陳童 玉山江

（新疆畜牧科學(xué)院畜牧研究所 830011)

薩?？巳庋蚴悄壳笆澜缟现膬?yōu)良肉用品種，具有體格大、體質(zhì)強(qiáng)壯、性成熟早、繁殖率高、產(chǎn)肉性能好、生長快、適應(yīng)性強(qiáng)及雜交效果好等特點，是良好的雜交父本。但良種薩?？斯驍?shù)量有限，僅靠其自然繁殖無法滿足本地羊雜交改良需要。因此，為了提高供體羊利用率，發(fā)揮優(yōu)良品種生產(chǎn)性能，追求更高的經(jīng)濟(jì)效益，在經(jīng)過第一次超排處理后，間隔一定時間對母羊再次進(jìn)行超排處理。本試驗對薩?？巳庋蜻M(jìn)行第一次和第二次超排處理，胚胎移植技術(shù)進(jìn)行研究，以降低良種繁殖、養(yǎng)殖成本，提高經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料和方法

1.1 供體羊選擇

選擇身體健康、膘情中上等、無遺傳和繁殖疾病、健康狀況良好的年齡在2～5 周歲的黑頭薩?？四秆?，在超排前兩個月加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，并進(jìn)行必要的防疫、檢疫和驅(qū)蟲工作。

1.2 受體羊選擇

本地土種羊均為經(jīng)產(chǎn)母羊，生殖系統(tǒng)正常，空胎，體重在45kg 以上。

1.3 藥物選擇

促卵泡激素(FSH)，浙江省寧波市激素制品廠生產(chǎn)，凍干粉末，安瓿包裝，規(guī)格100IU/安瓿，4℃冰箱保存，用前用10mL 生理鹽水稀釋。促黃體素(LH)，浙江省寧波市激素制品廠生產(chǎn)，凍干粉末，安瓿包裝，規(guī)格每安瓿200IU/，4℃冰箱保存，用前用2mL 生理鹽水稀釋。氯前列烯醇(PGF2a)，浙江省寧波市激素制品廠生產(chǎn)，規(guī)格為每支0.2mg/2mL。CIDR 和孕酮海綿陰道栓，進(jìn)口。

2 方法

2.1 供受體母羊的管理

供、受體母羊均經(jīng)2～3 個情期觀察，發(fā)情正常，并進(jìn)行編號，實行分群飼養(yǎng)管理。

2.2 供受體母羊的分組

供體羊采用第二情期超排和埋栓超排兩套方案。受體母羊均埋入孕酮栓，供受體母羊相互對應(yīng)，按照1:6 進(jìn)行數(shù)量分配（即1 只供體，配6 只受體）。

2.3 供體羊超排

2.3.1 第二情期超排

自然發(fā)情供體羊從發(fā)情后的第12～13 天開始用FSH 進(jìn)行超排，以遞減劑量連續(xù)注射3d，共6 次，每次間隔12h，F(xiàn)SH 總劑量為180IU/只。當(dāng)FSH 注射到第5 和第6 針時分別注射1次PGF2a，0.lmg/只，促其發(fā)情。

2.3.2 埋栓處理

沒有自然發(fā)情的供體進(jìn)行埋栓處理，埋栓后第9 天用FSH進(jìn)行超排處理，以遞減劑量連續(xù)注射3d，共6 次，每次間隔12h，F(xiàn)SH 總劑量為180IU/只。當(dāng)FSH 注射第5 針時撤栓，同時注射1 次PGF2a，0.lmg/只，撤栓后用生理鹽水沖洗陰道，注射第6 針FSH 時再注射1 次PG，0.lmg/只。

2.4 供體羊的發(fā)情及配種

供體羊采取公羊試情法進(jìn)行發(fā)情鑒定。發(fā)情同時肌肉注射LH，120IU/只。發(fā)情后12h、24h 分別進(jìn)行兩次配種，配種均以公羊本交的方式進(jìn)行。

2.5 胚胎的回收及鑒定

供體羊從第一次配種的時間開始計算，65～72h 后采用輸卵管采胚法回收胚胎，在術(shù)前24h 開始禁飼[1]。刮毛、清洗消毒完全后打開腹腔，牽拉出子宮和卵巢，對黃體進(jìn)行計數(shù)，將沖胚管一端由輸卵管傘部喇叭口插入約2cm 左右深處（打活結(jié)或用手指捏緊固定），另一側(cè)接集卵皿。用注射器吸取37℃地沖卵液5mL，在子宮角靠近輸卵管的部位，將針頭朝輸卵管方向扎入，一只手的手指在針頭后方捏緊子宮角，另一只手推注射器，沖卵液由宮管結(jié)合部流入輸卵管，經(jīng)輸卵管流入集卵皿?；厥盏呐咛ジ鶕?jù)形態(tài)特征分為A，B，C，D 4 個等級[2]，A,B級胚胎作為可用胚，用于鮮胚移植。

2.6 受體羊移植

受體羊卵巢必須有正常黃體存在，無黃體或黃體過小的受體不用于移植。且受體羊與供體羊發(fā)情同步差不能超過12h。移植位置與胚胎回收位置相對應(yīng)[3]。

3 結(jié)果與分析

百分?jǐn)?shù)之間的比較采用卡方檢驗。平均數(shù)之間的比較采用T 檢驗。

3.1 首次超排與二次超排各項指標(biāo)比較

由表1 可知，首次超排和二次超排處理的供體羊平均黃體數(shù)和胚胎可用率差異不顯著(p＞0.05)；但二者胚胎回收率差異顯著（p＜0.05），說明超排處理對首次超排和二次超排的超排效果沒有影響，但由于第二次超排的供體羊存在輸卵管傘或輸卵管粘連的情況，可能會造成回收率降低。

表1 首次超排與二次超排對超排效果的影響

3.2 第二情期超排處理各項指標(biāo)比較

由表2 可知，首次超排和二次超排處理后的胚胎回收率分別為93.1%和80.5%，兩者差異顯著（p＜0.05）。二者可用率分別為89.0%和88.4%，差異不顯著(p＞0.05)。利用第二情期超排處理沒有造成二者黃體數(shù)的明顯差異。

表2 第二情期超排處理對超排效果的影響

3.3 埋栓超排處理各項指標(biāo)比較

由表3 可知，首次超排和二次超排處理的供體羊胚胎回收率分別為84.4%和76.3%，兩者差異顯著（p＜0.05）。二者可用率分別為86.9%和88.9%，差異不顯著(p＞0.05)。埋栓超排處理沒有對二者黃體數(shù)造成顯著差異。

表3 埋栓超排處理對超排效果的影響

4 討論

（1）重復(fù)超排使優(yōu)質(zhì)供體羊的利用率大幅增加，但不可避免的粘連情況使回收率明顯降低，粘連嚴(yán)重者只能淘汰。

（2）輸卵管法回收胚胎對母羊造成的損傷較大，極易造成粘連，這可能因為輸卵管是生殖系統(tǒng)中比較纖細(xì)的一段，手術(shù)中需將整個輸卵管連同卵巢拉出腹腔，術(shù)中易造成卵巢、輸卵管等組織損傷。

（3）在沖胚過程中，總結(jié)出手術(shù)沖胚時手術(shù)處周圍羊毛要刮凈，嚴(yán)格消毒，以防產(chǎn)生炎癥；沖胚時手術(shù)動作要輕、要細(xì)致，防止輸卵管、輸卵管傘及其他部位出血，造成粘連、堵塞；手術(shù)時用生理鹽水加入青霉素和鏈霉素沖洗傷口和血液，沖胚結(jié)束后用普魯卡因油劑青霉素涂抹子宮、卵巢及輸卵管防止發(fā)生粘連。只要手術(shù)規(guī)范，一般不至于發(fā)生粘連，可反復(fù)使用，節(jié)約成本。