鄭 義，李詩(shī)穎，李 闖，梁一凡，糜心怡，陳 琳

（1.徐州工程學(xué)院食品與生物工程學(xué)院，江蘇徐州 221018；2.江蘇省食品資源開(kāi)發(fā)與質(zhì)量安全重點(diǎn)建設(shè)實(shí)驗(yàn)室，江蘇徐州 221018）

高脂膳食是高脂血癥的重要誘因，而高脂血癥，尤其是高膽固醇血癥，是動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病等心血管疾病最常見(jiàn)的危險(xiǎn)因素之一。近年來(lái)，營(yíng)養(yǎng)和健康日益受到重視，我國(guó)居民膳食營(yíng)養(yǎng)狀況總體得到改善，膳食因素對(duì)心血管疾病死亡率的歸因比例有所下降，但膳食結(jié)構(gòu)不合理的狀況仍在延續(xù)，目前心血管病仍是我國(guó)居民首位死亡原因[1]；心血管病危險(xiǎn)因素的流行水平較為嚴(yán)峻，需進(jìn)一步加強(qiáng)心血管病的防治工作[2]。大劑量長(zhǎng)期服用他汀類(lèi)降脂藥會(huì)導(dǎo)致高血糖、肝酶升高、神經(jīng)損傷、肌肉疼痛等副作用。研究表明來(lái)源于橄欖、大豆、糙米、燕麥、蕎麥、花生、淡水哈、卵形鯧鲹魚(yú)、沙丁魚(yú)等動(dòng)植物蛋白的生物活性肽具有較好的輔助降血脂作用[3]。

銀杏肽為銀杏蛋白經(jīng)過(guò)單酶或復(fù)酶水解后分離所得的低聚肽，已被證實(shí)具有抗氧化、降血糖和肝保護(hù)等作用。張煥新等[4]研究表明銀杏肽對(duì)鄰苯三酚自氧化和亞油酸氧化具有較強(qiáng)的抑制活性，對(duì)超氧陰離子和羥基自由基具有較好的清除活性。賈韶千等[5-6]制備得到了相對(duì)分子量為452.21 的銀杏肽，在質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL 時(shí)，該肽對(duì)DPPH 和羥基自由基的清除率均在80%以上。Ma 等[7]純化和鑒定了3 種相對(duì)分子質(zhì)量小于1000 的ACE 抑制肽，分子對(duì)接結(jié)果表明銀杏肽主要通過(guò)氨基酸殘基與ACE 活性位點(diǎn)結(jié)合而抑制ACE 活性。Sun 等[8]純化得到了相對(duì)分子質(zhì)量小于10000 且具有較好α-葡萄糖苷酶抑制活性的銀杏肽，在此基礎(chǔ)之上開(kāi)發(fā)了銀杏肽功能飲料。鄭義等[9]通過(guò)急性酒精性肝損傷小鼠模型考察了銀杏肽的保肝作用，結(jié)果表明銀杏肽能降低酒精性肝損傷小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）水平，抑制促炎細(xì)胞因子表達(dá)水平，提高肝臟抗氧化酶活性，降低肝臟丙二醛（malondialdehyde，MDA）和蛋白質(zhì)羰基水平。銀杏肽能降低小鼠血清TG 和TC 水平，提示銀杏肽具有潛在的降脂作用，有關(guān)銀杏肽降脂作用的研究未見(jiàn)報(bào)道。

本研究采用高脂膳食誘導(dǎo)的高脂血癥小鼠模型，基于血脂和炎性因子水平、脂肪消化率、動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病等并發(fā)癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)、氧化應(yīng)激狀態(tài)等方面，評(píng)價(jià)銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠的降脂作用，旨在為銀杏肽的開(kāi)發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

新鮮銀杏 江蘇省邳州市；ICR 小鼠（20±2 g）生產(chǎn)許可證號(hào)SCXY （魯） 20190003，濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司；基礎(chǔ)飼料和高脂飼料：基礎(chǔ)飼料中蛋白、脂肪和碳水化合物的供能比分別為20.54%、12.79%和66.67%；高脂飼料中蛋白、脂肪和碳水化合物的供能比分別為19.54%、47.18%和33.29%江蘇省協(xié)同生物醫(yī)藥生物工程有限公司；風(fēng)味蛋白酶（1.5×104U/g） 丹麥諾維信公司；TG、TC、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、總抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）、總超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase，T-SOD）、MDA 試劑盒 南京建成生物工程研究所；腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）試劑盒 美國(guó)R&D 公司；辛伐他汀 國(guó)藥準(zhǔn)字H20010053，江蘇聯(lián)環(huán)藥業(yè)股份有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

BILON92-IID 超聲波細(xì)胞破碎儀 上海比朗儀器有限公司；Labscale 小型切向流超濾系統(tǒng) 美國(guó)Millipore 公司；723C 可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司；LGJ-18A 冷凍干燥機(jī) 北京四環(huán)科學(xué)儀器廠；TGL-16G 型臺(tái)式離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠；Synergy2 多功能酶標(biāo)儀 美國(guó)伯騰儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 銀杏肽的制備 采用超聲輔助堿提酸沉法制備銀杏蛋白[10]，考馬斯亮藍(lán)法測(cè)得純度為83.42%。按液料比15:1 mL/g 將銀杏蛋白與去離子水配成懸液，沸水浴10 min 滅內(nèi)源性酶；調(diào)pH7.7，加入1.2%風(fēng)味蛋白酶，55 ℃振蕩酶解3 h；酶解后沸水浴10 min 滅酶，8000 r/min 離心20 min；將上清液通過(guò)截留相對(duì)分子質(zhì)量為1 kDa 的超濾膜，收集濾液，冷凍干燥，得銀杏肽，高效凝膠排阻色譜法測(cè)得銀杏肽相對(duì)分子質(zhì)量分布范圍為300～1000。

1.2.2 動(dòng)物分組與處理 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究遵循相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，符合本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)所制定的倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，得到該委員會(huì)批準(zhǔn)。60 只ICR 小鼠經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)后，10 只正常組小鼠飼喂基礎(chǔ)飼料，其余50 只小鼠飼喂高脂飼料，連續(xù)6 周。造模后，高脂血癥小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為5 組：高脂模型組、陽(yáng)性對(duì)照組和三組銀杏肽組。低、中和高劑量銀杏肽組每天分別灌胃100、200 和400 mg/kg 銀杏肽，連續(xù)4 周。陽(yáng)性對(duì)照組每天灌胃10 mg/kg 辛伐他?。徽＝M和高脂模型組每天灌胃等量去離子水。灌胃期間，各組小鼠自由飲水和攝食基礎(chǔ)飼料。每周記錄小鼠體質(zhì)量和攝食量。

1.2.3 小鼠肝臟指數(shù)的測(cè)定 脂肪表觀消化率測(cè)定后，頸椎脫臼法處死小鼠，稱(chēng)量小鼠體重。無(wú)菌摘取肝臟，稱(chēng)量小鼠肝臟質(zhì)量，根據(jù)肝臟質(zhì)量與體質(zhì)量比，計(jì)算肝臟指數(shù)。

1.2.4 脂肪表觀消化率的測(cè)定 參考田許等[11]報(bào)道的方法測(cè)定各組小鼠脂肪表觀消化率。末次灌胃24 h后，將小鼠置于代謝籠中，經(jīng)3 d 適應(yīng)性飼喂后，收集每只小鼠72 h 內(nèi)的糞便。稱(chēng)取1 g 小鼠糞便（或飼料），60 ℃烘干至恒重，記錄質(zhì)量。將烘干后的小鼠糞便（或飼料）置于索氏提取器中，采用石油醚抽提6 h，將抽提后的殘?jiān)娓芍梁阒?，記錄質(zhì)量。兩次恒重時(shí)的質(zhì)量差即為小鼠糞便（或飼料）中粗脂肪質(zhì)量。脂肪表觀消化率計(jì)算公式如下：

1.2.5 血清生化指標(biāo)的測(cè)定 小鼠眼眶后靜脈叢采血，室溫靜置1 h，3500 r/min 離心10 min，收集上清液即為血清，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定TG、TC、LDLC、HDL-C、IL-6 和TNF-α水平。采用Ghoneim 等[12]報(bào)道的方法，計(jì)算動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)（atherogenic index，AI）和冠心指數(shù)（coronary heart index，CHI）。

1.2.6 肝臟抗氧化能力的測(cè)定 稱(chēng)取1 g 小鼠肝臟，置于組織勻漿器中，加入9 倍體積生理鹽水，制成10%（m/V）肝組織勻漿，3000 r/min 離心10 min，收集上清液，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定T-AOC、T-SOD和MDA 水平。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 24.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用Dunnett-t 檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)小鼠體質(zhì)量和肝臟指數(shù)的影響

高脂膳食通常會(huì)導(dǎo)致肥胖，體質(zhì)量超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)值的20%，可定義為肥胖[13]。圖1 為銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠體質(zhì)量和肝臟指數(shù)的影響。造模后，高脂模型組小鼠體質(zhì)量顯著高于正常組（P＜0.05），模型組小鼠的體質(zhì)量比正常組高出26.8%，表明飼喂高脂飼料造成了小鼠肥胖。中、高劑量銀杏肽組小鼠體質(zhì)量顯著（P＜0.05）低于模型組，提示銀杏肽干預(yù)降低了高脂血癥小鼠體質(zhì)量。

圖1 銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠體質(zhì)量和肝臟指數(shù)的影響Fig.1 Effects of Ginkgo biloba peptides on the body weight and liver index in hyperlipidemia mice

高脂模型組小鼠的肝臟指數(shù)為正常組的1.33倍，肝臟指數(shù)顯著高于正常組（P＜0.05），提示高脂膳食造成了脂肪在肝臟的堆積，導(dǎo)致肝臟腫大。與高脂模型組相比，低、中、高劑量銀杏肽組小鼠肝臟指數(shù)均顯著下降（P＜0.05），提示銀杏肽干預(yù)緩解了高脂膳食導(dǎo)致的小鼠肝臟腫大，但低、中、高劑量組間差異不顯著（P＞0.05）。陽(yáng)性對(duì)照辛伐他汀也能顯著降低小鼠肝臟指數(shù)（P＜0.05），但對(duì)體質(zhì)量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。高劑量銀杏肽組小鼠肝臟指數(shù)與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.2 對(duì)小鼠攝食量和脂肪表觀消化率的影響

攝食量可反映小鼠的食欲情況；脂肪表觀消化率為脂肪被小鼠攝入前的含量和在糞便中含量的差值，可反映小鼠對(duì)脂肪的消化能力。圖2 為銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠攝食量和脂肪表觀消化率的影響。模型組小鼠攝食量顯著高于正常組（P＜0.05），提示高脂膳食提高了小鼠的食欲。低、中、高劑量銀杏肽組小鼠的攝食量與高脂模型組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），表明銀杏肽對(duì)小鼠食欲無(wú)顯著影響。模型組小鼠脂肪表觀消化率顯著低于正常組（P＜0.05），表明高脂膳食中脂肪含量過(guò)高，超出了小鼠的消化能力。中、高劑量銀杏肽組小鼠脂肪表觀消化率分別比高脂模型組提高9.37%、13.21%，均顯著高于高脂模型組（P＜0.05）。陽(yáng)性對(duì)照辛伐他汀也顯著提高了高脂血癥小鼠對(duì)脂肪的消化能力（P＜0.05）。中、高劑量銀杏肽組小鼠攝食量和脂肪表觀消化率與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.3 對(duì)小鼠血清TG 和TC 水平的影響

血清TG 和TC 是重要的血脂常規(guī)測(cè)定指標(biāo)。圖3 為銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠血清TG 和TC 水平的影響。高脂模型組小鼠血清TG 和TC 水平分別是正常小鼠的1.9 和1.7 倍，顯著高于正常組（P＜0.05）。與高脂模型組相比，低、中、高劑量銀杏肽組小鼠TG 水平分別降低了12.38%、28.22%、43.56%，TC水平分別降低了15.67%、26.49%、40.67%，銀杏肽組小鼠血清TG 和TC 水平均顯著低于模型組（P＜0.05），高劑量銀杏肽組小鼠血清TG 和TC 水平與正常組無(wú)顯著性差異（P＞0.05），表明銀杏肽干預(yù)改善了高脂血癥小鼠的血脂水平。與高脂模型組相比，辛伐他汀也能顯著降低小鼠血清TG 和TC 水平（P＜0.05）。高劑量銀杏肽組小鼠TG 和TC 水平與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

圖3 銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠血清TG 和TC 水平的影響Fig.3 Effects of Ginkgo biloba peptides on the serum TG and TC levels in hyperlipidemia mice

2.4 對(duì)小鼠血清LDL-C 和HDL-C 水平的影響

LDL-C 可將膽固醇運(yùn)輸至肝外組織，LDL-C 水平與心血管疾病的發(fā)病率及病變程度正相關(guān)；HDLC 可將膽固醇從肝外組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟進(jìn)行代謝，HDL-C 水平與心血管病的患病風(fēng)險(xiǎn)負(fù)相關(guān)。銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠血清LDL-C 和HDL-C 水平的影響見(jiàn)圖4。高脂模型組小鼠血清LDL-C 水平是正常組的2.7 倍，顯著高于正常組（P＜0.05）；HDL-C 水平比正常組降低了40.4%，顯著低于正常組（P＜0.05）。與模型組相比，銀杏肽組小鼠血清LDL-C 水平顯著降低，HDL-C 水平顯著升高（P＜0.05）；高劑量銀杏肽組小鼠血清HDL-C 可恢復(fù)至正常水平（P＞0.05）。與模型組相比，辛伐他汀也能顯著降低小鼠血清LDLC，升高HDL-C 水平（P＜0.05）。高劑量銀杏肽組小鼠LDL-C 水平顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），HDLC 水平與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

圖4 銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠血清LDL-C 和HDL-C水平的影響Fig.4 Effects of Ginkgo biloba peptides on the serum LDL-C and HDL-C levels in hyperlipidemia mice

2.5 對(duì)小鼠AI 和CHI 的影響

AI 和CHI 可分別反映動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。圖5 為銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠AI 和CHI 的影響。高脂模型組小鼠AI 和CHI 分別是正常組的29.7 和2.8 倍，顯著高于正常組（P＜0.05），表明高脂膳食提高了小鼠動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。與高脂模型組相比，低、中、高劑量銀杏肽組小鼠AI 分別降低了45.67%、74.04%、94.23%，CHI分別降低了30.84%、50.00%、63.63%，均顯著低于模型組，且組間差異顯著（P＜0.05），表明銀杏肽在一定程度上降低了高脂血癥小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。與高脂模型組相比，辛伐他汀也能顯著降低小鼠AI 和CHI（P＜0.05）。高劑量銀杏肽組小鼠AI 顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），而CHI 與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

圖5 銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠AI 和CHI 的影響Fig.5 Effects of Ginkgo biloba peptides on the AI and CHI in hyperlipidemia mice

2.6 對(duì)小鼠血清IL-6 和TNF-α 水平的影響

IL-6 和TNF-α在炎性損傷過(guò)程中扮演著重要角色。圖6 為銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠血清IL-6 和TNF-α水平的影響。高脂模型組小鼠血清IL-6 和TNF-α水平顯著高于正常組（P＜0.05），提示高脂膳食導(dǎo)致小鼠發(fā)生了炎性損傷。與高脂模型組相比，低、中、高劑量銀杏肽組小鼠血清IL-6 水平分別降低了13.29%、21.02%、27.46%，TNF-α水平分別降低了15.12%、30.40%、43.52%，均顯著低于模型組（P＜0.05），表明銀杏肽可緩解高脂血癥小鼠的炎性損傷。與高脂模型組相比，辛伐他汀也能顯著降低小鼠血清IL-6 和TNF-α水平（P＜0.05）。高劑量銀杏肽組小鼠IL-6 和TNF-α水平與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

圖6 銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠血清IL-6 和TNF-α水平的影響Fig.6 Effects of Ginkgo biloba peptides on serum IL-6 and TNF-α levels in hyperlipidemia mice

2.7 對(duì)小鼠肝臟抗氧化能力的影響

T-AOC 反映機(jī)體的總抗氧化能力，T-SOD 在機(jī)體氧化與抗氧化平衡中扮演著重要的角色。銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠肝臟T-AOC 和T-SOD 活性的影響如圖7 所示。高脂模型組小鼠肝臟T-AOC 和T-SOD活性分別比正常組降低了34.9%和30.7%，均顯著低于正常組（P＜0.05），提示高脂膳食致高脂血癥小鼠肝臟處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。灌胃銀杏肽后，小鼠肝臟T-AOC 和T-SOD 活性顯著高于高脂模型組（P＜0.05），高劑量銀杏肽組小鼠T-AOC 和T-SOD 活性恢復(fù)至正常水平（P＞0.05），表明銀杏肽通過(guò)提高機(jī)體抗氧化能力，發(fā)揮對(duì)高脂血癥小鼠的保護(hù)作用。與高脂模型組相比，辛伐他汀也能顯著提高小鼠肝臟T-AOC 和T-SOD 活性（P＜0.05），高劑量銀杏肽組小鼠肝臟TAOC 和T-SOD 活性顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05）。

圖7 銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠肝臟T-AOC 和T-SOD活性的影響Fig.7 Effects of Ginkgo biloba peptides on T-AOC and T-SOD activities of liver tissue in hyperlipidemia mice

MDA 水平升高被認(rèn)為是機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的重要標(biāo)志。銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠肝臟MDA 水平的影響如圖8 所示。高脂模型組小鼠肝臟MDA 水平顯著高于正常組（P＜0.05），表明高脂膳食攝入造成肝組織脂質(zhì)氧化損傷。與高脂模型組相比，低、中、高劑量銀杏肽組小鼠肝臟MDA 水平分別降低了16.67%、28.07%、40.06%，均顯著低于模型組（P＜0.05），提示銀杏肽可緩解高脂膳食誘導(dǎo)的肝組織脂質(zhì)氧化損傷。與高脂模型組相比，辛伐他汀也能顯著降低小鼠肝臟MDA 水平（P＜0.05）；高劑量銀杏肽組小鼠肝臟MDA 水平顯著低于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05）。

圖8 銀杏肽對(duì)高脂血癥小鼠肝臟MDA 水平的影響Fig.8 Effects of Ginkgo biloba peptides on MDA level of liver tissue in hyperlipidemia mice

3 討論與結(jié)論

高脂膳食是引發(fā)高脂血癥的常見(jiàn)風(fēng)險(xiǎn)因素之一。高脂膳食誘導(dǎo)的高脂血癥動(dòng)物模型被廣泛用于評(píng)價(jià)受試物的輔助降血脂功能。本試驗(yàn)中，連續(xù)6 周飼喂高脂飼料造成了小鼠肥胖，肝臟指數(shù)顯著升高，脂肪表觀消化率顯著下降（P＜0.05）；血清TG、TC、LDL-C、IL-6 和TNF-α水平顯著升高，HDL-C水平顯著下降（P＜0.05）；肝臟T-AOC 和T-SOD 活性顯著降低，MDA 水平顯著升高（P＜0.05）；小鼠動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著提高（P＜0.05）。根據(jù)《輔助降血脂功能評(píng)價(jià)方法》（國(guó)食藥監(jiān)保化[2012]107 號(hào)），可判定高脂血癥小鼠造模成功。上述結(jié)果也與前人研究報(bào)道一致[14-16]。

銀杏肽干預(yù)顯著降低了高脂血癥小鼠血清TC、TG 和LDL-C 水平，升高了HDL-C 水平（P＜0.05），由此可判定銀杏肽輔助降血脂功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性。銀杏肽干預(yù)顯著降低了高脂血癥小鼠體質(zhì)量和肝臟指數(shù)（P＜0.05），這與前人研究結(jié)果一致?；鹇樽讯嚯腫17]和豬骨膠原蛋白肽[18]也能顯著降低小鼠體質(zhì)量和肝臟指數(shù)。銀杏肽干預(yù)對(duì)小鼠攝食量無(wú)顯著性影響（P＞0.05），而錢(qián)珊珊等[13]發(fā)現(xiàn)大豆活性肽顯著降低了高脂模型組小鼠的采食量，推測(cè)這與活性肽的來(lái)源和添加量等有關(guān)。銀杏肽干預(yù)顯著提高了脂肪表觀消化率（P＜0.05），可能是由于銀杏肽為兩性化合物，具有良好的乳化性，銀杏肽作為乳化劑提高了高脂血癥小鼠對(duì)高脂膳食中脂肪的消化能力。田許等[11]研究表明魚(yú)膠原蛋白肽干預(yù)也提高了高脂血癥小鼠的脂肪表觀消化率。

動(dòng)物試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)表明，IL-6、TNF-α、IL-1β、單核細(xì)胞趨化蛋白-1、C-反應(yīng)蛋白和趨化因子16 等炎性標(biāo)志物與高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生進(jìn)展密切相關(guān)[19-20]。高脂血癥患者中TNF-α與TC、TG 水平顯著正相關(guān)；TNF-α在炎癥過(guò)程與動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展過(guò)程中扮演著重要角色，TNF-α可通過(guò)激活NF-κB、STAT3 等信號(hào)通路調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖，進(jìn)而參與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生和進(jìn)展[21]。IL-6 是炎癥過(guò)程的關(guān)鍵介質(zhì)之一，可導(dǎo)致血漿C-反應(yīng)蛋白、纖維蛋白原和纖溶酶原水平升高；近年來(lái)，IL-6 被認(rèn)為是腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)標(biāo)志物和動(dòng)脈粥樣硬化治療的新靶點(diǎn)[22]。本研究結(jié)果表明，低、中、高劑量銀杏肽均能顯著降低小鼠血清IL-6 和TNF-α水平（P＜0.05），提示銀杏肽可緩解高脂膳食誘導(dǎo)的炎性損傷，通過(guò)抑制促炎細(xì)胞因子表達(dá)而發(fā)揮對(duì)高脂血癥小鼠的降脂作用，有關(guān)銀杏肽抑制IL-6 和TNF-α表達(dá)水平的信號(hào)通路有待后續(xù)進(jìn)一步研究。

大量研究表明，氧化應(yīng)激是高脂血癥發(fā)生發(fā)展的早期事件，高脂血癥患者中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶等抗氧化酶活性下降，MDA 水平升高；適當(dāng)攝入外源抗氧化劑，拮抗高脂膳食導(dǎo)致的氧化應(yīng)激，被認(rèn)為有助于高脂血癥的防治[23-25]。TAOC 水平下降被認(rèn)為是氧化應(yīng)激發(fā)生的信號(hào)[26]；脊椎動(dòng)物的T-SOD 包括Cu/Zn-SOD 和Mn-SOD 兩類(lèi)[27]；MDA 被認(rèn)為是反映機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)的重要標(biāo)志物[28]。本研究中，低、中、高劑量銀杏肽均顯著提高了高脂血癥小鼠肝臟T-AOC 和T-SOD 活性，降低了MDA 水平（P＜0.05），表明銀杏肽通過(guò)提高機(jī)體抗氧化能力，發(fā)揮對(duì)高脂血癥小鼠的降脂作用。毛瑞雪等[29]研究表明裸燕麥低聚肽可緩解血脂異常大鼠的脂代謝紊亂，其作用機(jī)制與抗氧化應(yīng)激相關(guān)，這與本研究結(jié)果一致。而李迪等[30]雖未觀察到吉林人參低聚肽對(duì)高脂血癥大鼠的輔助降血脂作用，但該肽可降低血清和肝臟MDA 水平，提高SOD 和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性。有關(guān)銀杏肽在體內(nèi)提高抗氧化酶活性所涉及的信號(hào)通路有待后續(xù)進(jìn)一步研究。

綜上所述，銀杏肽能夠降低高脂血癥小鼠體質(zhì)量、肝臟指數(shù)，降低血清TC、TG、LDL-C 水平，提高HDL-C 水平和脂肪表觀消化率，對(duì)小鼠攝食量無(wú)顯著性影響，緩解高脂膳食誘導(dǎo)的炎性損傷，提高小鼠的抗氧化能力，降低動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)果提示銀杏肽對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)的高脂血癥小鼠具有輔助降脂作用，其作用機(jī)制與提高機(jī)體抗氧化能力和抑制促炎細(xì)胞因子表達(dá)有關(guān)。