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        非小細(xì)胞肺癌組織中腫瘤壞死因子-α、細(xì)胞角蛋白19片段抗原21-1的表達(dá)與疾病分期的相關(guān)性分析

        2022-08-25 08:48:24王晨亮劉浩茹李觀華
        中國當(dāng)代醫(yī)藥 2022年20期
        關(guān)鍵詞:肺癌病理陽性

        王晨亮 張 菁 劉浩茹 李觀華

        1.江西省九江市第一人民醫(yī)院病理科,江西九江 332000;2.江西省九江市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西九江 332000

        非小細(xì)胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC) 是一種常見的發(fā)病率和死亡率極高的呼吸系統(tǒng)惡性腫瘤。因?yàn)镹SCLC 早期無特異性癥狀,一些患者在確診時(shí)已經(jīng)是晚期,早期診斷和早期治療對于改善肺癌預(yù)后尤為重要。腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是重要細(xì)胞因子參與慢性炎癥反應(yīng)的,可刺激腫瘤生長。目前有研究指出,TNF-α 的應(yīng)答基因——腫瘤壞死因子α 誘導(dǎo)蛋白2(TNF-α induced protein 2,TNFAIP2)在NSCLC 中高表達(dá),并與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移有密切的聯(lián)系。細(xì)胞角蛋白19 片段抗原(cytokeratin 19 fragment antigen,CYFRA21-1)是臨床常用的腫瘤標(biāo)志物,已有研究證實(shí)其對肺癌的診斷具有一定價(jià)值。本研究采用免疫組化法檢測TNF-α、CYFRA21-1 在癌組織中的表達(dá)情況及疾病分期的關(guān)系,并分析它們之間的相關(guān)性及意義。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2018年10月至2021年11月九江市第一人民醫(yī)院收治的60 例NSCLC 患者為研究對象。其中男34 例,女26 例;年齡31~78 歲,平均(60.12±6.40)歲;TNM 臨床分期:Ⅰ期13 例,Ⅱ期16 例,Ⅲ期19 例,Ⅳ期12 例。納入標(biāo)準(zhǔn):①符合指南中相關(guān)診斷及分期標(biāo)準(zhǔn);②符合手術(shù)指征;③患者皆自愿參與研究并簽署相關(guān)文件以示同意。排除標(biāo)準(zhǔn):①接受過放化療治療者;②合并其他惡性腫瘤者;③病理資料不全者。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審批。

        1.2 方法

        1.2.1 樣本采集 所有患者皆行手術(shù)切除NSCLC 組織。采集患者癌組織、癌旁組織(距離癌組織5 cm 以上)留作樣本,采用4%多聚甲醛固定樣本,并行常規(guī)石蠟包埋,連續(xù)切片(厚度為3 μm),進(jìn)行免疫組化標(biāo)記。

        1.2.2 免疫組化 樣本脫蠟、水化,浸泡在枸櫞酸緩沖液(0.01 mol/L、95℃)中,同時(shí)熱修復(fù),培養(yǎng)后于3%HO的環(huán)境中,10 min 后加入山羊血清封閉,在25~27℃的溫度下孵育半小時(shí),之后抽離封閉液,加入一抗,將其置于4℃的冰箱培養(yǎng)過夜,第二天加入二抗,并在恒溫箱培養(yǎng)半小時(shí)(溫度37℃),應(yīng)用PBS 沖洗2~4 次后,DAB 顯色、封片。陽性、陰性表達(dá)分別為胞漿呈清晰棕色、細(xì)胞漿無棕色或與背景著色一致。采用1000 細(xì)胞計(jì)數(shù),以陽性細(xì)胞數(shù)所占比判斷TNF-α表達(dá)分級(jí):陰性(-):≤10%;陽性(+):>10%,其中弱陽性:11%~50%,中度陽性:>50%~80%,強(qiáng)陽性:>80%。用已知陽性片作為陽性對照,用PBS 代替一抗作為陰性對照。每張切片隨機(jī)選取10 個(gè)視野,通過Image J 軟件分析CYFRA21-1 表達(dá)量。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        2 結(jié)果

        2.1 癌組織及癌旁組織中TNF-α、CYFRA21-1 表達(dá)的比較

        癌組織中TNF-α 表達(dá)陽性率及CYFRA21-1 表達(dá)水平均高于癌旁組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

        表1 癌組織及癌旁組織中TNF-α、CYFRA21-1 表達(dá)的比較

        2.2 不同病理分期TNF-α、CYFRA21-1 表達(dá)情況的比較

        病理分期Ⅲ~Ⅳ期患者的癌組織TNF-α、CYFRA21-1 表達(dá)均高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表2)。

        表2 不同病理分期TNF-α、CYFRA21-1 表達(dá)情況的比較

        2.3 不同病理分期TNF-α 表達(dá)陽性度的比較

        病理分期Ⅲ~Ⅳ患者TNF-α 的陽性表達(dá)度強(qiáng)于Ⅰ~Ⅱ患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表3)。

        表3 不同病理分期TNF-α 表達(dá)陽性度的比較[n(%)]

        2.4 TNF-α、CYFRA21-1 表達(dá)與病理分期的相關(guān)性分析

        相關(guān)性分析顯示,患者癌組織內(nèi)TNF-α 表達(dá)陽性程度、CYFRA21-1 表達(dá)水平均與病理分期呈正相關(guān)(P<0.05)(表4)。

        表4 TNF-α、CYFRA21-1 與病理分期的相關(guān)性分析

        3 討論

        肺癌是目前全球范圍內(nèi)對人類生命威脅最大的惡性腫瘤之一,關(guān)于肺癌的病因?qū)W、預(yù)防、診斷、治療已經(jīng)成為全世界的重要課題。其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,有研究指出與廚房油煙、吸煙、遺傳、不良工作環(huán)境、電離輻射、肺部慢性疾病等因素有關(guān),肺癌的病因多樣,至今尚不完全明確。持續(xù)性慢性炎癥在多種腫瘤(前列腺癌、肺癌、膀胱癌、結(jié)直腸癌等)的發(fā)生、進(jìn)展以及癌癥患者的預(yù)后中起到重要作用。TNF-α 是一種重要的多功能炎癥因子,其能夠?qū)е赂鞣N腫瘤發(fā)生出血性壞死,在腫瘤微環(huán)境中TNF-α 的促腫瘤作用已被廣泛證明,是惡性腫瘤與炎癥相互調(diào)控的中介分子之一。有研究指出,健康人群血清中往往檢測不出TNF-α 的表達(dá),然而在多種癌癥如乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌等患者血清中卻能夠檢測到很高的TNF-α水平。腫瘤患者特別是預(yù)后較差的進(jìn)展性腫瘤患者血清中TNF-α 水平明顯升高,提示TNF-α 與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切的聯(lián)系。本研究結(jié)果顯示,TNF-α 在癌旁組織基本無表達(dá),在癌組織組中表達(dá)總陽性率為90%(54/60),高于癌旁組織(P<0.05),提示TNF-α 高表達(dá)與NSCLC 發(fā)生發(fā)展有一定的聯(lián)系。且本研究結(jié)果還顯示Ⅲ~Ⅳ期患者癌組織TNF-α 表達(dá)陽性率高于Ⅰ~Ⅱ期患者癌組織,相關(guān)系分析結(jié)果指出癌組織TNF-α 表達(dá)與NSCLC 疾病病理分析呈正相關(guān)(P<0.05),提示TNF-α 表達(dá)陽性程度越高,疾病惡化程度越高,提示癌組織TNF-α 表達(dá)作為臨床對NSCLC 疾病分期輔助診斷的應(yīng)用價(jià)值。

        CYFRA21-1 主要存在于皮起源的腫瘤細(xì)胞,如食管癌、肺癌等的胞質(zhì)中,對NSCLC 的診斷有重要價(jià)值,多項(xiàng)研究中指出,NSCLC 患者中CYFRA21-1 呈現(xiàn)異常表達(dá),CYFRA21-1 水平的變化與NSCLC 的發(fā)生發(fā)展具有密切聯(lián)系。段新春等在研究中指出,檢測CYFRA21-1 表達(dá)水平能夠NSCLC 患者治療效果,CYFRA21-1 的異常表達(dá)與NSCLC 患者的預(yù)后密切相關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),NSCLC 癌組織較癌旁組織中CYFRA21-1 表達(dá)水平顯著增加,結(jié)果與既往研究吻合。本研究還對不同病理分期癌組織中CYFRA21-1 表達(dá)進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示,Ⅲ~Ⅳ期NSCLC患者CYFRA21-1 表達(dá)相對較高,結(jié)果與扈成偉等、曾漢華等研究一致,表明CYFRA21-1 與NSCLC 患者腫瘤病理分期具有一定相關(guān)性。相關(guān)性分析結(jié)果指出NSCLC 患者癌組織CYFRA21-1 表達(dá)與腫瘤病理分期呈正相關(guān)(P<0.05),提示NSCLC 癌組織CYFRA21-1 表達(dá)越高,病情越嚴(yán)重,為CYFRA21-1應(yīng)用于臨床NSCLC 病理分期的診斷提供數(shù)據(jù)支撐。本文旨在證明癌組織中TNF-α、CYFRA21-1 表達(dá)對臨床NSCLC 的鑒別及其疾病病理分期的意義,尚未對診斷效能進(jìn)行探究,本研究下一步將對兩者聯(lián)合檢測NSCLC 的診斷效能進(jìn)行研究,以期為TNF-α、CYFRA21-1 檢測作為臨床輔助診斷的推廣應(yīng)用,提供理論及數(shù)據(jù)支撐。

        綜上所述,NSCLC 癌組織中TNF-α、CYFRA21-1呈現(xiàn)異常高表達(dá),并與疾病病理分期具有一定相關(guān)性,與NSCLC 發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

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