師夢(mèng)楠，彭 云，張 杰，熊昌云,

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)茶學(xué)院，云南昆明 650000；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)熱區(qū)健康飲料研究中心，云南普洱 665000；3.宜賓市茶產(chǎn)業(yè)研究院，四川宜賓 644000）

茶樹(shù)是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物，一直以來(lái)都是以收獲芽葉為主[1]。而茶樹(shù)花作為茶樹(shù)的重要部分的開(kāi)發(fā)利用卻非常有限[2]。茶樹(shù)花為茶樹(shù)的生殖器官，是兩性花，由花萼、花柄、花冠、雄蕊以及雌蕊組成[3]。茶樹(shù)每年5 月開(kāi)始花芽分化，開(kāi)花時(shí)間一般在9～12 月[4]，具有“壽命短、花期長(zhǎng)、開(kāi)花多、結(jié)實(shí)少”的特點(diǎn)[5]。而且實(shí)驗(yàn)表明，茶樹(shù)花內(nèi)含可溶性糖、茶多酚、氨基酸、黃酮等[6-8]多種有益成分和活性物質(zhì)，具有殺菌、延緩衰老、增強(qiáng)免疫等功效[9-12]。

茶樹(shù)花主要內(nèi)含成分種類(lèi)與茶葉相似，但含量和組成比例存在一定差異[13]。對(duì)盛開(kāi)茶樹(shù)花朵和花蕾的研究中發(fā)現(xiàn)其總黃酮和總皂甙含量均顯著高于茶葉[14-15]。不同品種茶樹(shù)花露白期、破綻期、初開(kāi)期和全開(kāi)期內(nèi)的內(nèi)含化學(xué)成分也存在一定差異[16]。茶樹(shù)花中茶多酚被譽(yù)為天然的抗氧化劑[17]，對(duì)自由基有較好的清除作用[18]。更有學(xué)者將茶樹(shù)花和VC的抗氧化對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)被研究的11 個(gè)樣品中10 種總的抗氧化能力都強(qiáng)于VC，同時(shí)一半以上樣品清除DPPH 或ABTS+自由基能力比VC強(qiáng)[19]。已有研究表明云南群體種與云抗10 號(hào)具有較好的抗氧化活性[20]。云南省是產(chǎn)茶大省，茶樹(shù)花資源豐富，所以本文通過(guò)對(duì)云南地區(qū)13 個(gè)樣品茶樹(shù)花進(jìn)行生化成分、體外抗氧化及其相關(guān)性進(jìn)行研究，旨在找出體外抗氧化活性強(qiáng)的品種，以及相關(guān)性強(qiáng)的指標(biāo)，為發(fā)展利用云南茶樹(shù)花資源以及加工成健康化產(chǎn)品等方向提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

茶樹(shù)花 采摘于云南省主要產(chǎn)茶區(qū)健康無(wú)病蟲(chóng)害的茶樹(shù)上，選取了具有代表性的古茶樹(shù)資源以及人工選育的優(yōu)良品種，詳見(jiàn)表1。采摘標(biāo)準(zhǔn)均為全開(kāi)花，鮮花經(jīng)微波固樣，勻堆分成三等份于無(wú)菌袋中，置于4 ℃冰箱貯存待測(cè)；甲醇、乙腈 均為色譜純，昆明美博科技有限公司；茚三酮 分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠；氯化亞錫 分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鎂均為分析純，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司；三氯化鋁、乙酸 均為分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；咖啡堿（caffeine，CA）標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥99%，四川維克奇生物科技有限公司；沒(méi)食子兒茶素（catechin，C）、表沒(méi)食子兒茶素（epigallocatechin，EGC）、兒茶素（catechin，C）、表兒茶素（epicatechin，EC）、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）、沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（gallocatechin gallate，GCG）、表兒茶素沒(méi)食子酸酯（epicatechin gallate，ECG）、兒茶素沒(méi)食子酸脂（catechin gallate，CG）、沒(méi)食子酸（gallic acid，GA）標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥99%，成都普思生物科技有限公司；ABTS、DPPH、羥自由基清除能力、超氧陰離子清除能力試劑盒及FRAP 法試劑盒 蘇州格銳思生物科技有限公司。

表1 茶樹(shù)花試驗(yàn)樣品及來(lái)源地Table 1 Tea tree flower test sample and origin

1260 型高效液相色譜系統(tǒng)、C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）美國(guó)Agilent Technologies 公司；UV-5500 型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海元析儀器有限公司；Heraeus Fresco17 型離心機(jī) 美國(guó)賽默飛世爾公司；明澈D24 UV 型純水儀 默克（Merck Millipore）公司；MD190 酶標(biāo)儀、Nunc 系列96 孔板 美國(guó)賽默飛世爾公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 生化成分測(cè)定 參照GB/T 8303-2013[21]對(duì)試驗(yàn)樣品進(jìn)行處理；水浸出物含量參照GB/T 8305-2013[22]全量法進(jìn)行測(cè)定；游離氨基酸含量參照GB/T 8314-2013[23]茚三酮比色法進(jìn)行測(cè)定；茶多酚含量參照GB/T 8313-2018[24]進(jìn)行測(cè)定；總黃酮測(cè)定[25]：采用三氯化鋁比色法測(cè)定。稱取茶葉磨碎干樣1.00 g于100 mL 三角瓶，加沸蒸餾水40 mL，置沸水浴中提取30 min，過(guò)濾到50 mL 容量瓶并定容，搖勻即為供試液。吸取供試液0.5 mL，加1%三氯化鋁水溶液至10 mL，搖勻，10 min 后移入1 ml 比色皿中，利用分光光度計(jì)在420 nm 波長(zhǎng)處比色，蒸餾水做空白，測(cè)定吸光度（A）。

兒茶素（GC、EGC、C、EC、EGCG、GCG、ECG、CG）、咖啡堿（CA）、沒(méi)食子酸（GA）應(yīng)用HPLC[26]方法測(cè)定。樣品提?。悍Q取1 g 樣品，加入40 mL 甲醇和4 mL 鹽酸，85 ℃水浴90 min，用脫脂棉花過(guò)濾至50 mL 容量瓶中，最后用甲醇定容至刻度線得到待測(cè)液。HPLC 檢測(cè)方法：應(yīng)用1260 型高效液相色譜系統(tǒng)測(cè)定，色譜柱為C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相A 為0.261%磷酸，5%乙腈；流動(dòng)相B 為0.261%硫酸，80%乙腈。流速為1 mL/min，進(jìn)樣量為10 μL，波長(zhǎng)設(shè)置為278 nm。洗脫梯度程序：在0～22 min 內(nèi)，A 相由95%到65.5%，B 相從5%到34.5%；22～22.5 min，A 相由65.5%到0%，B 相從34.5%到100%；22.5～27.8 min，A 相由0%到95%，B 相從100%到5%；28 min 程序停止，后運(yùn)行6 min。并根據(jù)峰面積使用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。

1.2.2 體外抗氧化活性測(cè)定 ABTS+自由基清除能力、DPPH 自由基清除能力、超氧陰離子清除能力、羥自由基清除能力及總抗氧化能力（TAC）測(cè)定均采用蘇州格銳思生物科技有限公司相關(guān)試劑盒測(cè)定。試驗(yàn)設(shè)置三次重復(fù)，按照樣本質(zhì)量計(jì)算結(jié)果。

1.2.2.1 ABTS+自由基清除能力測(cè)定 參照ABTS+自由基清除能力試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。稱取0.1 g樣品，加入1 mL 的80%甲醇提取液，冰浴勻漿，勻漿后在12000 r/min，4 ℃條件下離心10 min，取上清液，置冰上待測(cè)。將酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)置為734 nm，上機(jī)檢測(cè)讀取吸光值A(chǔ)。

式中：V 表示加入提取液體積，mL；V1表示反應(yīng)中樣品體積，mL；W 表示樣品質(zhì)量，g；D 表示稀釋倍數(shù)。

1.2.2.2 DPPH 自由基清除能力測(cè)定 參照DPPH自由基清除能力試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。稱取0.1 g樣品，加入1 mL 的80%甲醇提取液，冰浴勻漿，勻漿后在12000 r/min，4 ℃條件下離心10 min，取上清液，置冰上待測(cè)。將酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)置為517 nm，取200 μL 轉(zhuǎn)移至96 孔板內(nèi)，于517 nm 處讀取吸光值A(chǔ)。

式中：V 表示加入提取液體積，mL；V1表示反應(yīng)中樣品體積，mL；W 表示樣品質(zhì)量，g；D 表示稀釋倍數(shù)。

1.2.2.3 超氧陰離子清除能力測(cè)定 參照超氧陰離子清除能力試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。稱取0.1 g 樣品，加入1 mL 提取液，冰浴勻漿，勻漿后在12000 r/min，4 ℃條件下離心10 min，取上清液，置于冰上待測(cè)，等待上機(jī)檢測(cè)。將酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)置為570 nm，取200 μL 轉(zhuǎn)移至96 孔板內(nèi)，于570 nm 處讀取吸光值A(chǔ)。

1.2.2.4 羥自由基清除能力測(cè)定 參照羥自由基清除能力試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。稱取0.1 g 樣品，加入1 mL 蒸餾水，冰浴勻漿，勻漿后在12000 r/min，4 ℃條件下離心10 min，取上清液，置冰上待測(cè)。將酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)置為510 nm，上機(jī)檢測(cè)讀取吸光值A(chǔ)。

1.2.2.5 總抗氧化能力測(cè)定 參照FRAP 法試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。稱取0.1 g 樣品，加入1 mL 的80%乙醇進(jìn)行勻漿，勻漿后轉(zhuǎn)入離心管中；60 ℃，200～300 W 條件下超聲提取30 min（間隔5 min 振蕩混勻一次），之后在12000 r/min，4 ℃條件下離心10 min，取上清液，置冰上待測(cè)。將酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)置為590 nm，待測(cè)液上機(jī)檢測(cè)讀取吸光值A(chǔ)。

式中：△A=A 測(cè)定-A 空白；V 表示加入提取液體積，mL；V1表示反應(yīng)中樣品體積，mL；W 表示樣品質(zhì)量，g；D 表示稀釋倍數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)設(shè)計(jì)包括3 次重復(fù)，數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，試驗(yàn)樣品中的理化成分含量使用軟件IBM SPSS Statistics26、Duncan 檢驗(yàn)方法進(jìn)行P＜0.05 水平上的多重比較，對(duì)樣品間差異進(jìn)行顯著性分析，使用Origin 進(jìn)行作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶樹(shù)花生化成分分析

2.1.1 不同茶樹(shù)花樣品中主要生化成分含量 對(duì)13 個(gè)茶樹(shù)花樣品的水浸出物、游離氨基酸、茶多酚、總黃酮、咖啡堿和沒(méi)食子酸進(jìn)行檢測(cè)，具體結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 茶樹(shù)花主要生化成分分析Table 2 Analysis of the main biochemical components of tea tree flowers

結(jié)果所示，樣品水浸出物含量在41.22%～63.73%之間，高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)普洱茶（曬青茶）規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求（≥35%）[27]。13 個(gè)樣品中，墨江古茶樹(shù)花含量最高為63.73%，苦竹山古茶樹(shù)花含量最低為41.22%。其中，地界、冰島古茶樹(shù)花、福云6 號(hào)無(wú)顯著差異（P＞0.05），其他樣品均有顯著差異（P＜0.05）。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，古茶樹(shù)花水浸出物含量41.22%～63.73%，波動(dòng)范圍大于非古茶樹(shù)花水浸出物含量45.45%～62.77%范圍。推測(cè)可能是因?yàn)榉枪挪铇?shù)的樣品多為國(guó)家級(jí)、省級(jí)良種，性狀比較穩(wěn)定；而古茶樹(shù)大多為地方群體種，種間變異性較大，具體原因還需要深入研究。

實(shí)驗(yàn)測(cè)得樣品茶多酚含量范圍為7.74%～13.56%，最高的是墨江古茶樹(shù)花，秧塔大白茶古茶樹(shù)花茶多酚含量最低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果高于學(xué)者對(duì)江浙地區(qū)5 個(gè)茶樹(shù)花茶多酚含量6.35%～8.19%的研究[28]。這可能是樣品受處理方式以及品種差異的影響。各茶樹(shù)花樣品的游離氨基酸含量在1.61%～5.91%之間，江城古茶樹(shù)花和布朗山古茶樹(shù)花明顯高于其他樣品，而紫娟、雪芽100 號(hào)含量則比較低。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，游離氨基酸含量除江城、布朗山古茶樹(shù)花含量較高外，其他樣品含量處于1.61%～2.93%之間，與石興云等[29]通過(guò)常規(guī)法測(cè)得云南大葉種茶樹(shù)花中游離氨基酸的含量相近。這可能也和加工方式[30]以及樹(shù)齡、栽培條件等有關(guān)[31]?？Х葔A是重要的活性物質(zhì)[32]，測(cè)得樣品含量范圍為4.98～8.46 mg/g，勐庫(kù)大葉種、雪芽100 號(hào)含量最高，墨江古茶樹(shù)花含量最低。黃酮類(lèi)物質(zhì)具有抗菌消炎等生物活性[33]，被測(cè)樣品中黃酮含量為4.21～8.63 mg/g，其中福云6 號(hào)、雪芽100 號(hào)茶樹(shù)花黃酮含量較高，江城古茶樹(shù)花、冰島古茶樹(shù)花、勐海大葉種茶樹(shù)花黃酮含量較少。與此同時(shí)，測(cè)得的13 個(gè)茶樹(shù)花樣品沒(méi)食子酸含量均表現(xiàn)出差異性，墨江古茶樹(shù)花含量最高，含量最低的為勐庫(kù)大葉種。13 個(gè)樣品在生化成分上均表現(xiàn)出一定的差異性，可結(jié)合具體成分合理開(kāi)發(fā)和利用茶樹(shù)花資源。

2.1.2 茶樹(shù)花中兒茶素組成成分分析 兒茶素是茶葉中抗氧化、抗增殖等功效的關(guān)鍵活性物質(zhì)[34]，特別是EGCG 和EGC[35]。對(duì)樣品中的兒茶素類(lèi)物質(zhì)用HPLC 進(jìn)行測(cè)定，利用外標(biāo)法處理數(shù)據(jù)，具體結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 兒茶素類(lèi)物質(zhì)含量Table 3 Contents of catechins

試驗(yàn)共檢測(cè)出8 種兒茶素單體化合物，分別為沒(méi)食子兒茶素（GC）、表沒(méi)食子兒茶素（EGC）、兒茶素（C）、表兒茶素（EC）、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（EGCG）、沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（GCG）、表兒茶素沒(méi)食子酸酯（ECG）、兒茶素沒(méi)食子酸酯（CG），其中酯型兒茶素含量12.28～41.54 mg/g 顯著（P＜0.05）高于非酯型兒茶素4.17～13.34 mg/g。不同于學(xué)者對(duì)“黃金桂”茶樹(shù)品種的研究結(jié)果：茶樹(shù)花兒茶素含量以非酯型兒茶素為主[36]。推測(cè)可能是加工工藝等因素導(dǎo)致酯型兒茶素和非酯型兒茶素含量的不同。13 個(gè)樣品兒茶素中EGCG 含量最高，其次是ECG、EGC；含量最少的是GCG，在江城古茶樹(shù)、地界古茶樹(shù)、雪芽100 號(hào)、紫娟4 個(gè)樣品中并沒(méi)有檢測(cè)到該單體。茶樹(shù)鮮葉中EGCG 在兒茶素含量上也占較大比重[37]。就總酚含量而言，布朗山古茶樹(shù)花、勐庫(kù)大葉種茶樹(shù)花明顯高于其他樣品，福云6 號(hào)、冰島古茶樹(shù)花次之，秧塔大白茶古茶樹(shù)花含量最少。綜上，不同樣品茶樹(shù)花在各組分含量、酯型兒茶素、非酯型兒茶素和兒茶素總量上均存在顯著差異（P＜0.05）。

本試驗(yàn)根據(jù)測(cè)得的兒茶素指標(biāo)進(jìn)行層次聚類(lèi)分析，以期評(píng)估13 個(gè)樣品之間的相似性。結(jié)果表明（圖1）：在類(lèi)間距離為10 時(shí)，可劃分為3 類(lèi)：第1 類(lèi)聚集了勐海大葉種、墨江古茶樹(shù)花、江城古茶樹(shù)花、云抗10 號(hào)、苦竹山古茶樹(shù)花、雪芽100 號(hào)、地界古茶樹(shù)花、冰島古茶樹(shù)花，這一類(lèi)群的特點(diǎn)是兒茶素含量處于較高水平，樣品間波動(dòng)較??；第2 類(lèi)聚集了勐庫(kù)大葉種、布朗山古茶花、福云6 號(hào)，該類(lèi)群中的EGCG 含量是各品種間最高，直接與兒茶素的總量呈現(xiàn)出高度正相關(guān)。第3 類(lèi)聚集了低含量的樣品，分別是秧塔大白茶、紫娟。結(jié)果表明，通過(guò)聚類(lèi)分析可以將指標(biāo)水平相近的品種聚在一起，有利于對(duì)不同目標(biāo)的篩選。

圖1 茶樣間兒茶素組分聚類(lèi)分析Fig.1 Cluster analysis of catecin components in the samples

2.2 茶樹(shù)花體外抗氧化活性測(cè)定

對(duì)13 個(gè)茶樹(shù)花樣品檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，云南大葉種茶樹(shù)花存在抗氧化能力，但不同樣品存在一定差異性。具體結(jié)果如下（圖2）。茶樹(shù)花樣品對(duì)DPPH 自由基的清除能力顯著[38]，所有檢測(cè)樣品茶樹(shù)花的DPPH 抗氧化值變幅范圍為144.40～272.79 mg Trolox/g 鮮重。DPPH 抗氧化能力最強(qiáng)的是布朗山古茶樹(shù)花，清除率為80.98%±0.51%，最弱的是秧塔大白茶古茶樹(shù)花，清除率僅為41.85%±0.32%。不同茶樹(shù)花樣品抗氧化活性表現(xiàn)出一定的差異性，可能是不同茶樹(shù)花的生物活性成分在含量與組成結(jié)構(gòu)上的不同導(dǎo)致對(duì)茶樹(shù)花清除自由基能力的強(qiáng)弱不一樣[39]。

圖2 不同品種茶樹(shù)花的抗氧化活性Fig.2 Antioxidant activity of different varieties of tea tree flowers

茶樹(shù)花樣品對(duì)ABTS+自由基有一定的清除能力，13 個(gè)被檢測(cè)茶樹(shù)花樣品的ABTS+抗氧化值的變幅為121.07～174.81 mg Trolox/g 鮮重。其中，清除能力最強(qiáng)的是地界古茶樹(shù)花，清除率為86.73%±0.53%，其次是勐庫(kù)大葉種茶樹(shù)花、雪芽100 號(hào)茶樹(shù)花，清除率都達(dá)80%以上。秧塔大白茶古茶樹(shù)花清除率最低為59.63%±0.19%。

各個(gè)被測(cè)樣品清除羥自由基效果都較好，呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05），13 個(gè)茶樹(shù)花樣品的羥自由基清除率變幅介于69.89%～88.77%之間。其中，江城古茶樹(shù)花對(duì)·OH 的清除率最高，為88.77%±0.11%，紫娟茶樹(shù)花最低，為69.89%±0.37%。云抗10 號(hào)茶樹(shù)花和秧塔大白茶古茶樹(shù)花對(duì)·OH 的清除能力無(wú)顯著性差異，勐庫(kù)大葉種茶樹(shù)花和冰島古茶樹(shù)花對(duì)·OH的清除能力也無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

試驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)，相較其他幾種自由基清除率而言，超氧陰離子清除率相對(duì)較低。被測(cè)樣品清除能力范圍為22.83%～77.25%。其中超氧陰離子自由基清除活性最強(qiáng)的是地界古茶樹(shù)花，清除率為77.25%±0.84%，其次是冰島古茶樹(shù)花，清除率為76.16%±1.2%，兩者無(wú)顯著差異。福云6 號(hào)清除率最低，為22.83%±1.01%。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，勐庫(kù)大葉種茶樹(shù)花與云抗10 號(hào)茶樹(shù)花清除能力無(wú)顯著差異，江城古茶樹(shù)花與墨江古茶樹(shù)花清除能力差異也不顯著。

此次檢測(cè)樣品FRAP 值的變化范圍為531.75～935.61 μmol Trolox/g 鮮重。其中FRAP 還原能力最強(qiáng)的是墨江古茶樹(shù)花，F(xiàn)RAP 還原能力最弱的是秧塔大白茶古茶樹(shù)花。

對(duì)比不同檢測(cè)方法發(fā)現(xiàn)，茶樹(shù)花對(duì)羥自由基的清除作用最強(qiáng)，ABTS+自由基、DPPH 自由基稍次之，而對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用則較弱。在各個(gè)抗氧化測(cè)定中，古茶樹(shù)花都表現(xiàn)出較好的自由基清除能力，在抗氧化上可能會(huì)有更好的發(fā)展[40]。通過(guò)多種方法對(duì)茶樹(shù)花抗氧化能力進(jìn)行測(cè)定比較，這一結(jié)果說(shuō)明用多種試驗(yàn)方法進(jìn)行抗氧化能力測(cè)定是必要的，只有通過(guò)多種實(shí)驗(yàn)對(duì)比，才可以得到較為全面、可信的結(jié)果[41]，從而篩選出高抗氧化能力的品種，為充分開(kāi)發(fā)茶樹(shù)花抗氧化活性提供切實(shí)可行的幫助。

2.3 生化成分與抗氧化活性相關(guān)性分析

為探討各個(gè)樣品生化成分指標(biāo)與體外抗氧化活性的相關(guān)性，本次試驗(yàn)用Pearson 相關(guān)性分析進(jìn)行研究，結(jié)果見(jiàn)表4。DPPH 自由基清除率和EGCG、ECG、GC 存在極顯著相關(guān)性，分別是EGCG（R2=0.807，P＜0.01）＞ECG（R2=0.739，P＜0.01）＞GC（R2=0.738，P＜0.01）。而且，其與C 有顯著相關(guān)性，R2=0.610，P＜0.05。ABTS+自由基清除能力與EGCG（R2=0.700，P＜0.01）存在極顯著正相關(guān)，與茶多酚含量（R2=0.625，P＜0.05）存在顯著相關(guān)性。超氧陰離子自由基清除率僅與咖啡堿（R2=0.647，P＜0.05）存在顯著相關(guān)性?？偪寡趸芰εc茶多酚含量（R2=0.754，P＜0.01）呈極顯著相關(guān)性，與EGCG、ECG 相關(guān)性顯著，其中，EGCG（R2=0.634，P＜0.05）＞ECG（R2=0.595，P＜0.05）。鄧宇杰[39]以6 個(gè)茶樹(shù)花品種為研究材料，發(fā)現(xiàn)茶樹(shù)花中EGCG 的含量對(duì)抗氧化活性貢獻(xiàn)很大，與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果基本一致。但暫未發(fā)現(xiàn)羥自由基清除率與某成分有顯著相關(guān)性。黃酮也未表現(xiàn)出明顯的相關(guān)性，與茶葉抗氧化活性結(jié)果相似[42]。

由此可以說(shuō)明多酚類(lèi)物質(zhì)無(wú)論是總量還是單體對(duì)茶樹(shù)花的抗氧化活性都起著不同程度的相關(guān)作用，是茶樹(shù)花抗氧化活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。此外，各種生化成分的含量間也存在一定相關(guān)性，最為顯著的就是茶多酚與各兒茶素單體以及兒茶素各單體之間的相關(guān)性。

3 結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)測(cè)得不同茶樹(shù)花樣品的主要化學(xué)成分含量存在差異，其中墨江古茶樹(shù)花茶多酚、水浸出物含量最高，分別為13.56%、63.73%，江城古茶樹(shù)花氨基酸含量最高為5.91%，福云6 號(hào)茶樹(shù)花總黃酮含量最高為8.63 mg/g，咖啡堿含量最高的為勐庫(kù)大葉種茶樹(shù)花8.46 mg/g，而布朗山古茶樹(shù)花的兒茶素總量最高為52.54 mg/g。實(shí)驗(yàn)表明，各個(gè)樣品間具有一定的差異性，而且除了黃酮和咖啡堿含量，其它成分含量古茶樹(shù)花的變化幅度大于現(xiàn)代無(wú)性系茶樹(shù)花，這可能是古茶樹(shù)花更具有遺傳多樣性和可變異性的特點(diǎn)。

研究發(fā)現(xiàn)，不同茶樹(shù)花總抗氧化能力上表現(xiàn)出不同，墨江古茶樹(shù)花總抗氧化能力最強(qiáng)，為935.61±13.55 μmol Trolox/g 鮮重，秧塔大白茶古茶樹(shù)花最弱，為531.75±5.23 μmol Trolox/g 鮮重。江城古茶樹(shù)花對(duì)羥自由基的清除最強(qiáng)，地界古茶樹(shù)花有較強(qiáng)的超氧陰離子清除能力和ABTS+自由基清除能力，布朗山古茶樹(shù)花對(duì)DPPH 自由基清除作用比較強(qiáng)?？筛鶕?jù)樣品自由基清除能力的不同，選用最優(yōu)的樣品材料，來(lái)達(dá)到最佳的抗氧化結(jié)果。同時(shí)，數(shù)據(jù)顯示，茶多酚和兒茶素單體中的EGCG、ECG 與抗氧化活性呈現(xiàn)顯著相關(guān)性（P＜0.05），可作為預(yù)測(cè)茶樹(shù)花抗氧化活性的重要指標(biāo)。本文通過(guò)分析云南大葉種茶樹(shù)花生化成分含量及抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)未來(lái)可根據(jù)生化成分、抗氧化活性篩選所需茶樹(shù)花，應(yīng)用于現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)化加工，從而提升茶農(nóng)經(jīng)濟(jì)收入，延長(zhǎng)產(chǎn)業(yè)鏈。