張躍

商河縣人民醫(yī)院病理科，山東商河 251600

子宮內(nèi)膜癌（endometrial carcinoma,EC）是發(fā)生在子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，多見(jiàn)于絕經(jīng)后或圍絕經(jīng)期女性，其發(fā)病率位列婦科惡性腫瘤的第2位，而病死率僅次于宮頸癌與卵巢癌，為第3位，嚴(yán)重危及女性的健康與生命安全[1]。目前，病理學(xué)是診斷EC的金標(biāo)準(zhǔn)，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，EC的形成、進(jìn)展、預(yù)后不僅與體內(nèi)雌、孕激素水平有關(guān)，也與原癌基因異常激活與細(xì)胞異常增殖密切相關(guān)[2-3]。為進(jìn)一步完善EC患者的診療方案，2020年8月—2021年7月2.商河縣人民醫(yī)院對(duì)52例患者病灶組織內(nèi)孕激素受體(PR)、雌激素受體(ER)、表皮生長(zhǎng)因子受體2(CerbB-2)、增殖細(xì)胞核抗原67(Ki-67)表達(dá)情況進(jìn)行測(cè)定，并分析與病理的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的52例EC患者作為研究組，年齡33~70歲，平均（50.45±7.52）歲；產(chǎn)次0~5次，平均（2.60±0.80）次；32例絕經(jīng)，20例未絕經(jīng)；國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(Federation International o f Gynecology and Ob‐stetr,FIGO)分期為Ⅰ期18例，Ⅱ期12例，Ⅲ期14例，Ⅳ期8例；分化程度為高分化15例，中分化13例，低分化24例；20例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，32例無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；25例肌層浸潤(rùn)程度<1/2，27例肌層浸潤(rùn)程度≥1/2。另選擇同期于本院行手術(shù)切除或刮宮的48例子宮內(nèi)膜不典型增生患者作為對(duì)照組，年齡34~72歲，平均（50.39±8.50）歲；產(chǎn)次0~5次，平均（2.62±0.65）次；30例絕經(jīng)，18例未絕經(jīng)。兩組患者年齡、產(chǎn)次、絕經(jīng)情況等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究方案取得商河縣人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)?；颊吲c其家屬均知情同意。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《婦產(chǎn)科學(xué)》9版[4]中對(duì)EC與子宮內(nèi)膜不典型增生的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病理檢查證實(shí)；本研究已向患者與其家屬進(jìn)行充分告知。排除標(biāo)準(zhǔn)：近3個(gè)月內(nèi)接受過(guò)雌、孕激素治療者；有放療或化療史；患有精神疾病者。

1.3 方法

檢測(cè)兩組患者病灶組織中的ER、PR、Ki-67、CerbB-2表達(dá)情況。選用上海超研生物科技術(shù)有限公司提供的即用型單克隆抗體ER、PR試劑，以及CerbB-2試劑盒、Ki-67試劑盒。通過(guò)40 g/L的甲醛對(duì)樣本固定1 d以上，石蠟包埋，4μm厚度連續(xù)切片，脫蠟至水，以3%過(guò)氧化氫溶液溫孵育，時(shí)間為10 min，水洗，通過(guò)7.4pH值的0.01 mol/L的乙二胺四乙酸熱修復(fù)，室溫水洗，在0.05 mol/L的磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution,PBS）中浸泡5 min，以血清A封閉。采用蘇木精-伊紅與免疫組化染色。行免疫組化S-P檢測(cè)，加入一抗1：50的ER、PR、CerbB-2與Ki-67工作液，置入冰箱內(nèi)存放過(guò)夜，完成后恢復(fù)室溫。通過(guò)PBS 3次，5 min/次，加入二抗孵育35 min，溫度控制在37℃，PBS3次，5 min/次，以二氨基聯(lián)苯胺顯色5 min，水洗，行蘇木素比較染色10 min，30 min后水洗反藍(lán)，最后脫水封片。

1.4 觀察指標(biāo)

①根據(jù)《婦產(chǎn)科診斷病理學(xué).第2版》[5]中標(biāo)準(zhǔn)，比較兩組患者病灶組織中雌激素受體(estrogen re‐ceptor,ER)、孕激素受體(progesterone receptor,PR)、增殖細(xì)胞核抗原67(proliferating cell nuclear antigen,Ki-67)、表皮生長(zhǎng)因子受體2(epidermal growth factor receptor 2,C-erbB-2)陽(yáng)性表達(dá)率。Ki-67、ER、PR陽(yáng)性表達(dá)在細(xì)胞核分布，呈黃色；C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)在細(xì)胞膜分布，呈棕黃色。陽(yáng)性細(xì)胞<10%為陰性，10%~25%為弱陽(yáng)性，26%~50%為陽(yáng)性，>50%為強(qiáng)陽(yáng)性。陽(yáng)性率=（陽(yáng)性例數(shù)+強(qiáng)陽(yáng)性例數(shù)）/總例數(shù)×100.00%。②比較不同臨床病理特征（病理分期、肌層浸潤(rùn)程度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況）研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)情況。③針對(duì)研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)與不同臨床病理特征進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

通過(guò)SPSS23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料[n(%)]表示，組間差異比較采用χ2檢驗(yàn)，以Spearman進(jìn)行數(shù)據(jù)相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者病灶組織中ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比

研究組ER、PR陽(yáng)性表達(dá)率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者病灶組織中ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比[n(%)]

2.2 不同臨床病理特征研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)情況

研究組EC患者病理分期Ⅲ~Ⅳ期、肌層浸潤(rùn)程度≥1/2、中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的ER與PR陽(yáng)性表達(dá)率低于Ⅰ~Ⅱ期、肌層浸潤(rùn)程度<1/2、高分化與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組EC患者病理分期Ⅲ~Ⅳ期、肌層浸潤(rùn)程度≥1/2、中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的Ki-67與C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)率高于Ⅰ~Ⅱ期、肌層浸潤(rùn)程度<1/2、高分化與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同臨床病理特征研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)情況[n(%)]

2.3 研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)與不同臨床病理特征的相關(guān)性分析

經(jīng)Spearman相關(guān)性分析顯示，ER、PR與EC患者病理分期、肌層浸潤(rùn)程度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)性（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)與EC患者病理分期、肌層浸潤(rùn)程度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)性（P<0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

EC是女性常見(jiàn)的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，每年約20萬(wàn)新發(fā)病例，近年來(lái)隨著我國(guó)生活水平的改善，該病發(fā)病率也逐年攀升，給女性的健康與生命安全帶來(lái)嚴(yán)重影響[6]。目前，如何通過(guò)有效的措施保障EC患者的診療質(zhì)量已成為臨床病理學(xué)者研究的重點(diǎn)[7]。

孕激素與雌激素均為人體重要的調(diào)節(jié)物質(zhì)，主要存在于女性生殖道內(nèi)，其中子宮、陰道、垂體組織中存在大量激素受體[8]。EC屬于激素依賴(lài)性疾病，當(dāng)細(xì)胞癌變后患者生殖道內(nèi)雌孕激素受體形成與作用，隨著病情不斷進(jìn)展，激素受體則不斷降低，甚至消失[9-10]。Ki-67是存在于組織增殖基因中的核蛋白，主要在10號(hào)染色體上進(jìn)行基因定位，其半衰期較短，一旦脫離增殖周期就快速降解，是檢測(cè)腫瘤增殖活性的可靠指標(biāo)[11-12]。C-erbB-2的表皮因子受體與結(jié)構(gòu)相近，是17號(hào)染色體的蛋白基因[13]。研究發(fā)現(xiàn)，C-erbB-2升高說(shuō)明腫瘤侵襲作用更強(qiáng)，這可能與腫瘤進(jìn)展、形成及預(yù)后有關(guān)[14]。陳菁[15]對(duì)154例EC患者進(jìn)行病灶組織檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)本組ER、PR陽(yáng)性率53.2%、44.2%低于子宮內(nèi)膜不典型增生組（80.0%、76.7%），Ki-67陽(yáng)性率（59.7%）高于子宮內(nèi)膜不典型增生組（33.3%）。本文結(jié)果與上述結(jié)果相近，研究組ER、PR陽(yáng)性表達(dá)率（53.85%、50.00%）低于對(duì)照組（83.33%、83.33%）（P<0.05），Ki-67、CerbB-2陽(yáng)性表達(dá)率（76.92%、75.00%）高于對(duì)照組（20.83%、25.00%）（P<0.05）。張鵬等[16]選擇77例EC患者的病灶組織蠟塊進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)浸潤(rùn)程度>1/2的PR、ER陽(yáng)性率（18.60%、25.58%）低于浸潤(rùn)程度≤1/2的（76.47%、88.24%）（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性率（62.79%、48.84%）高于浸潤(rùn)程度≤1/2的（55.88%、55.88%）（P<0.05）。本文研究中，研究組EC患者浸潤(rùn)程度>1/2的PR、ER陽(yáng)性率25.93%、29.63%低于≤1/2的76.00%、80.00%（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性率96.30%、100.00%高于浸潤(rùn)程度≤1/2者的56.00%、48.00%（P<0.05），Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率與CerbB-2陽(yáng)性表達(dá)率高于Ⅰ期~Ⅱ期、肌層浸潤(rùn)程度<1/2、高分化與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P<0.05）。此外，經(jīng)Spearman相關(guān)性分析顯示，ER、PR與EC患者病理特征呈負(fù)相關(guān)性（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2與EC患者病理特征呈正相關(guān)性（P<0.05）。上述結(jié)果可見(jiàn)，Ki-67、C-erbB-2為陽(yáng)性，ER、PR為陰性惡性程度更高，分化較差，反之惡性程度低，分化較佳。ER與PR的存在說(shuō)明EC細(xì)胞對(duì)激素具有一定反應(yīng)性，不僅為雌激素治療方案提供重要理論依據(jù)，且激素失表達(dá)也成為評(píng)估EC激素治療效果的可靠標(biāo)志[17]。Ki-67、C-erbB-2則可以用于EC增殖狀態(tài)與分化狀態(tài)的評(píng)估，有效識(shí)別出腫瘤侵襲程度，預(yù)測(cè)治療效果，以及病情的惡化與復(fù)發(fā)情況[18]。

表3研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)與不同臨床病理特征的相關(guān)性分析

綜上所述，EC患者病灶組織中ER、PR、Ki-67、C-erbB-2表達(dá)與病理密切相關(guān)，為臨床診療與預(yù)后評(píng)估提供可靠參考。