以反映機(jī)體脂類的吸收代謝及利用情況，其含量越低，說明機(jī)體對脂肪的利用率越高[24]，對動物的健康有重要的參考價值。硒具有脂蛋白調(diào)節(jié)功能，機(jī)體缺硒血清TC和TG含量會升高[22]。郭磊磊[31]和楊清麗[32]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加納米硒能降低小鼠和蛋雞血清TC和TG含量。本研究結(jié)果表明，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯能降低7～35日齡臨武鴨血清TG含量，與上述研究結(jié)果基本一致。這說明亞硒酸二葡萄糖酯具有降血脂作用，其作用機(jī)理有待進(jìn)一步深入研究。硒經(jīng)十二指腸吸收進(jìn)入血液后，與血液中的α-球蛋白和β-球蛋白結(jié)合，最后通過血液轉(zhuǎn)運到各組織中[33]。有研究表明，隨飼糧硒水平的上升，動物組織中可獲得更多的硒儲備[34]。本試驗中，血清硒含量隨飼糧中亞硒酸二葡萄糖酯添加水平上升而增加，0.40 mg/kg添加水平組血清硒含量最高，與趙亞偉等[35]和賈雪婷等[36]的研究結(jié)果一致。綜合血清生化各項指標(biāo)，7～35日齡臨武鴨飼糧中亞硒酸二葡萄糖酯適宜添加水平為0.40 mg/kg。

3.3 亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響

硒作為體內(nèi)重要的必需微量元素，直接參與機(jī)體重要抗氧化酶——GSH-Px的組成，它能催化有毒的過氧化物還原為無害的羥基化合物，從而保護(hù)生物膜不被氧化降解，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整[18]。缺硒會導(dǎo)致GSH-Px活性下降，造成機(jī)體內(nèi)過氧化物和過氧化脂質(zhì)含量升高。飼糧中添加硒能顯著提高蛋雞血清GSH-Px活性[37]。Cai等[38]發(fā)現(xiàn)飼糧中添加0.30～0.50 mg/kg的納米硒可顯著提高肉仔雞血清GSH-Px活性、GSH含量，抑制自由基的產(chǎn)生。張大為等[39]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧硒水平為0.30～0.60 mg/kg時能顯著提高固始雞血清和肝臟GSH-Px活性，并降低血清和肝臟MDA含量。王巧莉[23]和王娜等[40]的研究結(jié)果也與上述結(jié)果類似。本試驗研究結(jié)果顯示，飼糧中添加亞硒酸二葡萄糖酯能提高7～35日齡臨武鴨血清GSH-Px活性和GSH含量，且0.40 mg/kg添加水平組血清GSH-Px活性和GSH含量最高。綜合考慮，7～35日齡臨武鴨飼糧中添加0.40 mg/kg的亞硒酸二葡萄糖酯(以硒計)可獲得最佳的抗氧化能力。

4 結(jié) 論

飼糧(硒含量為0.15 mg/kg)中添加亞硒酸二葡萄糖酯對7～35日齡臨武鴨生長性能和免疫器官發(fā)育未產(chǎn)生不良影響，但能降低血清TG含量，并能提高機(jī)體抗氧化能力。綜合各項指標(biāo)，7～35日齡臨武鴨飼糧中亞硒酸二葡萄糖酯適宜添加水平為0.40 mg/kg(以硒計)。