姜文灝 楊 鑫 周秋白 王自蕊 高 淼 王 穎 胡重華 張文平

(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院, 南昌 330045)

黃鱔(Monopterus albus), 俗稱鱔魚, 屬于硬骨魚綱、合鰓目、合鰓科、黃鱔屬, 又名鱔魚、長魚、田鰻、無鱗公子等[1]。黃鱔肉質(zhì)細(xì)嫩, 無肌間刺, 具有很高的營養(yǎng)和藥用價(jià)值[2]。隨著野生黃鱔資源減少, 主要靠養(yǎng)殖黃鱔滿足市場需求, 國內(nèi)2018年黃鱔養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)31.9×107kg[2]。蛋白質(zhì)作為動(dòng)物核心營養(yǎng)成分, 是細(xì)胞、組織和機(jī)體的重要組成部分, 除為魚體生長提供必需氨基酸外, 同時(shí)還可作為魚類生命活動(dòng)的能量來源, 是決定魚類生長和發(fā)育的關(guān)鍵因素之一[3]。魚類必須從外界攝入充足的蛋白質(zhì), 以維持正常的生命活動(dòng)。目前關(guān)于魚類的蛋白質(zhì)需求量已有大量研究, 大多數(shù)魚類生長適宜的飼料蛋白質(zhì)含量在30%—50%[4]。關(guān)于黃鱔蛋白質(zhì)需求量研究較少, 楊代勤[4]及閆建林等[5]曾對24—75 g的黃鱔蛋白質(zhì)需求量進(jìn)行了研究, 研究結(jié)果分別為35.7%及45%, 有著較大的差異。通過對黃鱔飼料市場調(diào)查發(fā)現(xiàn)效果較好的飼料蛋白質(zhì)含量大多在40%—50%[6], 同時(shí)均添加冰鮮魚進(jìn)行投喂。目前黃鱔飼養(yǎng)主要依靠黃鱔配合飼料與冰鮮魚糜攪拌投喂來滿足黃鱔生長需要, 至今還沒有完全投喂黃鱔配合飼料進(jìn)行養(yǎng)殖。推測黃鱔是一種典型的肉食性魚類, 可能對碳水化合物利用能力有限, 蛋白質(zhì)需求量高。黃鱔飼料需求量也越來越大, 特別是隨著魚類資源衰退, 投喂冰鮮魚類的養(yǎng)殖方式已不能滿足黃鱔產(chǎn)業(yè)需求, 開發(fā)全價(jià)黃鱔配合飼料勢在必行。本試驗(yàn)通過比較不同飼料蛋白質(zhì)含量對黃鱔生長性能、蛋白質(zhì)保留率、消化能力及生理生化指標(biāo)等的影響, 綜合評價(jià)確定黃鱔飼料適宜蛋白質(zhì)含量, 為精細(xì)化開發(fā)黃鱔配合飼料提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料配方及制作

試驗(yàn)飼料所用原料于南昌大佑農(nóng)生物科技有限公司采購。主要蛋白源為魚粉和酪蛋白, 配制7種不同蛋白質(zhì)含量(干物質(zhì))的等氮等能飼料,T1(32.74%)、T2(38.50%)、T3(42.26%)、T4(48.35%)、T5(52.65%)、T6(57.87%)和T7(62.31%)[1]。在試驗(yàn)料制作時(shí), 先將原料用粉碎機(jī)粉碎, 再用80目篩過篩[11], 根據(jù)配方比例稱取原料并逐級攪拌混合均勻,加入適量的水, 經(jīng)膨化飼料機(jī)加工制粒, 自然風(fēng)干,于陰涼干燥處保存?zhèn)溆谩８髟囼?yàn)飼料的原料配方組成和營養(yǎng)成分實(shí)測值見表 1。

表1 試驗(yàn)飼料原料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab. 1 Ingredients and nutritional compositions of the test diets (% dry matter)

1.2 試驗(yàn)魚及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)所用黃鱔為鄱陽湖野生黃鱔, 黃鱔置于養(yǎng)殖箱中暫養(yǎng)和馴食, 直至黃鱔正常攝食配合飼料。馴食完成后, 選擇規(guī)格(17.1±0.2 g/尾)一致的700尾幼鱔作為試驗(yàn)用魚。然后將試驗(yàn)魚隨機(jī)均勻分在28個(gè)容積為300 L的養(yǎng)殖水箱中, 設(shè)置7個(gè)試驗(yàn)組,每個(gè)組設(shè)置4個(gè)重復(fù)。

飼養(yǎng)管理與實(shí)驗(yàn)室前期研究相同, 簡而言之,用自來水充分曝氣后用于黃鱔養(yǎng)殖, 實(shí)驗(yàn)期間連續(xù)使用增氧機(jī)充氣, 保持良好養(yǎng)殖水質(zhì)(溶氧量大于4 mg/L, 氨氮小于0.2 mg/L, pH在7.1—7.4, 自然水溫為18—31℃)。每天18:00定時(shí)定點(diǎn)飽食投喂, 投喂1時(shí)后收集殘餌烘干并從攝食量中扣除, 養(yǎng)殖期持續(xù)60d[1]。

1.3 樣品采集與指標(biāo)分析

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后, 禁食24h, 分別統(tǒng)計(jì)各養(yǎng)殖水箱中的黃鱔總重和數(shù)量, 用于計(jì)算其末均重(FBW)、存活率(Survival rate)、增重率(Weight gain rate)、飼料系數(shù)(Feed conversion ratio)和特定生長率(Specific growth rate)等。每養(yǎng)殖箱中取3尾, 每組共12尾進(jìn)行解剖取樣。斷尾取血[12], 分離血清用于測定各項(xiàng)生化指標(biāo)。測量形體參數(shù)(體長、內(nèi)臟重、肝臟重、腸道重等)并記錄, 用于后續(xù)計(jì)算。取8尾試驗(yàn)魚部分肝臟、胃和腸組織, –80℃冰箱保存, 備用于測定其生理生化指標(biāo), 取部分肌肉樣品和收集剩下的腸道及肝臟分別做營養(yǎng)成分分析。另取4尾黃鱔用于全魚營養(yǎng)成分分析。

指標(biāo)測定方法: 飼料的常規(guī)營養(yǎng)成分水分用105℃ 烘干法 (GB/T 6435—2014)、粗蛋白用凱氏定氮法 (GB/T 6432—1994)、粗脂肪用索氏抽提法(GB/T 6433—2006)和灼燒稱重法(GB/T 6438—2007) 進(jìn)行灰分測定[1]。生化指標(biāo)及消化酶活性采用商業(yè)試劑盒測定(南京建成生物工程研究所), 嚴(yán)格按照說明書方法進(jìn)行, Thermo酶標(biāo)儀讀取數(shù)據(jù)。

相關(guān)計(jì)算公式如下:

存活率(SR, %)= 終末數(shù)量/初始數(shù)量×100

增重率(WGR, %)=(終末體重–初始體重)/初始體重×100

特定生長率(SGR, %/d)=(Ln終末體重–Ln初始體重)/飼養(yǎng)天數(shù)×100

飼料系數(shù)(FCR)= 飼料攝入量/(終末體重–初始體重)

蛋白質(zhì)保留率(Protein retention rate,PRR,%)=(體蛋白增加量/飼料蛋白攝入量)×100

蛋白質(zhì)效率(Protein efficiency ratio,PER, %)=體重增加量/(飼料攝入量×飼料蛋白含量)×100

蛋白質(zhì)攝食率(Protein feeding intake,PFI,%/d)=飼料攝入量×飼料蛋白質(zhì)含量/[飼養(yǎng)天數(shù)×(初始體重+終末體重)/2]×100

干物質(zhì)攝食率(Dry matter feeding intake,DMFI, %/d)=飼料攝入量×(1–飼料水分)/[飼養(yǎng)天數(shù)×(初始體重+終末體重)/2]×100

1.4 數(shù)據(jù)處理分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析, 統(tǒng)計(jì)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SEM)展示, 先進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA), 再進(jìn)行多重比較(采用Duncan氏法), 顯著水平為P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 蛋白質(zhì)含量對黃鱔生長的影響

在養(yǎng)殖試驗(yàn)60d后, 各試驗(yàn)組黃鱔的存活率、增重率和特定生長率等結(jié)果見表 2, 存活率各組之間差異不顯著(P>0.05); 增重率隨飼料蛋白質(zhì)含量呈先升高后降低的趨勢, T5—T7三組顯著高于T1—T4組(P<0.05), 但當(dāng)飼料蛋白含量超過52.65%(T5)時(shí), 各高蛋白組間增重率無明顯差異(P>0.05)。

表2 蛋白質(zhì)含量對黃鱔生長的影響Tab. 2 Effects of dietary protein levels on growth performance of M. ablus (means±SEM)

2.2 蛋白質(zhì)含量對黃鱔飼料利用效果的影響

各組黃鱔的飼料系數(shù)及蛋白效率見表 3, 當(dāng)飼料粗蛋白含量由32.74%(T1)升高至62.31%(T7)時(shí),飼料系數(shù)呈先降低后上升的趨勢, T5—T7三組顯著低于T1、T2和T3組(P<0.05), 與T4組無明顯差異(P>0.05), 且T5—T7三組間差異不顯著(P>0.05); 蛋白質(zhì)效率隨飼料蛋白質(zhì)含量則呈先升高再下降的趨勢, T5—T7三組顯著高于T1、T2和T3組(P<0.05), 與T4組無明顯差異(P>0.05), 且T5—T7三組間差異不顯著(P>0.05); 蛋白質(zhì)保留率的變化趨勢與蛋白質(zhì)效率相似, 在T5組蛋白質(zhì)保留率最高;干物質(zhì)攝食率呈下降趨勢, 在T1組有最大值(P<0.05),且T3—T7五組間無顯著性差異(P>0.05); 蛋白質(zhì)攝食率的變化趨勢則與干物質(zhì)攝食率相反, T1組最低, T7組最高, 各組間均具有顯著性差異(P<0.05)。

表3 蛋白質(zhì)含量對黃鱔飼料利用的影響Tab. 3 Effects of dietary protein levels on the diet utilization of M. ablus (means±SEM)

2.3 黃鱔飼料蛋白質(zhì)需要量

在增重率基礎(chǔ)上進(jìn)行分析并進(jìn)行折線擬合, 擬合結(jié)果見圖 1。當(dāng)飼料干物質(zhì)蛋白含量在32.74%—48.35%時(shí), 擬合折線模型為y=5.4565x–101.3307,R2=0.9625,P<0.05。當(dāng)飼料干物質(zhì)蛋白含量在52.65%—62.31%時(shí), 折線模型為y=0.1362x+178.5256,R2=0.0214。二者交點(diǎn)坐標(biāo)為(52.60, 185.68), 即以增重率為評估指標(biāo), 幼鱔對飼料干物質(zhì)的蛋白質(zhì)需要量為52.60%。

圖1 增重率與蛋白質(zhì)含量之間的關(guān)系Fig. 1 Relationship between weight gain rate and dietary protein content

蛋白質(zhì)效率隨飼料蛋白質(zhì)含量的變化趨勢與增重率隨飼料蛋白質(zhì)含量之間呈相似關(guān)系。擬合折線模型為:y=3.5054x–18.8954,R2=0.9552,P<0.05, 及y=–0.1095x+156.706,R2=0.1521。如圖 2,由公式可知, 當(dāng)x=48.51時(shí)即可獲得較高的蛋白質(zhì)效率。因此, 由蛋白質(zhì)效率為評估指標(biāo), 確定幼鱔對蛋白質(zhì)的需要量為48.51%(干物質(zhì))。

圖2 蛋白質(zhì)效率與蛋白質(zhì)含量之間的關(guān)系Fig. 2 The relationship between protein efficiency ratio and dietary protein content

蛋白保留率與蛋白質(zhì)含量的擬合曲線模型為:y=1.3384x–28.1028,R2=0.9741,P<0.05, 及y=–0.1927x+50.6558,R2=0.2966。由圖 3可知, 當(dāng)x=51.44時(shí), 蛋白質(zhì)保留率較高。因此, 由蛋白保留率為評估指標(biāo), 確定幼鱔對蛋白質(zhì)的需要量為51.44%(干物質(zhì))。

圖3 蛋白質(zhì)保留率與蛋白質(zhì)含量之間的關(guān)系Fig. 3 The relationship between protein retention rate and dietary protein content

飼料系數(shù)與蛋白質(zhì)含量之間的關(guān)系擬合折線模型為: 當(dāng)?shù)鞍缀吭?2.74%—48.35%(干物質(zhì))時(shí),擬合折線模型為y=–0.0882x+5.5923,R2=0.9719,P<0.05。當(dāng)?shù)鞍缀吭?2.65%—62.31%(干物質(zhì))時(shí), 折線模型為y=0.003x+1.0738,R2=0.0627。當(dāng)x=49.53時(shí), 可獲得較低的飼料系數(shù)(圖 4)。即以飼料系數(shù)為指標(biāo)幼鱔對蛋白質(zhì)的需要量為49.53%(干物質(zhì))。綜上所述, 在本試驗(yàn)條件下, 幼鱔對飼料的蛋白質(zhì)需求量為48.51%—52.60%。

圖4 飼料系數(shù)與蛋白質(zhì)含量之間的關(guān)系Fig. 4 The relationship between feed conversion ratio and dietary protein content

2.4 蛋白質(zhì)含量對黃鱔血清生化指標(biāo)的影響

如表 4所示, 隨著飼料中蛋白質(zhì)含量的升高, 血清中GPT和GOT的活性呈下降趨勢, T5—T7顯著低于其他組(P<0.05), 但三組之間無明顯差異(P>0.05);血清中TP含量呈先上升后不變的趨勢, 以T4組最高, 顯著高于T1、T2和T3組(P<0.05), 與T5、T6和T7組無明顯差異(P>0.05); BUN含量呈上升趨勢,T7組最高, 與T6組差異不顯著(P>0.05), 顯著高于T1—T5組(P<0.05); 血清中TC和TG的呈下降趨勢,在T1組有最大值, T7組有最小值, 具有明顯差異(P<0.05); 血清中HDL-C的含量呈下降趨勢, 在T1組有最大值, 與T2組無明顯差異(P>0.05), 但高于T3—T7組(P<0.05); 血清中LDL-C的含量呈下降趨勢, 在T1組有最大值, 顯著高于T5—T7三組(P<0.05),同時(shí)T2—T5組差異不顯著(P>0.05), T4—T7組之間差異不顯著(P>0.05); 血清中CRE的含量無明顯變化, 各組之間無顯著性差異(P>0.05); 血清中GLU的含量呈現(xiàn)先降低后不變的趨勢, 在T1組有最大值,顯著高于其他各組(P<0.05), T2組次之, T3和T4隨之降低, T5、T6和T7無顯著性差異(P>0.05)。

表4 蛋白質(zhì)含量對黃鱔血清生化指標(biāo)的影響Tab. 4 Effects of dietary protein levels on serum biochemical indexes of M. ablus (means±SEM)

2.5 蛋白質(zhì)含量對黃鱔消化性能的影響

如圖 5所示, 在肝胰臟、腸和胃3種組織中, 蛋白酶活性均隨飼料蛋白質(zhì)含量升高而升高, 以T1組最低(P<0.05), T7組最高(P<0.05), 但在肝胰臟及腸組織中T7組與T5、T6組差異不明顯(P>0.05), 在胃組織中T7組與T4、T5、T6差異不明顯(P>0.05); 如圖 6所示, 隨著飼料蛋白質(zhì)含量的升高, 肝胰臟脂肪酶呈下降趨勢, T1和T2組最高, 顯著高于其他各組(P<0.05); 胃、腸脂肪酶活性各試驗(yàn)組之間無顯著性差異(P>0.05)。

圖6 飼料不同蛋白質(zhì)含量對黃鱔不同組織脂肪酶活性的影響Fig. 6 Effects of dietary protein levels on lipase activity in different tissues of M. ablus

如圖 7所示, 隨著飼料蛋白質(zhì)含量的升高, 胃淀粉酶活性無明顯變化, 各試驗(yàn)組之間無顯著性差異(P>0.05); 肝胰臟及腸組織淀粉酶的活性隨蛋白質(zhì)含量的升高呈下降趨勢, 在T1組有最大值, 且T1、T2組無明顯差異(P>0.05), T7組最小, 顯著小于T1—T4組(P<0.05)。

圖7 飼料不同蛋白質(zhì)含量對黃鱔不同組織淀粉酶活性的影響Fig. 7 Effects of dietary protein levels on amylase activity in different tissues of M. ablus

3 討論

3.1 飼料蛋白質(zhì)含量對黃鱔生長性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明, 黃鱔攝食飼料的蛋白含量不同對其存活率無顯著影響, 說明黃鱔能夠耐受不同蛋白質(zhì)含量的飼料, 這和用不同蛋白質(zhì)含量的飼料飼喂拉薩裸裂尻魚(Schizopygopsis younghusbandi)[7]、大鱗鲃(Barbus capito)幼魚[8]、條紋幼鯰(Pangasianodon hypophthalmus)[9]和寶石鱸(Scortum barcoo)[10]等得到的結(jié)果類似。本試驗(yàn)中隨飼料蛋白質(zhì)含量的升高黃鱔的增重率和特定生長率先升高,至飼料蛋白含量62.31%組增重率和特定生長率有下降趨勢, 但不明顯。已有研究表明, 飼料蛋白質(zhì)含量的升高會(huì)對魚類的生長速度造成不同的影響,丁立云等[11]對星斑川鰈(Platichthys stellatus)的研究結(jié)果顯示, 飼料蛋白含量的升高可促進(jìn)魚體生長,但這種促進(jìn)作用會(huì)在飼料蛋白升高到某一含量時(shí)消失。王蕾蕾等[12]在黑鯛(Takifugu rubripes)上作了相似的研究, 結(jié)果表明魚體的生長速度與飼料蛋白含量并非呈線性關(guān)系, 而是呈先升高后下降的趨勢。魚類在攝入過量的蛋白質(zhì)后, 蛋白質(zhì)分解為氨基酸, 氨基酸再分解供能, 在氨基酸分解過程中會(huì)消耗一定的能量, 產(chǎn)生氧化應(yīng)激和增加氮代謝廢物[13,14]。不同種類的魚類利用蛋白質(zhì)作能量能力不同, 過量飼料蛋白質(zhì)含量對生長產(chǎn)生不同程度的負(fù)面影響[21]。在本試驗(yàn)中, 黃鱔的生長性能與丁立云等[11]對星斑川鰈幼魚的研究結(jié)果類似, 先隨飼料蛋白質(zhì)含量的升高而升高, 當(dāng)?shù)鞍缀窟_(dá)到一定含量后, 黃鱔的生長性能不再改變, 這說明黃鱔攝食首先滿足蛋白質(zhì)需要, 當(dāng)?shù)鞍姿竭_(dá)到生長需求后,飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率趨于穩(wěn)定。

3.2 飼料蛋白質(zhì)含量對黃鱔飼料利用效果的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明, 黃鱔對高蛋白組飼料的利用效果較好, 飼料系數(shù)較低蛋白飼料低, 這在多種魚類上得以印證[10,11,15,16]。另一方面, 由表 3可知, 蛋白質(zhì)效率先隨飼料蛋白含量的升高而有所提高, 但在蛋白含量達(dá)到一定含量后, 蛋白質(zhì)效率不再明顯變化, 這與先前南方鲇的研究結(jié)果相一致[17]。另有研究指出, 蛋白質(zhì)效率與飼料蛋白含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系[13,18], 或先升高然后再下降[13,19,20]。這些結(jié)果可能是由不同魚類的特異性造成差異, 即不同魚類對粗蛋白含量不同的飼料, 耐受性也不同有關(guān), 對飼料蛋白需求高的魚類, 可能在攝食高蛋白飼料時(shí)體內(nèi)蛋白酶的活性較高, 能夠?qū)︼暳系鞍壮浞掷脕硖岣呱L速度, 而對飼料蛋白需求較低的魚類, 在攝食高蛋白質(zhì)含量的飼料時(shí), 體內(nèi)蛋白酶的活性較低不足以完全利用蛋白質(zhì), 多余的蛋白質(zhì)被浪費(fèi),從而造成較低的蛋白質(zhì)效率[1], 這與上述結(jié)果中消化酶中胰蛋白酶的變化(圖 5)相一致。

圖5 飼料不同蛋白質(zhì)含量對黃鱔不同組織蛋白酶活性的影響Fig. 5 Effects of dietary protein levels on protease activity in different tissues of M. ablus

此外, 本試驗(yàn)結(jié)果表明, 攝食率與飼料蛋白含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系, 即低蛋白組飼料黃鱔攝食率高,而高蛋白組飼料黃鱔攝食率低。這可能是魚體為滿足蛋白質(zhì)需求而做出的適應(yīng)性改變。相似的結(jié)果在雜交鱘(Acipenser baeriifemale× A. gueldenstaedtiimale)上得以展現(xiàn)[21]。本實(shí)驗(yàn)在飼料低蛋白質(zhì)含量時(shí), 黃鱔蛋白質(zhì)效率較低, 可能是由于黃鱔需要增加攝食量來滿足機(jī)體對蛋白質(zhì)的需求, 而低蛋白含量飼料中含有較高的碳水化合物, 過高的碳水化合物影響了黃鱔的正常生理功能, 在上述黃鱔血清的生化結(jié)果中進(jìn)一步證實(shí)。而張磊[22]的研究表明, 達(dá)氏鱘(Acipenser dabryanus)的攝食率隨著飼料蛋白質(zhì)含量的升高而升高, 這種結(jié)果的差異可能與不同魚種應(yīng)對飼料不同蛋白質(zhì)含量的能力有關(guān)。

3.3 飼料蛋白質(zhì)含量對黃鱔血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)可直觀反映機(jī)體的代謝穩(wěn)態(tài), 故用來衡量機(jī)體的健康狀況以及機(jī)體對環(huán)境的適應(yīng)能力[1,23]。在一般情況下, GPT與GOT主要在肝細(xì)胞中, 當(dāng)肝細(xì)胞受損失, 這兩種酶會(huì)被釋放進(jìn)入血液, 因此, 血清中這兩種酶的變化可以反映肝臟是否發(fā)生病變[32,33]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 血清中這兩種酶的活性隨飼料蛋白含量升高而呈下降趨勢, 這與紅旗東方鲀[13]中的研究結(jié)果相一致。這可能意味著, 低蛋白含量的飼料不能提供足夠的蛋白質(zhì)而導(dǎo)致肝臟受到了損傷。此外, 血清MDA的含量也與飼料蛋白水平相關(guān), 低蛋白水平與過高蛋白水平組MDA含量高, 而適宜蛋白水平MDA含量低, 這樣的結(jié)果表明在一定蛋白水平范圍內(nèi), 飼料蛋白水平的提高能減小肝臟損傷, 但超過這個(gè)區(qū)間后, 會(huì)導(dǎo)致肝損傷。結(jié)合BUN含量增加, 這可能是蛋白質(zhì)作為能源物質(zhì)增加了氧化應(yīng)激, 反而對機(jī)體不利。血清TP含量可看出機(jī)體的蛋白代謝情況[24], 當(dāng)肝功能異常時(shí), 血清TP含量降低[14]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 血清TP含量先隨飼料蛋白水平的升高而升高, 然后保持相對穩(wěn)定。這與珍珠龍膽石斑魚(Epinephelus lanceolatusmale×E. fuscoguttatusfemale)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致[25], 這可能意味著, 低蛋白水平的飼料會(huì)損傷魚體肝臟功能。然而有研究指出, 血清TP含量并不會(huì)受飼料蛋白水平的影響[13], 造成這種結(jié)果的原因尚未明確, 可能是魚種特異性, 也可能是蛋白水平范圍不同。BUN是含氮物質(zhì)在機(jī)體內(nèi)的代謝產(chǎn)物, 外源蛋白質(zhì)消化吸收后最終以游離氨基酸和小肽等形式存在, 接著被用于合成沉積或用于分解供能, 分解的部分主要以BUN的形式隨尿排出體外[1],一般認(rèn)為血漿中BUN含量降低意味著蛋白質(zhì)分解減弱, 而蛋白質(zhì)沉積加強(qiáng)[26]。在赤石斑魚(Epinephelus akaara)上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示[27], 血清BUN含量隨飼料蛋白水平的升高而升高, 這與本試驗(yàn)的結(jié)果類似, 這說明飼料中蛋白質(zhì)含量越高被代謝掉的N元素也越多。TC及TG是構(gòu)成血脂的主要成分, 血脂主要來源于外源脂肪的吸收及肝臟等組織的合成,血脂含量對全身脂類含量的影響很小, 但血脂會(huì)轉(zhuǎn)運(yùn)于各組織之間[1]。因此, 動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的脂類代謝情況, 一定程度上可由血液中TC、TG的含量反映[28]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 在蛋白水平升高時(shí), 血液中TC與TG含量呈降低趨勢, 這可能是魚體加強(qiáng)了對脂肪的吸收從而彌補(bǔ)飼料蛋白質(zhì)攝入不足, 且可能通過糖酵解途徑為合成脂肪提供原料, 從而造成血脂升高, 而當(dāng)攝入飼料蛋白足夠時(shí), 機(jī)體則會(huì)降低脂類代謝[1], 這與一些研究結(jié)果相一致[25,29]。HDL-C被稱為“血管清道夫”能把TC從血液及外周組織轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟, 而LDL-C則是把TC從肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)至外周組織[27]。本試驗(yàn)結(jié)果表明, 當(dāng)飼料蛋白水平升高時(shí), HDLC及LDL-C含量降低, 這說明攝入高含量蛋白會(huì)抑制脂肪代謝強(qiáng)度, 類似的結(jié)果出現(xiàn)在暗紋東方鲀(Takifugu obscurus)[30]的研究中。CRE是肌酸和磷酸肌酸代謝的最終產(chǎn)物, 血清中肌酐含量與肌肉活動(dòng)量有關(guān), 生成的肌酐經(jīng)由腎臟過濾排出, 因此, 血清中的CRE含量可反映腎臟的健康狀況[31]。本試驗(yàn)結(jié)果表明, 血清肌酐含量不受飼料蛋白水平的影響, 這與尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)[32]上的研究結(jié)果相一致。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 隨著飼料蛋白水平升高, GLU含量呈降低趨勢, 這可能是魚體在攝食低蛋白飼料時(shí), 營養(yǎng)的不足而提高了攝食量,間接加強(qiáng)了碳水化合物的攝入。當(dāng)飼料蛋白水平升高時(shí), 飼料中碳水化合物含量降低, GLU含量也隨之降低, 在暗紋東方鲀[30]研究中具有相似的結(jié)果。

3.4 飼料蛋白質(zhì)含量對黃鱔消化酶活性的影響

消化酶活力對機(jī)體消化吸收營養(yǎng)物質(zhì)的能力具有重要的影響, 進(jìn)而影響生長性能。另一方面,受食性及飼料組成等多個(gè)因素都會(huì)影響消化酶活性, 存在多樣性和復(fù)雜性[25,33]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 在黃鱔肝胰臟、胃和腸道中,蛋白酶活性在腸道中較高, 且腸道蛋白酶活性呈先隨飼料蛋白水平升高而升高然后保持穩(wěn)定的現(xiàn)象,這與劉勇[34]在建鯉(Cyprinus carpio var.Jian)上的研究結(jié)果一致, 說明黃鱔對飼料蛋白質(zhì)含量變化的適應(yīng)性較強(qiáng)。但也有研究表明飼料中過高蛋白水平會(huì)降低腸道蛋白酶活性[35,36]。飼料蛋白過高, 可能對魚體造成氮代謝負(fù)擔(dān), 蛋白酶活性降低減少攝入蛋白質(zhì)吸收量, 這可能與魚類能量利用機(jī)制不同有關(guān)。推測黃鱔對蛋白質(zhì)作能量利用能力較強(qiáng)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 在黃鱔肝胰臟、胃和腸道中,腸道的脂肪酶活性最高, 但腸道脂肪酶活性不受飼料蛋白質(zhì)水平的影響, 這與達(dá)氏鱘上的研究結(jié)果類似[22]。已有研究表明, 腸道脂肪酶是底物依賴型,即腸道脂肪酶活性與脂肪含量有關(guān)[34,36,37], 本研究中各組飼料脂肪含量基本一致, 這可能是脂肪酶活性變化不明顯的原因。另一方面, 腸道與肝胰臟脂肪酶活性的變化不同, 在本研究中, 隨著飼料蛋白質(zhì)水平升高, 肝胰臟脂肪酶的活性也隨之降低, 這可能是魚體在攝食低蛋白質(zhì)飼料時(shí), 為滿足機(jī)體能量需要, 加強(qiáng)機(jī)體對脂肪的利用, 而最終做出的代謝調(diào)整。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 在黃鱔肝胰臟、胃和腸道中,肝胰臟與腸道淀粉酶活性變化基本一致, 在飼料蛋白水平升高時(shí)活性降低。這與建鯉[34]及光倒刺鲃(Spinibarbus hollandi)[38]上的研究結(jié)果類似。這可能是因?yàn)樵谠O(shè)計(jì)蛋白質(zhì)水平試驗(yàn)時(shí), 為了滿足各試驗(yàn)組飼料能量一致, 通常在低蛋白組添加大量的碳水化合物而在高蛋白組添加較少的碳水化合物[1]。肝胰臟和腸道淀粉酶可能與腸道淀粉酶情況相同。但在黃姑魚上的研究結(jié)果表明在飼料蛋白含量升高的同時(shí)腸道淀粉酶活性也隨之上升[39], 可能是不同魚種對淀粉的利用能力不同, 而造成這種差異。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 淀粉酶活性在3種組織中的胃內(nèi)最小, 且飼料蛋白質(zhì)水平并不會(huì)對其活性造成影響, 這也說明黃鱔腸道是淀粉的主要消化場所,而胃不是淀粉的主要消化場所[37]。同時(shí)也說明黃鱔對淀粉利用能力不強(qiáng), 是一種典型的肉食性魚類。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下, 當(dāng)飼料蛋白水平過低時(shí), 黃鱔會(huì)增加攝食量以滿足蛋白質(zhì)需求, 但攝入過多碳水化合物會(huì)對損傷黃鱔肝臟。在飼料蛋白水平過高時(shí), 氧化應(yīng)激增加, 阻礙黃鱔生長, 降低蛋白質(zhì)效率與蛋白保留率, 同時(shí)黃鱔通過降低攝食量減少蛋白質(zhì)攝入。飼料蛋白質(zhì)含量在48.51%—52.60%時(shí),幼鱔可獲得較好的生產(chǎn)性能。