李小琴，余廣蘭

（宜賓市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，四川宜賓 644000）

急性缺血性腦卒中(acute ischemic stroke, AIS)是一種常見腦血管疾病，具有發(fā)病急、進展快及預后差等特點，對患者生命健康造成嚴重威脅[1-2]。目前AIS 的相關醫(yī)療技術已經(jīng)獲得較大發(fā)展，但患者經(jīng)治療后發(fā)生預后不良情況的比例仍較高[3]。因此，尋找良好的早期評估AIS 患者預后的生物標志物并指導臨床治療，對改善預后具有重要臨床意義。陷窩蛋白-1(caveolin-1, Cav-1)是一種參與構成陷窩的重要膜蛋白，其在炎性介質(zhì)釋放、動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性、血腦屏障的完整性及神經(jīng)保護功能等腦血管病的病理生理學過程中發(fā)揮著重要作用[4-5]。生長分化因子-15(growth differentiation factor-15,GDF-15)是一種應激反應蛋白，具有抗炎、促凋亡作用，還可參與缺血再灌注過程，在神經(jīng)缺損功能評價中具有重要臨床價值[6]。影響AIS 發(fā)生發(fā)展的因素較多，聯(lián)合多個生物學指標對其預后進行評估可能具有更好的效果。本研究探討血清Cav-1，GDF-15 水平與AIS 患者預后的關系，為AIS 早期預后評估提供指導。

1 材料和方法

1.1 研究對象 選擇2019年2月～2021年6月宜賓市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的156 例AIS 患者作為研究對象。納入標準：年齡≥18 歲；均符合AIS 診斷標準[7]；均經(jīng)頭顱CT 或MRI 證實；均是首次腦卒中發(fā)作；發(fā)病24h 內(nèi)入院。排除標準：①既往有腦卒中史；②并發(fā)腦外傷者；③頭顱惡性腫瘤或其他部位惡性腫瘤腦轉(zhuǎn)移者；④存在出血性傾向者；⑤存在心、肝、腎等重要臟器功能不全者；⑥入組前接受過抗凝、抗血栓治療者；⑦資料不完整者。156 例AIS 患者中男性86 例，女性70 例，平均年齡58.42±8.75 歲；另選取同期醫(yī)院體檢健康者60 例作為對照組，男性35 例，女性25 例，平均年齡58.42±8.75 歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05)。根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(National Institutes of Healt h Stroke Scale, NIHSS)評分結果分組：NIHSS ＜5分者納入輕度組，共46 例； NIHSS 5 ～15 分者納入中度組，共76 例；NIHSS ＞15 分納入重度組，共34 例。根據(jù)入院時腦梗死面積分組：梗死最大直徑＜1.5cm 者納入腔隙性梗死組（n=41），梗死最大直徑1.5 ～5cm 者納入中等面積腦梗死組（n=75），梗死最大直徑＞5cm 者納入大面積腦梗死組（n=40）。根據(jù)出院3 個月隨訪改良Rankin量表(modified Rankin Scale, mRS)評分分組：mRS≤2 分者納入預后良好組，共92 例；mRS ＞2 分者納入預后不良組，共64 例。本研究經(jīng)醫(yī)院道德倫理委員會批準通過，所有樣品采集均取得患者及家屬知情同意并簽字。

1.2 儀器與試劑 Cav-1，GDF-15 檢測試劑盒購自美國MyBioSource 公司。

1.3 方法 患者入組后清晨空腹抽取外周肘靜脈血約5 ml，3 000r/min 離心 10min，取上層血清于-80℃凍存待用。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢查血清Cav-1 和GDF-15 水平，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學分析 應用SPSS22.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料采用均數(shù)±標準差(±s)進行描述，兩組比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，進一步兩兩比較用LSD-t檢驗；采用Pearson 相關分析AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平與NIHSS 評分、腦梗死面積、mRS 評分的相關性；采用MedCalc v9.2.0.1 軟件繪制血清Cav-1，GDF-15 水平的受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve, ROC)，比較曲線下面積(area under curve, AUC)，評估其對預后的預測價值。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 觀察組和對照組血清Cav-1，GDF-15 水平比較 觀察組血清Cav-1（22.78±4.54 ng/ml），GDF-15（790.90±76.75 pg/ml）水平高于對照組（8.51±2.52 ng/ml, 410.51±37.58 pg/ml），差異均有統(tǒng)計學意義(t=22.997, 36.699，均P＜0.05)。

2.2 不同神經(jīng)缺損程度AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平比較 見表1。重度組患者血清Cav-1，GDF-15 水平高于輕、中度組(t=8.512，6.632，4.958，2.798,均P＜0.05)；中度組患者血清Cav-1，GDF-15 水平高于輕度組(t=7.529，7.855,均P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學意義。

表1 不同神經(jīng)缺損程度AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平比較(±s)

表1 不同神經(jīng)缺損程度AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平比較(±s)

項目重度組(n=34)中度組(n=76)輕度組(n=46)FP Cav-1(ng/ml)26.95±5.0823.22±2.7918.97±3.2950.6670.000 GDF-15(pg/ml)839.82±96.62806.82±52.01728.45±54.7033.8470.000

2.3 不同梗死面積AIS 患者血清Cav-1，GDF-15水平比較 見表2。大面積梗死組患者血清Cav-1，GDF-15 水平高于中等面積梗死組和腔隙性梗死組(t=5.936，3.820，9.011，8.179, 均P＜0.05)；中等面積梗死組患者血清Cav-1，GDF-15 水平高于腔隙性梗死組(t=6.821，8.602,均P＜0.05)。

表2 不同梗死面積AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平比較(±s)

表2 不同梗死面積AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平比較(±s)

項目大面積梗死組(n=40)中等面積梗死組(n=75)腔隙性梗死組(n=41)FP Cav-1(ng/ml)26.91±4.6722.66±2.9818.95±3.1551.5500.000 GDF-15(pg/ml)847.38±84.92800.64±46.49717.99±54.5648.1550.000

2.4 不同預后AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平比較 預后不良組血清Cav-1（25.88±3.69 ng/ml），GDF-15（828.52±74.32 pg/ml）水平高于預后良好組(20.62±3.77 ng/ml,764.74±67.25 pg/ml),差異均有統(tǒng)計學意義(t=8.658, 5.579, 均P＜0.05)。

2.5 AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平與NIHSS 評分、腦梗死面積、mRS 評分的相關性分析 Pearson 相關分析顯示，AIS 患者血清Cav-1，GDF-15水平與NIHSS 評分、腦梗死面積、mRS 評分呈正相關(rCav-1=0.715，0.628，0.583；rGDF-15=0.593，0.496，0.629，均P＜0.05)。

2.6 血清Cav-1，GDF-15 水平對AIS 患者預后的預測價值分析 見表3。血清Cav-1，GDF-15 水平AIS 患者預后預測的曲線下面積(AUC)分別為0.847(95%CI=0.783～0.912)和0.785 (95%CI =0.708～0.861)。運用最佳閾值計算的敏感度分別為82.8%和78.1%，特異度分別為84.8%和78.3%。血清Cav-1 與GDF-15 聯(lián)合檢測對AIS 患者預后預測的AUC 為0.910(95%CI=0.864～0.956)，敏感度和特異度分別為87.6%和80.1%。血清Cav-1+GDF-15 的AUC 顯著高于血清Cav-1，GDF-15 (Z=5.396，7.853；P=0.002，0.000)。

表3 血清Cav-1，GDF-15 水平對AIS 患者預后的預測價值

3 討論

急性缺血性腦卒中（AIS）是由于腦的供血動脈狹窄或閉塞、腦供血不足導致的腦組織壞死，具有高致殘率、高復發(fā)率及高病死率等特點，對人類健康造成嚴重影響[8]。研究報道，AIS 患者經(jīng)治療后致殘率仍有50%左右，病死率仍有10%左右[9]。對AIS 患者預后進行有效地評估并制定針對性治療方案，可有效改善預后。研究報道，炎癥反應在AIS 的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色，可對AIS 患者的預后產(chǎn)生影響[10]。因此，早期通過檢測AIS 患者血清相關細胞因子水平可對患者病情及預后進行有效評估。

Cav-1 是細胞陷窩的主要組成部分，在腦組織內(nèi)主要在神經(jīng)膠質(zhì)細胞、神經(jīng)內(nèi)皮細胞及神經(jīng)元上表達，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)參與調(diào)控氧化應激反應、自由基形成、炎癥反應及血腦屏障滲出，還能促進神經(jīng)元突觸再生及髓鞘修復[11-12]。研究報道，在缺血/再灌注小鼠模型中，敲除Cav-1 蛋白的小鼠的基質(zhì)金屬蛋白的表達高于未敲除的小鼠，緊密連接蛋白的表達低于未敲除的小鼠，敲除Cav-1 蛋白的小鼠再表達Cav-1 蛋白后基質(zhì)金屬蛋白表達下降，緊密連接蛋白表達升高，表明了Cav-1 蛋白可通過對緊密連接蛋白及基質(zhì)金屬蛋白的調(diào)控，從而起到保護血腦屏障的作用[14]。研究報道，Cav-1 可通過調(diào)控VEGF/bFGF/CD34 通路促進血管內(nèi)皮細胞增殖及遷移，促進微血管形成[15]。王晉雁等[16]研究報道，AIS 患者血清Cav-1 高表達，且與梗死體積呈正相關。本研究結果顯示，觀察組血清Cav-1水平高于對照組(P＜0.05)；不同神經(jīng)缺損程度AIS 患者血清Cav-1 水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；不同梗死面積AIS 患者血清Cav-1 水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；Pearson 相關分析顯示，AIS 患者血清Cav-1 水平與NIHSS 評分、腦梗死面積呈正相關(P＜0.05)。結果表明，血清Cav-1 水平與AIS 密切相關，其水平可反映疾病嚴重程度。AIS 屬于腦部血管性病變疾病，當腦梗死程度或面積更大，神經(jīng)細胞因缺血缺氧造成損傷或壞死情況越嚴重，腦部炎癥反應、血管病變程度越嚴重，血腦屏障內(nèi)皮組織上的Cav-1 表達上升，對血腦屏障發(fā)揮保護作用。

GDF-15 是轉(zhuǎn)化生長因子β-超家族的成員之一，是一種應激反應蛋白[17]。GDF-15 具有調(diào)控炎癥反應、免疫應答和細胞凋亡、修復及生長等多種生物學功能[18]。在正常生理條件下，GDF-15 僅在胎盤和前列腺中高表達，而在其他臟器及組織中低表達，但當肝、心臟及神經(jīng)系統(tǒng)等臟器受炎癥和缺氧等應激后，GDF-15 表達明顯上升。研究報道，GDF-15 與動脈僵硬、動脈粥樣硬化、內(nèi)皮功能障礙等心腦血管疾病密切相關[19]。王小雯等[20]研究報道，血清GDF-15 水平隨AIS 患者病情程度的變化而上升，可作為AIS 患者病情嚴重程度及預后評估的生物學標志物。張茜等[21]研究報道，AIS患者血清GDF-15 水平顯著高于健康對照組，且與NIHSS 評分呈正相關，血清GDF-15 水平越高患者預后越差。本研究結果顯示，觀察組血清GDF-15 水平高于對照組(P＜0.05)；不同神經(jīng)缺損程度AIS 患者血清GDF-15 水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；不同梗死面積AIS 患者血清GDF-15水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；Pearson 相關分析顯示，AIS 患者血清GDF-15 水平與NIHSS評分、腦梗死面積呈正相關(P＜0.05)。結果表明，血清GDF-15 水平與AIS 的發(fā)生發(fā)展密切相關。

AIS 發(fā)生過程中會造成血腦屏障破壞，產(chǎn)生炎癥反應會進一步損傷腦組織。研究報道，炎癥細胞因子的表達水平與AIS 患者預后密切相關，且AIS的預后與多個炎性細胞因子相關[22]。尹克金等[23]研究報道，AIS 患者預后不良組血清Cav-1 水平顯著高于預后良好組。周靜等[24]研究報道，AIS 患者預后不良組血清GDF-15 水平顯著高于預后良好組。本研究結果顯示，預后不良組血清Cav-1，GDF-15 水平高于預后良好組(P＜0.05)；Pearson相關分析顯示，AIS 患者血清Cav-1，GDF-15 水平與mRS 評分呈正相關(P＜0.05)。結果提示，血清Cav-1，GDF-15 水平與AIS 患者預后密切相關。本研究通過ROC 曲線分析血清Cav-1，GDF-15 水平對AIS 患者預后的預測價值，結果顯示，血清Cav-1，GDF-15 水平及兩者聯(lián)合檢測對AIS 患者預后預測的AUC 分別為0.847，0.785 和0.910，聯(lián)合檢測預測預后的AUC 顯著高于血清Cav-1 和GDF-15 單獨檢測，且敏感度和特異度均較高。結果表明，血清Cav-1 和GDF-15 檢測對AIS 患者預后具有較高的預測價值，兩者聯(lián)合檢測對AIS 患者預后的預測效能更高。因此，血清Cav-1 和GDF-15 水平較高的AIS 患者需予以針對性的治療，最大限度地避免不良預后的發(fā)生。

綜上所述，AIS 患者急性期血清Cav-1 和GDF-15 水平顯著升高，且與病情嚴重程度及預后密切相關，早期聯(lián)合檢測可作為臨床評估病情及判斷預后的重要生化標志物。