劉凱月，王湘閩，陳肖英，賴志勇

深圳市深業(yè)航天食品與環(huán)境檢測(cè)科技有限公司（深圳 518000）

石斛屬（DendrobiumSW.）為蘭科第二大屬，種質(zhì)資源豐富。道家經(jīng)典著作《道藏》將其列為“中華九大仙草之首”。我國(guó)的石斛屬植物有74種2變種[1]，其中藥用石斛就有39種，含有多種藥效成分，是一種“藥食同源”的植物[2]。

傳統(tǒng)石斛質(zhì)量的評(píng)價(jià)多以感官和形態(tài)為主，即以“莖粗、質(zhì)重、嚼之粘牙、味苦、無(wú)渣”作為評(píng)價(jià)石斛品質(zhì)的主要標(biāo)準(zhǔn)，但這一方法并不能完全體現(xiàn)其內(nèi)在品質(zhì)的優(yōu)劣。2015版《中國(guó)藥典》規(guī)定了鐵皮石斛多糖和醇溶性浸出物含量標(biāo)準(zhǔn)，以此作為評(píng)價(jià)鐵皮石斛品質(zhì)的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。隨著現(xiàn)代研究技術(shù)的快速發(fā)展，石斛的化學(xué)成分[3-5]和藥理活性[6-9]的研究越來(lái)越廣泛。但是在以往的研究中，對(duì)不同石斛品種間比較的研究較多，對(duì)不同栽培方式的石斛品質(zhì)影響比較少，也沒(méi)有形成系統(tǒng)的石斛栽培方式對(duì)質(zhì)量影響的評(píng)價(jià)體系。因此，此次試驗(yàn)針對(duì)常規(guī)種植的鐵皮石斛楓斗、巖壁野化鐵皮石斛楓斗、貼樹(shù)仿野生鐵皮石斛楓斗及其花茶不同栽培方式，測(cè)定其主要活性成分含量并分析多糖，進(jìn)行差異性比較。以便為不同栽培方式石斛及其花茶的質(zhì)量評(píng)價(jià)以及開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用到的鐵皮石斛及花茶樣品均來(lái)自同一公司。

1.2 試劑和儀器

葡萄糖對(duì)照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；甘露糖對(duì)照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；蘆丁對(duì)照品（Dr. Ehrenstorfer GmbH）；乙醇（AR，國(guó)藥集團(tuán)試劑有限公司）；苯酚（AR，廣州化學(xué)試劑廠）；硫酸（AR，國(guó)藥集團(tuán)試劑有限公司）；乙腈（HPLC，CNW）；乙酸銨（HPLC，CNW）。

SX2-4-10TP馬弗爐（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；HWS24電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；FA1104天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；UV-1800PC紫外分光光度計(jì)（上海翱藝科學(xué)儀器有限公司）；Ultimate 3000液相色譜儀（Thermo fisher）。

1.3 活性成分測(cè)定

1.3.1 浸出物含量測(cè)定

浸出物的測(cè)定參考2015年版《中國(guó)藥典》[10]中的熱浸法。

1.3.2 多糖含量測(cè)定

多糖含量測(cè)定參考2015年版《中國(guó)藥典》[10]中的方法。

1.3.3 總黃酮含量的測(cè)定

總黃酮含量的測(cè)定參考SN/T 4592—2016《出口食品中總黃酮的測(cè)定》[11]。

1.4 多糖結(jié)構(gòu)的測(cè)定

1.4.1 甘露糖與葡萄糖峰面積比測(cè)定

取不同石斛樣品多糖水解液，采用液相色譜儀進(jìn)行甘露糖與葡萄糖的峰面積比測(cè)定。

液相色譜儀條件：色譜柱：C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL/min；流動(dòng)相：乙腈∶0.02 mol/L的乙酸銨溶液（20∶80，V/V）；檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：250 nm。記錄甘露糖色譜峰與葡萄糖色譜峰，并計(jì)算甘露糖的峰面積與葡萄糖峰面積的比值。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同栽培方式石斛楓斗及花茶的浸出物含量分析

浸出物含量在一定程度上可以反映藥材質(zhì)量，2015年《中華人民共和國(guó)藥典》將其作為評(píng)價(jià)石斛品質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)之一。從表1可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛楓斗，醇溶浸出物存在差異，其中巖壁野化鐵皮楓斗醇溶浸出物含量最高，該常規(guī)養(yǎng)殖的鐵皮石斛試樣醇溶浸出物含量最低，2015版《中國(guó)藥典》規(guī)定，鐵皮石斛中醇溶性浸出物含量不得低于6.5%。故該供試品鐵皮石斛楓斗不符合《中國(guó)藥典》規(guī)定。不同栽培方式石斛楓斗的醇溶性浸出物含量從大到小排序?yàn)閹r壁野化鐵皮石斛楓斗＞貼樹(shù)仿野生鐵皮石斛楓斗＞鐵皮石斛楓斗。

從表1可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛花茶，水溶浸出物差異不大，不同栽培方式石斛花茶的水溶性浸出物含量從大到小排序?yàn)閹r壁野化鐵皮石斛花茶＞鐵皮石斛花茶＞貼樹(shù)仿野生鐵皮石斛花茶。

表1 不同栽培方式石斛浸出物含量表

2.2 不同栽培方式石斛楓斗及花茶的多糖含量分析

石斛中所含有的大量多糖物質(zhì)是石斛的主要功能成分之一，在調(diào)節(jié)免疫力、降血糖、抗氧化、抗衰老等方面發(fā)揮著重要的作用。從表2可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛，多糖存在差異，其中樹(shù)栽仿野生鐵皮楓斗多糖含量最高，巖壁野化鐵皮楓斗試樣多糖含量最低。不同栽培方式石斛楓斗的多糖含量從大到小排序?yàn)橘N樹(shù)仿野生鐵皮石斛楓斗＞鐵皮石斛楓斗＞巖壁野化鐵皮石斛楓斗。

表2 不同栽培方式石斛楓斗及花茶的多糖含量表

從表2可以看出，三種不同方式栽培的鐵皮石斛花茶，多糖含量存在差異，不同栽培方式石斛花茶的多糖含量從大到小排序?yàn)椋嘿N樹(shù)仿野生鐵皮石斛花茶＞鐵皮石斛花茶＞巖壁野化鐵皮石斛花茶。

2.3 不同栽培方式石斛的甘露糖與葡萄糖峰面積比分析

如表3所示，不同品種石斛多糖的甘露糖和葡萄糖含量差異不大?！吨袊?guó)藥典》規(guī)定，鐵皮石斛多糖的甘露糖與葡萄糖峰面積比應(yīng)在2.4～8.0之間。表3顯示，3種石斛樣品甘露糖與葡萄糖峰面積比值均不高，但符合藥典規(guī)定。

表3 不同栽培方式石斛的甘露糖與葡萄糖峰面積比

2.4 不同栽培方式石斛花茶的黃酮含量分析

研究表明，石斛中含有的黃酮類物質(zhì)具有良好的抗氧化[12]作用和抗腫瘤[13]作用。從表4可以看出，3種石斛花茶樣品的黃酮含量在0.61%～1.08%之間，其中巖壁野化鐵皮石斛花茶的黃酮含量（1.08%）最高，貼樹(shù)仿野生鐵皮石斛花茶黃酮含量（0.61%）最低，均高于不同品種鐵皮石斛中黃酮含量[14]。

表4 不同栽培方式石斛花茶的黃酮含量

3 結(jié)論

對(duì)不同栽培方式石斛及花茶活性成分含量和多糖進(jìn)行比較分析，可知不同栽培方式間品質(zhì)差異明顯。因石斛中活性成分復(fù)雜多樣，故不能以單個(gè)成分含量的高低來(lái)判斷其品質(zhì)的好壞。水溶性浸出物中含有的活性物質(zhì)主要是水溶性多糖，醇溶性浸出物中的活性物質(zhì)有黃酮和石斛堿等。生巖壁野化鐵皮楓斗醇溶浸出物較高但其多糖含量并不高，所以可以推斷浸出物中除了含有以往研究中的一些活性成分外，還有其他成分的存在。浸出物含量的高低并不能絕對(duì)代表石斛品質(zhì)的優(yōu)劣。研究表明，多糖和黃酮含量常被用作評(píng)價(jià)石斛品質(zhì)的重要標(biāo)準(zhǔn)，樹(shù)栽仿野生、巖壁野化栽培斗均優(yōu)于常規(guī)栽培鐵皮石斛，其花茶與其保持一致，且花茶的黃酮含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于石斛的黃酮含量，抗氧化效果更好。